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| タイトル： | 公開特許公報(A)_４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の製造方法 |
| 出願番号： | 2010209565 |
| 年次： | 2012 |
| IPC分類： | C07C 37/11,A61K 31/05,A61P 3/04,A61P 43/00,A61P 17/00,A61P 35/00,A61K 8/34,A61Q 19/00,C07C 39/21,C07B 61/00 |
特許情報キャッシュ
松川 泰治 來住 明宣 土井 聡 野島 正朋 松居 雄毅 山田 泰正 山田 一郎 JP 2012062292 公開特許公報(A) 20120329 2010209565 20100917 ４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の製造方法 ユーハ味覚糖株式会社 390020189 柳野 隆生 100074561 森岡 則夫 100124925 関口 久由 100141874 松川 泰治 來住 明宣 土井 聡 野島 正朋 松居 雄毅 山田 泰正 山田 一郎 C07C 37/11 20060101AFI20120302BHJP A61K 31/05 20060101ALI20120302BHJP A61P 3/04 20060101ALI20120302BHJP A61P 43/00 20060101ALI20120302BHJP A61P 17/00 20060101ALI20120302BHJP A61P 35/00 20060101ALI20120302BHJP A61K 8/34 20060101ALI20120302BHJP A61Q 19/00 20060101ALI20120302BHJP C07C 39/21 20060101ALI20120302BHJP C07B 61/00 20060101ALN20120302BHJP JPC07C37/11A61K31/05A61P3/04A61P43/00 111A61P17/00A61P35/00A61K8/34A61Q19/00C07C39/21C07B61/00 300 6 ＯＬ 20 4C083 4C206 4H006 4H039 4C083AA122 4C083AC072 4C083AC122 4C083AC182 4C083AC232 4C083AC302 4C083AC422 4C083AC442 4C083AC471 4C083AC472 4C083AD092 4C083CC01 4C083CC02 4C083CC03 4C083CC05 4C083DD31 4C083EE07 4C083EE12 4C083EE13 4C083EE14 4C083FF01 4C206AA01 4C206AA02 4C206CA19 4C206MA01 4C206MA04 4C206MA42 4C206MA54 4C206MA55 4C206MA72 4C206MA83 4C206NA14 4C206ZA70 4C206ZA89 4C206ZB26 4C206ZC20 4H006AA02 4H006AA03 4H006AB10 4H006AB12 4H006AB20 4H006AB28 4H006AC21 4H006AC26 4H006BA05 4H006BA06 4H006BA07 4H006BA19 4H006BA32 4H006FC52 4H006FC74 4H006FE13 4H039CA12 4H039CA21 4H039CF10 4H039CG40 4H039CL11 本発明は、４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の製造方法に関するものである。また、該４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を含むリパーゼ阻害剤、抗肥満剤、皮膚疾患治療剤、抗癌剤、食品、医薬品、又は化粧品に関するものである。 カフェ酸は植物の二次代謝産物の一つであり、例えば樹木の主成分であるリグニンやリグナンの前駆体となるほか、クロロゲン酸やロズマリン酸などの機能性成分の前駆体にもなっており、天然界に比較的多く存在する成分である。クロロゲン酸としてコーヒー豆などに、ロズマリン酸としてシソ科の植物に多く含まれている。また、カフェ酸としては、多くの果物の果実や果皮に含まれている。これらは全て食経験があり人に対する安全性も高い成分である。カフェ酸の有用性や、有用なカフェ酸誘導体等の開示があるが、カフェ酸から４−ビニルカテコール重合化合物を生成させる製造方法は見出されていない。 カフェ酸の生理機能に関連した先行技術がある。例えば、カフェ酸とフェルラ酸からなる高血圧予防・治療剤（特許文献１）、カフェ酸を有効成分とする自律神経機能向上剤（特許文献２）、カフェ酸を有効成分とする血管内皮機能改善剤（特許文献３）、カフェ酸を有効成分とする血液流動性改善剤（特許文献４）、カフェ酸を有効成分とする大脳疲労回復剤（特許文献５）、カフェ酸を有効成分とする二次胆汁酸低下剤（特許文献６）が知られている。 また、カフェ酸誘導体に関連した先行技術がある。