生命科学関連特許情報
| タイトル： | 特許公報(B2)_デニブリン二塩酸塩 |
| 出願番号： | 2014523062 |
| 年次： | 2015 |
| IPC分類： | C07D 235/32,A61K 31/4184,A61K 9/19,A61P 43/00,A61P 35/00,A61P 17/06,A61P 19/02,A61P 29/00,A61P 27/02,A61P 9/10 |
特許情報キャッシュ
ルビィ ケール JP 5651271 特許公報(B2) 20141121 2014523062 20120727 デニブリン二塩酸塩 メディシノヴァ， インコーポレイテッド． 512233330 特許業務法人ＳＳＩＮＰＡＴ 110001070 ルビィ ケール US 61/457,994 20110729 20150107 C07D 235/32 20060101AFI20141211BHJP A61K 31/4184 20060101ALI20141211BHJP A61K 9/19 20060101ALI20141211BHJP A61P 43/00 20060101ALI20141211BHJP A61P 35/00 20060101ALI20141211BHJP A61P 17/06 20060101ALI20141211BHJP A61P 19/02 20060101ALI20141211BHJP A61P 29/00 20060101ALI20141211BHJP A61P 27/02 20060101ALI20141211BHJP A61P 9/10 20060101ALI20141211BHJP JPC07D235/32 DA61K31/4184A61K9/19A61P43/00 105A61P35/00A61P17/06A61P19/02A61P29/00 101A61P27/02A61P9/10 101 Ｃ０７Ｄ ２３５／３２ Ａ６１Ｋ ３１／４１８４ Ａ６１Ｋ ９／１９ Ａ６１Ｐ ９／１０ Ａ６１Ｐ １７／０６ Ａ６１Ｐ １９／０２ Ａ６１Ｐ ２７／０２ Ａ６１Ｐ ２９／００ Ａ６１Ｐ ３５／００ Ａ６１Ｐ ４３／００ ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ） 特表２００２−５３４４５２（ＪＰ，Ａ） 国際公開第２００６／０７６３７６（ＷＯ，Ａ１） 特表２００３−５１９６９８（ＪＰ，Ａ） Anticancer Research，２００５年，２５，３８９９−３９０４ BERGE，S. M.，Pharmaceutical salts，JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES，米国，AMERICAN PHARMACEUTICAL ASSOCIATION，１９７７年，Vol.66，No.1，pp.1-19 生活工学研究，２００２年，４，３１０−３１７ 新医薬品の規格及び試験方法の設定について，医薬審発第５６８号，２００１年 大島寛，結晶多形・擬多形の析出挙動と制御，PHARM STAGE，２００７年 １月１５日，Vol.6, No.10，p.48-53 高田則幸，創薬段階における原薬Formスクリーニングと選択，PHARM STAGE，２００７年 １月１５日，Vol.6, No.10，p.20-25 山野光久，医薬品のプロセス研究における結晶多形現象への取り組み，有機合成化学協会誌，２００７年 ９月 １日，Vol.65, No.9，p.907(69)-913(75) 6 US2012048528 20120727 WO2013019611 20130207 2014521654 20140828 30 20140328 早川 裕之 本出願は、援用によりその全体を本出願の一部とする２０１１年７月２９日に出願された米国特許仮出願番号６１／４５７，９９４号の優先権を主張する。 本発明は、全体としては低分子治療法分野、具体的には血管損傷剤又は血管破壊剤カルバミン酸Ｎ−［６−［［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−１−オキソプロピル］アミノ］フェニル］チオ］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−メチルエステル二塩酸塩、即ちデニブリン二塩酸塩（ＭＮ−０２９・２ＨＣｌ）に関する。血管新生による新生血管系の形成は、癌、乾癬、関節リウマチ、黄斑変性、アテローム性動脈硬化プラークのような多くの病気の発生進行における重要な病理学的段階となる。 癌分野では、例えば、腫瘍の成長には、成長する腫瘍にとって非常に重要な栄養と酸素を供給するため新生血管系の形成が必要となる。形成された血管組織はまた、有毒代謝副産物だけではなく、腫瘍付近の薬剤を取り除くための導管としても役立つ。 したがって、新生血管系を損傷又は阻害する化合物は、上記病気の治療に効用を発揮することができる。いくつかの化合物と医薬的に許容される塩には血管を損傷する働きがあることが知られている。これらの薬剤には、例えば、コンブレタスタチンＡ１やコンブレタスタチンＡ４（Ｄ．Ｊ．チャップリン他、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・キャンサー２７、Ｓ８６−Ｓ８８、１９９６）、コンブレタスタチンＡ４リン酸（ダーク他、キャンサー・リサーチ５７、１８２９−１８３４、１９９７）、コンブレタスタチンＡ１リン酸（ホルウェル他、プロシーディングス・オブ・アメリカン・アソシエーション・フォー・キャンサー・リサーチ４１、１３６３、２０００）、ＡＣ７７００（堀他、日本癌学会誌９０、１０２６−１０３８、１９９９）、コルヒノール誘導体（デービス他、ＷＯ９８／０１９７７、及びデービス他、ＷＯ００／４０５２９）、ベンゾイミダゾール誘導体（デービス、ＷＯ００／４１６６９）、例えば５、６−ジメチルキサンテノン酢酸のようなフラボン酢酸（ズウィ、病理学、２６、１６１−９、１９９４）やコルヒチン（バグリー他、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・キャンサー２７、４８２−７、１９９１）が含まれる。 ＭＮ−０２９は、癌治療法候補として現在試験されている既知の血管損傷剤である。