例えば、カフェ酸アミド誘導体を有効成分とする化粧料用又は皮膚外用剤用組成物（特許文献７）、カフェ酸の糖転移物を有効成分とする抗微生物剤（特許文献８）、カフェ酸誘導体を有効成分とする神経突起伸長剤（特許文献９）、カフェ酸のセロトニンアミドやその配糖体を有効成分とする血行動態改善剤（特許文献１０）、カフェオイルキナ酸を有効成分とするアルツハイマー病予防又は治療剤（特許文献１１）、プロポリス中の微量成分であるカフェ酸フェネチルエステルを効率的に製造する方法（特許文献１２）、桂皮酸誘導体の酵素合成法（特許文献１３）、２−カフェ酸シクロヘキサエステル等のカフェ酸誘導体を有効成分とする抗がん剤（特許文献１４）、カフェ酸等を原料の一つとして酵素合成におり得た新規ポリフェノール化合物（特許文献１５）が知られている。 このようにカフェ酸、そしてカフェ酸誘導体は優れた有用性を示すものが多いことから、原料やリード化合物としてのカフェ酸を効率的に製造する技術開示もなされている。例えば、コーヒー粕から製造する方法（特許文献１６）、ゴボウ葉からの製造方法（特許文献１７）、甘しょ焼酎蒸留粕からの製造方法（特許文献１８）が知られている。 一方、コーヒー生豆を２００℃以上で焙煎することで、多数の4−ビニルカテコールのオリゴマーが高温での加熱反応によりコーヒー豆中に僅かに生成することが報告されている（非特許文献１、非特許文献２）。しかしながら、これらの４−ビニルカテコールのオリゴマーはコーヒー飲料中のｐＨ４．９〜６．５では非常に不安定であり、天然界には殆ど存在しない希少成分でもあるため、現在までのところ、その生理活性に関する報告はなく、前記非特許文献１、２でも、焙煎後のコーヒーの苦味の一因となる化合物であることが示唆されているにすぎない。コーヒー飲料は、長きに渡って人が喫してきた安全な飲み物であるが、４−ビニルカテコール重合化合物の存在量は、一般に高感度であるＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量しなければならない程に少ないものである。したがって、前記コーヒー生豆の焙煎による製造方法では、４−ビニルカテコール重合化合物の劇的な生産効率の改善は困難であり、多量のコーヒー豆を必要とするためにコストがかかり、また焙煎時の温度条件は２００℃以上の高温を要するからそもそも工業化には不向きなものである。 このような状況から、有用なカフェ酸関連化合物である４−ビニルカテコール重合化合物を容易に工業化できる効率的な生成方法の確立が望まれていた。特許第３５４８１０２号公報特許第４０７７１４９号公報特開２００３−２６１４４４号公報特開２００４−１６８７４９号公報特開２００７−２９７３０４号公報特開２００９−２２７６０９号公報特許第３９３４９３７号公報特開２００４−３１５３８６号公報特開２００７−２３０９４６号公報国際公開第２００７／０３２５５１号パンフレット国際公開第２００７／０９１６１３号パンフレット特開２０１０−１５８２２３号公報特開２００９−２０７４９２号公報特開２０１０−１８０１６７号公報国際公開第２０１０／０３８８４２号パンフレット特開２００９−２０１４７３号公報特許第４３５５７９７号公報特許第４３３６７４６号公報Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．２００７， ５５， １９４５−１９５４Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．２０１０， ５８， ３７２０−３７２８ 本発明者らは、カフェ酸、カフェ酸誘導体に関する前記の状況を鑑みて、新規な生理活性を有するカフェ酸関連化合物の探索と、その製造方法を確立すべく鋭意検討した結果、驚くべきことにカフェ酸を金属塩存在下で加熱処理することで、前記式（１）で示したカフェ酸関連化合物である４−ビニルカテコール重合化合物を生成できることを初めて見出し、さらに該前記式（１）で示した４−ビニルカテコール重合化合物が原料であるカフェ酸には認められない優れたリパーゼ阻害活性、抗癌活性を有することを明らかにし、本発明を完成するに至った。 したがって、本発明は、優れた抗癌活性及びリパーゼ阻害活性を有する前記式（１）で示した４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を効率よく製造する方法を提供することを目的とする。 また、本発明は、前記式（１）で示した４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含有するリパーゼ阻害剤、抗肥満剤、皮膚疾患治療剤及び抗癌剤、さらには前記式（１）で示した４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含有する食品、医薬品、又は化粧品を提供することを目的とする。 本発明の要旨は、〔１〕カフェ酸を金属塩存在下で加熱処理することにより下記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物を生成することを特徴とする式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の製造方法。〔２〕前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなるリパーゼ阻害剤。〔３〕前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなる抗肥満剤。