本発明は、ＭＮ−０２９の二塩酸塩形態での発見に焦点を当てており、その形態が治療薬として有用性を持ち、以下にて更に説明するようにＭＮ−０２９の他の塩の形態に対して優位性を発揮している。医薬的に許容されるＭＮ−０２９の二塩酸塩形態の組成物を本明細書にて説明する。本発明は、また、治療法、又は、処方を必要としている患者に対しＭＮ−０２９の発明組成物若しくは発明組成物と既知化学療法との組み合わせで、又は放射線及び放射線化学処置手順とともに投与することにより、発明組成物の前述の病気への使用にも関わる。 本発明は、ＭＮ−０２９の二塩酸塩のみではなく、治療法としてのその使用にも向けられている。発明は、一実施形態では、固体形態でＭＮ−０２９二塩酸塩（ＭＮ−０２９・２ＨＣｌ）を提供するが、その特性は、角度２シータ（２θ）で１５．０１、２０．９８、２１．４９、２２．５２、２３．１５、２４．２７、２５．８０、及び２６．５７にピークが現れる粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）のトレース・パターン（又はスペクトル）により明らかすることができる。前述の固体形態は、そのディフラクトグラムでは更に１１．１０、１５．９、１８．０３、２１．２５、及び２７．４３にピークを示す。 本発明の別の実施形態は、１つ又は複数の様々な医薬的に許容できる添加剤とともにＭＮ−０２９二塩酸塩を含む医薬組成物を提供する。この実施形態の一態様では、医薬組成物を凍結乾燥製剤として提供する。 本発明の更に別の実施形態では、哺乳類における細胞増殖性疾患の治療用血管標的剤として治療上有効量のＭＮ−０２９二塩酸塩の投与を含む治療法を提供する。細胞増殖性疾患の例には、癌、乾癬、間接リウマチ、黄斑変性やアテローム性動脈硬化プラークが含まれるが、これらに限定されるものではない。 本発明は、また発明化学式２の化合物を含む、凍結乾燥医薬製剤を元に戻す方法も提供する。その方法は、溶液を提供するために有効量の医薬的に許容できる溶媒を凍結乾燥医薬製剤に加えることを含む。溶液は、治療を必要とする患者への投与に適切である。ＭＮ−０２９の一塩酸塩及び二塩酸塩形態の粉末Ｘ線回折パターンを示す。ＭＮ−０２９の一塩酸塩形態の偏光顕微鏡画像を示す。ＭＮ−０２９の二塩酸塩形態の偏光顕微鏡画像を示す。ＭＮ−０２９の一塩酸塩形態の水に対する溶解度とＭＮ−０２９の二塩酸塩形態の水とクエン酸溶液に対する溶解度のグラフを示す。（Ａ）ＭＮ−０２９の一塩酸塩と（Ｂ）ＭＮ−０２９の二塩酸塩の重量蒸気吸着（ＧＶＳ）等温線を示す。重量蒸気吸着（ＧＶＳ）等温線処理をした（Ａ）ＭＮ−０２９の一塩酸塩と（Ｂ）ＭＮ−０２９の二塩酸塩の試料のＸＲＰＤ分析を示す。（Ａ）ＭＮ−０２９の一塩酸塩と（Ｂ）ＭＮ−０２９の二塩酸塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）と熱重量分析（ＴＧＡ）を示す。ＭＮ−０２９二塩酸塩の水に対するｐＨ溶解度プロファイルを示す。水中でのＭＮ−０２９二塩酸塩のｐＨを示す。水中でのＭＮ−０２９二塩酸塩のモル浸透圧濃度を示す。１５％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン中でのＭＮ−０２９二塩酸塩のｐＨを示す。１５％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン中でのＭＮ−０２９二塩酸塩のモル浸透圧濃度を示す。 商品名デニブリン又はＭＮ−０２９としても知られている遊離カルバミン酸Ｎ−［６−［［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−１−オキソプロピル］アミノ］フェニル］チオ］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−メチルエステルは、市販されている血管破壊剤（ＶＤＡ）であり、その構造を以下の化学式１に描く。 ＭＮ−０２９遊離塩基とその二塩酸塩を以下に描く。 ＭＮ−０２９の遊離塩基（化学式１、登録番号２８４０１９−３４−７）、その一塩酸塩（登録番号７７９３５６−６４−８）及びそのビス−トリフルオロ酢酸塩（登録番号９３１４１０−８４−３）は既知のものであるが、二塩酸塩は新しい。したがって、本発明は、ＭＮ−０２９二塩酸塩（ＭＮ−０２９・２ＨＣｌ、化学式２）の、固形腫瘍や癌の多くの種類のように、制御の効かない細胞増殖及び／又は望ましくない組織成長に根ざす病気の治療用製剤、特性評価、及びその利用に焦点を当てる。 したがって、発明の１つの実施形態によれば、本発明では、プロトン核磁気共鳴分光法（1Ｈ ＮＭＲ）、フーリエ変換赤外分光法（ＦＴ−ＩＲ）、光学顕微鏡検査、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンなどが含まれるがこれらに限定されない様々な分析法を用いてＭＮ−０２９・２ＨＣｌの特性を明らかにする。したがって、本発明の一態様によれば、発明のＭＮ−０２９・２ＨＣｌ塩の特性を粉末Ｘ線回折分光法（ＸＲＰＤ）により明らかにするが、その場合角度２シータ（２θ）の反射角度で特徴的な回折Ｘ線ピークが現れる。以下にて更に考察するが、ＸＲＰＤデータはＸ線放射線源としてＣｕＫα1線を使用して入手し、得られたデータをＤｉｆｆｒａｃ Ｐｌｕｓ ＥＶＡ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖ１１．０．０．２を使用し分析提示した。 下の表１には、ＭＮ−０２９の二塩酸塩で得られた２θピークのリストを提示している。一方、表２にはＭＮ−０２９の一塩酸塩の２θ値のピークリストを比較目的で提示している。 表１と２の２θ値を比較すると、あるピークの相対的な強度は様々に異なるが、それぞれのピーク位置は変わらず一定であり、ＭＮ−０２９の二塩酸塩を対応するＭＮ−０２９の一塩酸塩から区別するためのサインとして使用することができることが明白である。例えば、表１のデータは、次の１１．１０、１５．０１、１５．９、１８．０３、２０．９８、２１．２５、２１．４９、２２．５２、２３．１５、２４．２７、２５．８０、２６．５７及び２７．４３という２θピークがＭＮ−０２９二塩酸塩の特性であるということを示している。以下の図１と表１を参照。 血管損傷剤としてのデニブリンの働きが、この化合物を病気の発生進行のために血管新生による新生血管系の発生進行を必要とするような病状の治療薬候補たらしめている。本発明の文脈では、『血管破壊剤』、『血管損傷剤』、又は『血管標的剤』という言葉を代替可能表現として使用しており、同表現は、癌腫瘍の例においては血管系の損傷、閉塞、生成阻害、又は発達遅延を生じさせ、中心壊死を引き起こさせる能力を備えた化合物、又はその医薬的に許容できる塩、溶媒和化合物、又はプロドラッグを指す。そのような病状の代表的ものには、癌、乾癬、関節リウマチ、黄斑変性、アテローム性動脈硬化プラークが含まれるがそれらに限定されるものではない。実際、デニブリンは進行した固形腫瘍の治療薬として使用することができるということが報告されている。 しかしながら、デニブリン（ＭＮ−０２９）は、その化合物の水溶性の低さのため、その治療効能は臨床環境では十分に発揮されてきていない。しかしながら、本発明は、ＭＮ−０２９の二塩酸塩を提供することによって、水溶解度と生物学的利用能を改良している。ＭＮ−０２９・２ＨＣｌの改良された生理学的特性が既知のＭＮ−０２９の一塩酸塩との比較で実際に二塩酸塩の物理化学的特性が異なることによるものであるか否かを評価するため、本発明の発明者は、様々な分析方法を用いていくつかの分析研究を行い、結晶形態及び液体状態の両方でＭＮ−０２９・２ＨＣｌの安定性、吸湿性、水溶性及び生物学的利用能を評価した。 表３に測定した二塩酸塩の物理化学的特性を例示し、ＭＮ−０２９一塩酸塩の対応する特性と比較している。特定の理論によるものではないが、本発明の発明者は、ＭＮ−０２９・２ＨＣｌの物理化学的特性において認められた違いの多くは、ＭＮ−０２９・２ＨＣｌの生物学的利用能、治療効能及び体内分布の反応速度を高めることにおいてある役目を果たしうると仮定している。 ＭＮ−０２９の二塩酸塩の物理化学的特性の有利性は、一塩酸塩との比較においてのみではなく、塩の医薬有効成分の可能性検証のために作られた他三つの塩との比較においても裏付けされていると思われる。これら他の塩とは、デニブリンのメシル酸塩、マロン酸塩、硫酸塩のことであった。これら塩はそれぞれ、不安定性、吸湿性、過度でない湿度環境においての潮解性を含む１つ又は複数の理由により、医薬製剤としては不適切とされた。対照的に、ＭＮ−０２９の二塩酸塩は、水、緩衝剤（例えばクエン酸緩衝液）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、プロピレングリコール、エタノール、ツイン８０を例外なく含む、医薬製剤中で日常的に使用されている様々な溶媒中でより高い溶解度と安定性を示した。図４を参照。 表３で例示しているように、ＭＮ−０２９の二塩酸塩の形態は、長さ４０μｍまでの針状結晶性粒子を形成し、低レベルの結晶性凝集を示す。（図３を参照。）凝集が少しでも検出される程度においては、その凝集直径は８０μｍ以下となる。発明の一実施形態において、凝集直径は、約７０μｍ、約６０μｍ、約５０μｍ、約４０μｍ、約３０μｍ、又は約２０μｍである。このように、一塩酸塩と比較して、二塩酸塩は一塩酸塩の不規則な形状の（直径１００μｍまでの）結晶性粒子を生じず、また一塩酸塩で認められるような約５００μｍまでの直径の凝集となるような、著しい凝集を生じない。（図２を参照。） 本発明によるＭＮ−０２９二塩酸塩の試料の結晶化度パーセントは、少なくとも約９０％結晶質であることが好ましく、約９５％結晶質であることがより好ましく、更には約９９％結晶質であることがより好ましく、約９９％又は１００％結晶質であることが最も好ましい。 図２と図３は、ＭＮ−０２９の一塩酸塩と二塩酸塩の偏光顕微鏡画像をそれぞれ例示している。これらの図よりＭＮ−０２９の一塩酸塩が、単一結晶直径が１００μｍまで又はそれ以上の不規則形状の結晶性粒子であることは明白である。ＭＮ−０２９の一塩酸塩はまた非常に凝集しやすい性質も備えている。典型的には、偏光顕微鏡で認められたように、結晶性凝集体の直径は５００μｍ以上の大きさである。 独立した結晶のサイズと形状において認められたこれらの相違とＭＮ−０２９の一塩酸塩と二塩酸塩の凝集における振る舞いの相違は、重要な生理学的、医薬処方的意味を持っている。例えば、ＭＮ−０２９二塩酸塩結晶の結晶サイズと形状の高い均一性と小ささは、より速くより一貫性のある溶解反応速度を備えた、より望ましい最終的な配合の薬を提供することを可能にする。改良された溶解反応速度は、同様に薬の体内分布を改善し、薬の生物学的利用能を増大させ治療効能を改善することができる。 生体内でのＭＮ−０２９・２ＨＣｌの改良された体内分布と生物学的利用能での役割を支持するものとしては、ＭＮ−０２９二塩酸塩のｐＨプロファイル、溶解特性、吸湿性、疎水性：親水性の分配係数（Ｌｏｇ Ｐ）を一塩酸塩の対応するパラメータと比較評価した水溶解度の研究から得られたデータがある。ＭＮ−０２９の塩酸塩の溶解度測定値は、以下の特性評価部分で概略を示した手順にしたがって得た。 簡潔に言えば、水溶解度測定には、定量高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いた。ＭＮ−０２９の一塩酸塩と二塩酸塩の熱力学的溶解度の特性を明らかにするために、粉末Ｘ線回折分光法も用いた。それぞれの塩の形態で２５℃の水中に２４時間平衡状態に置いた後、残留固体物質を水溶液から分離し、水性試料のｐＨを測定した。ＭＮ−０２９二塩酸塩のバイアルから回収した固体残留物のＸＲＰＤスペクトルは、固体物質がＭＮ−０２９の一塩酸塩であることを示していた。この結果は、実験条件下では、ＭＮ−０２９二塩酸塩には、その対応する一塩酸塩に変化するものがあるということを示している可能性がある。一塩酸塩は溶解度が小さく簡単に溶解せず２４時間後でも懸濁固体のままとなっている。表４ではＭＮ−０２９の一塩酸塩と二塩酸塩の水溶解度研究で得られたデータを例示している。 表４のデータは、ＭＮ−０２９・２ＨＣｌが、対応する一塩酸塩より酸性度が高く、水中での溶解度は少なくとも三倍以上高いということを例示している。ＭＮ−０２９の一塩酸塩を２５℃の水中に２４時間平衡状態に置いた後で得られた残留物のＸＲＰＤ分析では、平衡状態に置かれていない一塩酸塩のＸＲＰＤトレースとの比較でそのスペクトル・プロファイルに変化がないということが認められた。 特定の理論に縛られるものではないが、本発明の発明者は、二塩酸塩の溶解度の向上は溶解の結果できる溶液のより低いｐＨによるものと考えている。即ち、ＭＮ−０２９二塩酸塩の溶液のｐＨ低下がその水溶解度を改善している、というものである。この理論を検証するため、本発明の発明者は、様々に異なるｐＨ値のクエン酸水とクエン酸緩衝液におけるＭＮ−０２９二塩酸塩の溶解度を測定した。バイアル中のＭＮ−０２９二塩酸塩３６．９ｍｇと７４．５ｍｇに対しクエン酸水１０ｍｌを加え、クエン酸水中の二塩酸塩の二つの試料を準備した。表５を参照。 ２５℃で１２時間振とうさせ平衡状態に置いた後、それぞれのバイアル中の溶液は目視により固体残留物の無い無色透明の溶液であることを確認した。したがって、クエン酸水１ミリリットルあたりの二塩酸塩が７．５４ｍｇを超えるように、クエン酸水中のＭＮ−０２９二塩酸塩の溶解度を計算した（４．７５ｍｇ／ｍｌ）。 クエン酸緩衝液中のＭＮ−０２９二塩酸の溶解度を調べるため、クエン酸の水溶液（３．８７ｍｇ／ｍｌ）１０ミリリットルに少しずつ複数に分け二塩酸塩を加えた。固体がそれ以上溶けなくなった時点、即ち、飽和状態になった時点で、バイアルの水溶液を２５℃で振とうさせながらおよそ２４時間平衡状態においた。平衡状態の後、バイアル中には固体物質がいくらか残っていることが認められたが、これはＭＮ−０２９二塩酸塩の水溶液が飽和状態となっていたことを示している。飽和水溶液のｐＨは、未溶解の固体を濾過する前に測定した。得られた濾過液は、５つのバイアルに均等に分けて入れた。 濾過液のｐＨを予め決められたｐＨ値まで上げるため、それぞれのバイアルの濾過液には、様々な量の１Ｍ水酸化ナトリウムを加えた。表６を参照。塩基を加えることにより溶液中からの固体の沈殿が認められた。反応混合物は、２５℃で振とうさせながら平衡状態においておき、その後に残留固体を濾過し、得られる濾過液に溶解した化合物があるかＨＰＬＣにより分析する。 この研究の結果を表６と図４で例示している。濾過液のＨＰＬＣ分析で得られたデータで示すように、ＭＮ−０２９二塩酸塩の溶解度はｐＨに依存する。例えば、溶解度は、低ｐＨ値で最大となり、溶液のｐＨが上昇するにつれ溶解度は減少することが認められている。表６のデータ比較は、ＭＮ−０２９の二塩酸塩の溶解度は、ｐＨ値約１．０でのＭＮ−０２９の二塩酸塩の溶解度より、ｐＨ約５．５でおよそ３０００倍低下することを示している。 更には、図４の溶解度プロファイルで例示しているように、ＭＮ−０２９二塩酸塩の溶解度は対応する一塩酸塩のものより高い。更には、ＭＮ−０２９の二塩酸塩は、水に対してより、クエン酸水又はクエン酸緩衝液に対し高い溶解度を示す。 ＭＮ−０２９二塩酸塩は、ベンゾイミダゾール環上の窒素原子を巻き込んだ２つの互変異性体として存在しうる。図解２を参照。 ＭＮ−０２９には第一級、第二級及び第三級アミン基がある。したがって、これらアミン基のｐＫａは水溶解度、安定性、及び薬物動態においてある役割を果たすはずである。したがって、本発明の発明者が、アラニルと環上の窒素原子において予想されるｐＫａと実際に測定で得たｐＫａ値を比較したところ、ベンゾイミダゾールの窒素原子のｐＫａについて測定値と予想値に思いもよらず大きな違いがあることがわかった。したがって、イミダゾールの酸性の＞Ｎ−Ｈ基については、図解３に示したように、ｐＫａの予想値と測定値の間におよそ６倍の違いがある。しかしながら、より基本的な環上の窒素（−Ｎ＝）については、ｐＫａの観測値と予想値の違いは３０倍である。即ち、非プロトン化された環上の窒素の塩基性の測定値は、予想値よりもずっと低い。対照的に、アラニルアミノ基のｐＫａの予想値と測定値には大きな差異は認められなかった。 塩基性に関するこの違いは有利なものとなりうる。例えば、二塩酸塩は化学的に程良いふるまいをし、少なくとも一塩酸と同じ程度には安定的であるということがわかっている。更には、重量蒸気吸着（ＧＶＳ）等温線（図５）は、ＭＮ−０２９の一塩酸塩も二塩酸塩も吸湿性が著しく高くはないことを示している。しかしながら、様々に変化する湿度への曝露での試料重量のパーセント変化に対応するデータで例示するように（表７）、二塩酸塩の重量変化はより小さいものであり、そのことは一塩酸よりもＭＮ−０２９の二塩酸塩の方が吸湿性は低いということを示している。 一塩酸塩と二塩酸塩の両方について、ＧＶＳ等温線は、湿度上昇で吸着された湿気はほとんど又は全くヒステリシス無しに簡単に取り除かれることを示した。更には、ＧＶＳ着分析を行った試料のＸＲＰＤ分析での測定では、ＭＮ−０２９の一塩酸塩も二塩酸塩も、顕著な相変化を示さない（図６を参照）。 ＭＮ−０２９の二塩酸塩の高い熱安定性は、更にＭＮ−０２９の一塩酸塩とＭＮ−０２９の二塩酸塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）と熱重量分析（ＴＧＡ）からも支持されている。図７を参照。ＤＳＣトレースで見られた吸熱は、試料の全体的な分解と一致している。しかしながら、ＤＳＣの吸熱にはＭＮ−０２９の一塩酸塩についても二塩酸塩についても固相から液相への変化（溶解事象）を示唆するものはない。実際、ＭＮ−０２９の一塩酸塩が二塩酸塩よりもやや高い温度で分解が生じるが、ＭＮ−０２９の一塩酸塩もＭＮ−０２９の二塩酸塩も共におよそ同じ温度で分解が生じる。図７を参照。両試料の分解には、温度を約２５℃の周辺温度からおよそ１１０℃に上げる際の非結合溶媒の喪失をいくらか伴う。一塩酸塩は約０．９％ ｗ／ｗの溶媒を失うが、一方で二塩酸塩は約０．４％ ｗ／ｗの非結合溶媒を失う。 薬の分配係数は、薬が体内の意図した標的にどれだけ容易に到達するか、標的に到達後の薬効がどの程度あるか、及び薬の活性化状態が体内にどのくらい長く継続するか、に大きな影響を与える。分配係数（Ｌｏｇ Ｐ）は、ある与えられた分子の『薬らしさ』を評価するために医薬品化学で用いられる一つの基準である。分配係数は二つの溶液間の、一般的にはオクタノールと水の間の非イオン化化合物の濃度比である。ｌｏｇ Ｐ値は、化合物の親油性の尺度としても知られている。 医薬観点からすると、ｌｏｇ Ｐは、薬のＡＤＭＥ特性（吸収、分布、代謝、排泄）に大きな影響を持つ。したがって、化合物の疎水性は薬がどのくらい『薬らしい』かの主要決定要因となる。例えば、経口摂取に適した製剤を開発する際、薬が腸上皮の脂質二重膜を最初に通ることになる（経細胞輸送として知られているプロセス）のかを考慮することが重要となる。効率的な輸送のためには、薬は脂質二重膜に分け入るに十分な疎水性を備えていなければならないが、二重膜内部へ入った後には今度は再び分離されることのない程度に疎水性は低くなければならない。同様に、疎水性は、薬が吸収後に体内でどこに分配されるかを決める際に主要な役割を果たし、最終的には薬がどれだけ速く代謝され排出されるかを決める際に重要な役割を果たす。 ほとんどの薬には理想的なｌｏｇ Ｐ値があり、理想値から離れることは吸収力の低下、薬効を発揮すべき場所への薬の輸送速度の低下、そして最終的には生物活性の低下を結果として招く。表８はＭＮ−０２９二塩酸塩の分配係数の予想値と測定値を例示している。Ｌｏｇ Ｐ、Ｌｏｇ Ｐion及びＬｏｇ D値を得るために、オクタノール：イオン強度調整水の三つの比を用いＳｉｒｉｕｓ ＧＬｐＫａ計器を使用し電位差滴定でデータを収集し、得られた生データをＲｅｆｉｎｅｍｅｎｔ Ｐｒｏ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｖ．１．０を使用して分析した。ＡＣＤ Ｖ． ｓｏｆｔｗａｒｅとＳｙｒａｃｕｓｅ ＫＯＷＷＩＮ Ｖ．１．６７ ｓｏｆｔｗａｒｅを使用して、Ｌｏｇ Ｐの予想値を得た。 結晶性試料中のＭＮ−０２９の遊離塩基（親）のＭＮ−０２９の一塩酸塩に対する化学量論比、又はＭＮ−０２９の遊離塩基のＭＮ−０２９の二塩酸塩に対する化学量論比を、Ｓｉｒｉｕｓ ＧＬｐＫａ計器で標準的な電位差滴定で測定した。およそ５０％のメタノール共溶媒を使用しｐＨ約２から１１まで試料の滴定を行い、データをＲｅｆｉｎｅｍｅｎｔ Ｐｒｏ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖｅｒｓｉｏｎ １．０を使用し精査した。強酸性又は強塩基性の対イオンについては、化学量を推定するために精査において酸性度又は塩基性度の誤差を用いた。ｐＫａが３から１０の範囲の酸性又は塩基性の対イオンについては、親に対する対イオンの濃度ファクターから化学量を計算した。 ＭＮ−０２９・２ＨＣｌ塩における親と対イオンとの化学量論比は、約１：１．８から１：２．０の範囲である。発明の一実施形態では、親と対イオンとの化学量論比は、約１：１．８７である。この詳細記述の目的上、『親』はＭＮ−０２９化合物を指し、『対イオン』は塩化物対イオンを指す。同様に、ＭＮ−０２９の一塩酸塩における親と対イオンとの化学量は、１：１．０３である。これら結果は予想値に一致するものであり、ＭＮ−０２９の一塩酸塩と二塩酸塩の本質について更なる確認となっている。［医薬組成物と投薬量］ 本発明のＭＮ−０２９・２ＨＣｌ塩は、強力な血管破壊剤と考えられている。したがって、正常な成熟した血管系には被害を与えずに、新しく形成された血管系を破壊することができると考えられている。したがって、化合物、又は同物質の組成物は、癌、乾癬、関節リウマチ、黄斑変性、アテローム性動脈硬化プラークのような血管新生による新生血管系が病気の発生進行の重要な病理段階となる病気に対する治療法として有効である。 したがって、一実施形態では、発明は図解１で示したＭＮ−０２９の二塩酸塩を含む医薬組成物と医薬的に許容できる担体を提供する。発明のいくつかの実施形態では、組成物には、医薬調合上許容されている慣習に従い、更に１つ又は複数の追加の治療薬剤、医薬的に許容できる添加剤、賦形剤、補助剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、防腐剤、着色剤、緩衝剤、風味添加剤が含まれる。 単独治療法として又は他治療法及び治療薬との組み合わせで、発明化合物を投与することができる。追加治療薬を同時に投与すること、即ち、発明の化合物を含む薬の投与の前、中、又は後に第二薬を投与することで共投与を実行することができる。例えば、固形腫瘍の治療のために、放射線療法又は他の抗腫瘍物質と組み合わせて、発明の化合物を投与することができる。典型的な抗腫瘍化合物には、例えばビンブラスチン、パクリタキセルやドセタキセルのような細胞分裂阻害薬、例えばシスプラチン、カルボプラチンやシクロホスファミドのようなアルキル化薬、例えば５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシドやヒドロキシウレアのような代謝拮抗剤、例えばアドリアマイシンやブレオマイシンのようなインターカレート剤、例えばアスパラギナーゼのような酵素、例えばエトポシド、トポテカン、イリノテカンのようなトポイソメラーゼ阻害薬、例えばラルチトレキセドのようなチミジル酸合成酵素阻害薬、例えばインターフェロンのような生体応答調節剤、例えばエドレコロマブやＥＧＦｒ（上皮成長因子受容体）、ＨＥＲ２（ヒト上皮増殖因子受容体２）の受容体又はＶＥＧＦ（血管内皮細胞増殖因子）の受容体に対する抗体のような抗体薬、例えばタモキシフェンのような抗ホルモン剤が含まれるが、これらに限定されるものではない。 病気の予防と治療のため、本化合物を意図する投与経路と標準的な医薬慣習の点で選択した医薬組成物として投与することができる。そのような医薬形態については、経口、経頬、経鼻、外用、経直腸、非経口投与に適切な形態を取ることが可能で、従来の添加剤を使用して従来のやり方で調合することができる。例えば、非経口注射薬（静脈、皮下、筋肉内、血管内又は点滴によるものを含む）としては、組成物は例えば滅菌溶液、懸濁液、又は乳化剤の形態を取ることもできる。 発明の範囲に含まれているものとしては、化学式ＩＩの化合物、その医薬的に許容できる立体異性体、プロドラッグ、溶媒和物、水和物、又は互変異性体及び医薬的に許容できる担体を含む単位剤形に適した医薬組成物がある。 医薬組成物製造の当技術分野では既知の方法によって、経口での利用に適切な発明組成物を調合することができる。例えば、医薬的に上品で味の良いＭＮ−０２９・２ＨＣｌの製剤を提供するために、発明化合物の液体製剤には、甘味料、香料、着色剤、可溶化剤や保存料からなるグループから選択された１つ又は複数の薬剤が含まれる。 錠剤組成物については、有効成分を毒性のない医薬的に許容できる添加剤との混合で錠剤製造に使用している。そのような典型的添加剤には、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウムやリン酸ナトリウムのような不活性賦形剤、例えばとうもろこし澱粉やアルギン酸のような造粒及び崩壊剤、例えば澱粉、ゼラチンやアラビアガムのような結着剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸や滑石のような滑剤が含まれるが、これらに限定されるものではない。錠剤は、被覆しないことも、望ましい時間に渡って治療作用を持続的に提供するために胃腸管（ＧＩ ｔｒａｃｔ）での分解及び吸収を遅らせるための既知の被覆技術を使って被覆することも可能である。例えば、錠剤を被覆するために、モノステアリン酸グリセリンやジステアリン酸グリセリンのような時間を遅らせる被覆材料を使用することもできる。 経口投与用製剤は、有効成分を例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムやカオリンのような不活性固体賦形剤と混合した状態で硬ゼラチンカプセルとして、又は有効成分を水や例えばピーナッツ油、液体パラフィンやオリーブ油のような油媒体と混合した状態で軟ゼラチンカプセルとして提供することもできる。 水性懸濁液を作るためには、発明化合物を安定的な懸濁液を維持するために適切な添加剤と混合する。そのような添加剤の例には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、アラビアガムが含まれるが、これらに限定されるものではない。 経口懸濁液には、例えばレシチンのような天然のリン脂質、例えばステアリン酸ポリオキシエチレンのような脂肪酸と酸化アルキレンとの縮合物、又は、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノールのような長鎖脂肪族アルコールと酸化エチレンとの縮合物のような分散剤又は湿潤剤が含まれてもよい。他の典型的な分散剤又は湿潤剤には、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートやポリエチレンソルビタンモノオレアートのような、脂肪酸とヘキシトール又はヘキシトール無水物との部分的エステルと酸化エチレンを反応させることで得られる縮合物が含まれる。水性懸濁液には、p-ヒドロキシ安息香酸エチル又はp-ヒドロキシ安息香酸n-プロピルのような１つ又は複数の防腐剤、１つ又は複数の着色料、１つ又は複数の香料、及びショ糖やサッカリンのような１つ又は複数の甘味料が含まれてもよい。 味の良い経口薬を提供するために、上で挙げたような甘味料と香料を添加することができる。これらの組成物は、アスコルビン酸のような抗酸化剤の添加により保存することができる。 水を加える事により水性懸濁液を準備することに適した分散性粉末や細粒は、分散又は湿潤剤、懸濁化剤及び１つ又は複数の防腐剤との混合で有効成分を提供する。適切な分散又は湿潤剤と懸濁化剤は、既に上で述べたもので例示している。例えば甘味料、香料、着色料のような追加添加剤が含まれてもよい。 例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールやショ糖のような甘味料を使ってシロップやエリキシル剤を調合することもできる。そのような製剤には粘滑剤、防腐剤、香料や着色料も含まれてもよい。 医薬組成物は、滅菌注射液の形態でもよい。滅菌注射液は、例えば医薬的に許容できる緩衝液、注射用滅菌水や他の既知の医薬的に許容できる溶媒のような、毒性のない非経口的に許容できる希釈剤又は溶媒を使用して調合することができる。医薬的に許容できる注射用緩衝液、滅菌水として使用を容認できる媒体や溶媒には、リンゲル液や等張の塩化ナトリウム水溶液（生理食塩水）がある。更には、注射液には、緩衝剤、可溶化剤、及び、脂肪酸、抗酸化剤、香料、防腐剤、味覚マスキング剤のようなその他の医薬的に許容できる添加剤が含まれてもよい。 発明のＭＮ−０２９二塩酸塩を配合するに適した医薬的に許容できる担体には、水、例えばC2-10の脂肪族アルコールやC3-8の環状アルコールのようなアルコール、ゼラチン、アラビアガム、乳糖、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、滑石、植物油、ポリアルキレングリコール、ワセリン、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液のように生理学的に許容できる緩衝液が含まれるが、これらに限定されるものではない。発明のＭＮ−０２９二塩酸塩の製剤には、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）やツイン８０が含まれてもよいが、これらに限定されるものではない。発明のＭＮ−０２９二塩酸塩を配合するにあたり、適切な量の１つ又は複数の担体を、防腐剤、安定剤、湿潤剤や乳化剤のような医薬的に許容できる補助剤との組み合わせで使用することができる。 したがって、発明の一実施形態により、発明のＭＮ−０２９二塩酸塩の医薬組成物を、ＭＮ−０２９*２ＨＣｌ、その互変異性体、又は互変異性体と医薬的に許容できる添加剤の混合物を含む凍結乾燥粉末に医薬的に許容できる溶媒担体を加え元に戻すことによって作る。凍結乾燥粉末を元に戻すために加える溶媒の量は、粉末を完全に溶かし透明な溶液を作るために十分なものでなければならない。配合で使用される媒体と薬の濃度によるが、元へ戻した薬の最終的体積は、約２ｍｌから約１０ｍｌの範囲となってもよい。 発明の別の実施形態により、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを可溶化剤として、無水クエン酸を緩衝液として、塩酸又は水酸化ナトリウムをｐＨ調整剤として、滅菌水を溶媒として使用し、ＭＮ−０２９・２ＨＣｌを注射液として配合した。表９を参照。配合で使用される媒体と薬の濃度によるが、非経口製剤の最終的体積は、５ｍｌより大きくなってもよい。発明の一実施形態では、非経口製剤の最終的体積は、約１ｍｌから約１０ｍｌの範囲であり、例えば最終的な体積は約２ｍｌ、約３ｍｌ、約４ｍｌ、約５ｍｌ、約６ｍｌ、約７ｍｌ、約８ｍｌ、約９ｍｌ、又は約１０ｍｌである。 上の表９に例示している製剤は、非経口投与に適合性のあるｐＨ値５．０、張度３６５ｍＯｓｍ／ｋｇを備えており、２〜８℃の保管温度で２年以上の間安定的であった。 病気の予防や治療に必要とされる発明化合物の投薬量は、投与経路、健康状態や重症度及び化合物を単独で与えるのか又は別の医薬活性剤との組み合わせで与えるのかによって変わってくる。したがって、正確な投薬量は薬を投与する医師が決めることになるが、一般的には一日の投薬量は０．００１から１０mg／ｋｇの範囲でよいが、０．１から６ｍｇ／ｋｇまでであることが好ましい。発明の一実施形態では、ＭＮ−０２９二塩酸塩を投薬量３ｍｇ／ｋｇで、例えば、投薬量３．５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１０．５ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１１．５ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１３．５ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１４．５ｍｇ／ｋｇ、又は１５ｍｇ／ｋｇで注射する。 投薬量は、患者の体表面積（ＢＳＡ）に基づいて計算することもできる。したがって、本発明には、有効医薬成分ＭＮ−０２９の遊離塩基に相当するものを１０ｍｇ／ｍ2から４００ｍｇ／ｍ2の間で提供する注射可能な製剤をも含む。医薬製剤は、有効医薬成分ＭＮ−０２９の遊離塩基に相当するものを５０ｍｇ／ｍ2から２００ｍｇ／ｍ2の間で、例えば、約１００ｍｇ／ｍ2、１２０ｍｇ／ｍ2、１４０ｍｇ／ｍ2、１４６ｍｇ／ｍ2、１８０ｍｇ／ｍ2、２００ｍｇ／ｍ2、２２０ｍｇ／ｍ2、２４０ｍｇ／ｍ2、２６０ｍｇ／ｍ2、２８０ｍｇ／ｍ2、又は３００ｍｇ／ｍ2で提供することが好ましい。 適切な投薬量を、一日一回の一回分投薬量として、又は一日を通していくつかに分けて、任意で食事と共に摂取させるやり方で、投与することができる。発明の別の実施形態によれば、患者又は治療対象者は、医薬的に許容できる製剤としてＭＮ−０２９*２ＨＣｌの投薬を毎日受ける。あるいは、適切な投薬量を、週一度の一回分投薬量として投与を受ける。本実施形態の一態様によれば、週一度の投薬を３〜５週間連続で受け、その後１〜２週間投薬を受けず、その後にまた３〜５週間連続で週一度の投薬を受けるということも可能である。この投薬スケジュールは薬を投与する医師が適切且つ必要と考える期間維持する。［実験］［ＭＮ−０２９・２ＨＣｌの調合と特性評価］［Ａ．ＭＮ−０２９二塩酸塩の合成］ 本発明のＭＮ−０２９・２ＨＣｌ塩は、ＭＮ−０２９の遊離塩基から従来のやり方で作ることができる。例えば、ＭＮ−０２９遊離塩基を水又は水と適切な有機溶媒の混合物に分散させ、その懸濁液を氷浴によって冷却した。この懸濁液に、二当量の濃塩酸を一滴ずつ加えた。酸の付加は溶解を促し、その結果溶液は透明になる。その後、ＭＮ−０２９・２ＨＣｌを沈殿させるため、反応混合物を真空中で濃縮する。得られた固体物質を濾過により回収し乾燥させた。［Ｂ．ＭＮ−０２９二塩酸塩の特性評価］ ＸＲＰＤにより固体物質の特性評価をした。ＣｕＫα放射線（４０ｋＶ、４０ｍＡ）、θ−θゴニオメーター、自動発散・受光スリット、グラファイト・セカンダリ・モノクロメータ、シンチレーション計数機を使用し、シーメンスD５０００回折計で粉体Ｘ線回折パターンを集めた。装置性能は、認定コランダム標準（ＮＩＳＴ １９７６）を使用して確認を行った。 周辺条件で処理した試料を、与えられた粉末を使用し平板試験片として準備した。およそ３５ｍｇの試料を、磨き上げられたゼロ・バックグラウンド（５I０）シリコンウェハーに刻まれたくぼみにあまり圧力をかけずにそっと詰めた。試料は分析作業中同一平面内で回転させた。データ収集の詳細は：範囲２°から４２°２θ；ステップサイズ０．０５°２θ；ステップ毎に４秒間となっている。回折データは、計器評価ソフトウェア（ＥＶＡ）を使用してＫα2線部分取り除いた後、ＣｕＫα1線（Je＝１．５４０６A）を使用し報告する。粉末パターンの指数付けは、ＷＩＮ−ＩＮＤＥＸを使用しＩＴＯ法で行い、生の格子定数はＷＩＮ−ＭＥＴＲＩＣを使用して精密化する。 発明の代替実施形態では、非周囲条件でＸＲＰＤ分析をブルカ−ＡＸＳ／シーメンスＤ５０００温度可変回折計（ＶＴＸ）を使用した。簡潔に述べると、非周辺条件下で処理した試料を、Ｐｔ１００熱電対を備えたステンレス鋼製のくぼみ試料ホルダーに詰め込んだ。ブルカ−ＡＸＳ／シーメンスＤ５０００回折計に取り付けられたアントンパールＴＴＫ４５０温度可変カメラを使用して低温データを収集した。低温走査での計器使用条件は上述の平板試料用に記述したものと同様であった。全てのＸＲＰＤ分析は、Ｄｉｆｆｒａｃ Ｐｌｕｓ ＸＲＤ Ｃｏｍｍａｎｄｅｒ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖ２．３．１を使用して行った。 回折データは、ＥＶＡを使用してＫα2線部分取り除いた後、ＣｕＫα1線（Je＝１．５４０６A）を使用し報告される。粉末パターンは、ＷＩＮＩＮＤＥＸを使用しＩＴＯ法で指数付けを行い、生の格子定数はＷＩＮ−ＭＥＴＲＩＣを使用して精密化した。 更に別の実施形態では、ＣｕＫα放射線（４０ｋＶ、４０ｍＡ）、自動化ＸＹＺステージ、自動サンプル位置調整用レーザービデオ顕微鏡及びＨｉＳｔａｒ二次元領域検出器を使用し、ブルカ−ＡＸＳ Ｃ２ ＧＡＤＤＳ回折計で粉体Ｘ線回折パターンを収集した。Ｘ線レンズは、０．３ｍｍのピンホールコリメータと組み合わせた単一の多層膜ミラー（Ｇｏｅｂｅｌ ｍｕｌｔｉｌａｙｅｒ ｍｉｒｒｏｒ）からなる。ビーム発散、即ち、試料に対するＸ線ビームの有効サイズはおよそ４ 111ｍであった。３．２°〜２９．７°の有効２θ範囲をもたらす試料−検出器間距離２０ｃｍでθ−θ連続走査モードを使用した。試料をＸ線ビームに対し１２０秒間曝露するのが典型的であろう。 周囲条件で処理した試料を、粉砕せずに与えられたままの粉末を使用し平板試験片として準備した。平らな表面とするため、試料およそ１〜２ｍｇをガラススライドに軽く押し付けた。非周囲条件で処理した試料を、熱伝導化合物と共にシリコンウェハー上に据え付けた。その後、試料をおよそ２０℃ｍｉｎ-Jで適切な温度まで加熱し、続いてデータ収集開始前におよそ１分間等温状態においた。 上で述べたパラメータにより収集したＸＲＰＤデータの誤差範囲は２θで±０．１°未満である。ＭＮ−０２９・２ＨＣｌの試料の特質評価のため、1Ｈ核磁気共鳴分光法やフーリエ変換赤外線分光法のような他分析技術も使用した。 ［Ｃ．水溶解度調査］ 最終的な最大濃度が化合物の親遊離型１ｍＬあたり１０ｍｇ以上となるように、十分な量の化合物を０．２５ｍＬの水に懸濁して水溶解度を測定した。懸濁液は、２５℃で２４時間平衡状態におき、その後ｐＨを測定した。懸濁液を濾過し、濾過液を１０１倍に希釈した。標準溶液を基準にＨＰＬＣによる定量分析を行った。標準溶液、希釈溶液及び非希釈溶液の様々な量を注射し、標準溶液の主要ピークと同時に検出されたピークを積分し溶解度を算出した。 ［Ｄ．ｐＨの関数としてのＭＮ−０２９二塩酸塩の溶解度］ ｐＨ範囲２から７をカバーするように緩衝液を準備した。薬をおよそ５から１０ミリグラム計量しＨＰＬＣのバイアルに入れ、そこに適切な緩衝液１．００ｍＬを加えた。溶液を短時間ボルテックスし、その後オービタルシェーカーで５日間振とうさせた。ＭＮ−０２９の他の塩の形態での初期製剤研究中に平衡に達するまで速度の遅さが観察されていたために、振とうを長時間行った。 前の緩衝液から１５％ＨＰＢＣＤを追加した緩衝液を作った。いくつかの１０ｍＬメスフラスコそれぞれへＨＰＢＣＤ１．５グラムを計量し入れた。ＨＰＢＣＤを溶解し、適切な緩衝液で希釈した。容器重量補正をしたＨＰＬＣバイアルにＭＮ−０２９二塩酸塩を１５から２０ミリグラム計量し入れた。二塩酸塩に緩衝液をそれぞれ１．００ｍＬずつ加え、塩を溶解させるため、その溶液を短時間ボルテックスした。それらの溶液をオービタルシェーカーに５日間かけた。溶解度結果を表１０に、ＨＰＢＣＤが無い場合の薬のｐＨ溶解度プロファイルを表８に示す。 表１０のデータが例示するように、緩衝液中のＭＮ−０２９二塩酸塩の溶解度はｐＨ２で約６ｍｇ／ｍＬであるが、ｐＨ３より上では溶解度は顕著に低下する。ＨＰＢＣＤの含有は溶解度を改善し、溶解度のｐＨ依存を解消する。例えば、ＭＮ−０２９二塩酸塩の溶解度は、１５％ＨＰＢＣＤが存在する場合、検査したｐＨ範囲（ｐＨ２からｐＨ６．９まで）全てに渡って２０ｍｇ／ｍＬより高い。 ［Ｅ．ＭＮ−０２９二塩酸塩のモル浸透圧濃度とｐＨ］ １０ｍＬメスフラスコにＭＮ−０２９二塩酸塩を計量して入れ溶液を作った。薬を水にボルテックスで溶解させ、試料を水で希釈した。このやり方で１、２、４、６、８ｍｇ／ｍＬの溶液を作った。ｐＨとモル浸透圧濃度の測定の前に、試料を室温で一晩そのまま置いておいた。 試料は８ｍｇ／ｍＬ溶液を除き全て透明であった。８ｍｇ／ｍＬ溶液は最初透明であったが、一晩置いた後には沈殿を生じた。表１０と図９及び図１０で示すように、ｐＨは薬の濃度が上昇するに従いほぼ直線的に低下し、その一方で、モル浸透圧濃度は濃度上昇に伴い６ｍｇ／ｍＬまでは直線的に上昇した。 ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰＢＣＤ）の１５％溶液中でのＭＮ−０２９二塩酸塩溶液についてもｐＨとモル浸透圧濃度を測定した。分析用に５、１０、１５、２０、及び３０ｍｇ／ｍＬの溶液を作った。適切な量の化合物を計量しＨＰＬＣバイアルへ入れ、そこに１５％ＨＰＢＣＤ１．００ｍＬを短時間ボルテックスしながら加え溶液を作った。混合時には溶液は透明であったが、確実に平衡に至らせるため溶液をオービタルシェーカーで一晩振とうした。一晩振とう後、全ての溶液は透明なままであった。ＨＰＢＣＤは濃度１５％で、ＭＮ−０２９二塩酸塩を濃度３０ｍｇ／ｍＬまで溶解するのに十分であった。表１１と図１１及び図１２に示すように、ｐＨはＭＮ−０２９二塩酸塩の濃度が上昇するに従いほぼ直線的に低下し、一方、モル浸透圧濃度圧は直線的に上昇した。ｐＨグラフの点線（図９及び図１１）は、はっきりとわかりやすくするためにデータポイントを繋いでいるもので、モル浸透圧濃度グラフの点線（図１０及び図１２）は、データの線形回帰であり、薬の濃度ゼロ点まで外挿している。 ｐＫａ予想値は、ＡＣＤ ｐＫａ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖ. ９を使用して計算した。実際のｐＫａ値は、Ｄ−ＰＡＳ付きＳｉｒｉｕｓ ＧＬｐＫａ計器で収集した。測定は、２５℃で水溶液ではＵＶにより、メタノールと水の混合液では電位差測定で行った。滴定媒体のイオン強度は、０．１５Ｍの塩化カリウム水で調整した。メタノール水混合液で得られた値は、Ｙａｓｕｄａ−Ｓｈｅｄｌｏｖｓｋｙ外挿法により共溶媒０％に補正した。Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ Ｐｒｏ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖ． １．０を使用しデータを精査した。実験により又理論的に、ＭＮ−０２９二塩酸塩の互変異性体の間のｐＫａに相違は検出されなかった。 放射線源としてＣｕＫα線を使用し得られる粉体Ｘ線回折パターンが、角度２θで１５．０１、２０．９８、２１．４９、２２．５２、２３．１５、２４．２７、２５．８０、及び２６．５７にピークを示す、化学式２の化合物の結晶形。 前記粉体Ｘ線回折パターンが、角度２θで更に１１．１０、１５．９、１８．０３、２１．２５及び２７．４３にピークを示す、請求項１に記載の化合物の結晶形。 放射線源としてＣｕＫα線を使用し得られる粉体Ｘ線回折パターンが、角度２θで１５．０１、２０．９８、２１．４９、２２．５２、２３．１５、２４．２７、２５．８０、及び２６．５７にピークを示す、化学式２の化合物の結晶形と、１つ又は複数の医薬的に許容できる添加剤とを含む医薬組成物。 凍結乾燥製剤である、請求項３に記載の医薬組成物。 癌、乾癬、関節リウマチ、黄斑変性及びアテローム性動脈硬化プラークからなるグループから選択される哺乳類の細胞増殖性疾患を治療するための請求項３または４に記載の医薬組成物。 放射線源としてＣｕＫα線を使用し得られる粉体Ｘ線回折パターンが、角度２θで１５．０１、２０．９８、２１．４９、２２．５２、２３．１５、２４．２７、２５．８０、及び２６．５７にピークを示す、化学式２の化合物の結晶形と、１つ又は複数の医薬的に許容できる添加剤、および凍結乾燥医薬製剤に医薬的に許容できる溶媒を有効量加え、溶液を提供することを含む、 前記凍結乾燥医薬製剤をもどす方法。