〔４〕前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなる皮膚疾患治療剤。〔５〕前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなる抗癌剤。〔６〕前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含有することを特徴とする食品、医薬品、又は化粧品。に関する。 本発明により、前記のように生理活性に優れた４−ビニルカテコール重合化合物及びその薬学的に許容可能な塩を効率よく安全に製造することができる。 本発明に用いられる４−ビニルカテコール重合化合物及びその薬学的に許容可能な塩は、カフェ酸と比べて、リパーゼ阻害活性及び抗癌活性が高いことから、優れた抗肥満剤、皮膚疾患治療剤及び抗癌剤を提供することができる。 また、本発明の４−ビニルカテコール重合化合物及びその薬学的に許容可能な塩は、前記のような生理活性に優れることに加えて、安全性にも優れることから、食品、医薬品、又は化粧品に配合することができる。図１は、実施例１で行ったＨＰＬＣの分析結果を示す。上図が反応前、中図が1回目の反応、下図が２回目の反応の結果であり、「Ｂ」が４−ビニルカテコール重合化合物のピークを示す。図２は実施例４の細胞増殖抑制試験より得られた結果を示すグラフである。 図２の縦軸は細胞生存率を、横軸は各試料の濃度を示している。図３は実施例５のＤＮＡラダー法より得られた電気泳動の結果であり、アポトーシス誘導能を示したものである。図４は、実施例５のタンパク質抽出物の電気泳動写真であり、活性化されたカスパーゼ３の検出を示したものである。 以下、本発明について詳細に説明する。 本発明のリパーゼ阻害剤、抗肥満剤、皮膚疾患治療剤及び抗癌剤における有効成分である４−ビニルカテコール重合化合物は、式（１）：で表される構造式を有する。 前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物は、薬学的に許容可能な塩でもよい。薬学的に許容可能な塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩； マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩等のアルカリ土類金属塩； アルミニウム塩；アルミニウムヒドロキシド塩等の金属ヒドロキシド塩； アルキルアミン塩、ジアルキルアミン塩、トリアルキルアミン塩、アルキレンジアミン塩、シクロアルキルアミン塩、アリールアミン塩、アラルキルアミン塩、複素環式アミン塩等のアミン塩；α−アミノ酸塩、ω−アミノ酸塩等のアミノ酸塩；ペプチド塩又はそれらから誘導される第１級、第２級、第３級若しくは第４級アミン塩等が挙げられる。これらの薬理的に許容し得る塩は、単独で又は２種以上を混合して用いることができる。 前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩（以下、本発明品中の有効成分である４−ビニルカテコール重合化合物と略する）は、前駆体であるカフェ酸には認められない強いリパーゼ阻害活性及び抗癌活性を有する化合物である。 本発明において、前記４−ビニルカテコール重合化合物は、カフェ酸を、金属塩存在下で加熱処理することで、生成することができる。 前記４−ビニルカテコール重合化合物は、非特許文献１で示されているように、焙煎したコーヒー豆などから加熱反応させることで入手可能である。しかし、その含有量は微量で、その含有を確認する為にＬＣ／ＭＳ／ＭＳという高感度の分析機器が必要であるなど産業化する上でコスト面において大きな障害がある。これに対して、本発明の製造方法は、比較的安価に入手できるカフェ酸を金属塩存在下で加熱処理する工程を有するものであり、有害な試薬や、危険な工程を必要としない効率的で安全な製造方法である。 本発明の製造方法では、４−ビニルカテコール重合化合物の前駆体としてカフェ酸が必要である。カフェ酸は、天然由来のものであっても、化学合成された純度の高い化成品であっても良い。天然由来のカフェ酸を用いる場合は、完全に精製されたものである必要はなく、その後の所望の反応が進み最終的に４−ビニルカテコール重合化合物が得られるから、混合物であっても問題ない。ただし、回収量の観点からは、カフェ酸を５重量％以上含有する混合物が原料として望ましい。このような原料としては、様々な果実やジュース、濃縮果汁、又は、破棄されることの多い果皮の抽出物、あるいは先行技術に示されるような微生物発酵によるカフェ酸含有培養液や酵素反応後のカフェ酸含有溶液等が挙げられる。 カフェ酸の純品、あるいはカフェ酸含有混合物を、適切な溶媒に溶解させる。この際、溶媒が水のみであればカフェ酸の溶解度が著しく低いために、水と有機溶媒の混液や、有機溶媒のみに溶解させればよい。水と有機溶媒の配合比や、有機溶媒の種類に特に制限はなく、カフェ酸が十分に溶解すれば良い。望ましくは、メタノールやエタノールのみか、水とメタノール、水とエタノールの混液を使用することが、安全性やコスト面から望ましい。最終的な精製を十分に適用せずに食品に使用する場合には、安全性や法規面からエタノールや含水エタノールの使用が望ましい。 前記金属塩としては、酸性塩、塩基性塩、正塩のいずれでもよく、また、単塩、複塩、錯塩のいずれでもよい。さらに、金属塩は１種類であっても、複数種類の混合物であってもよい。金属塩の例としては、食品添加物として認可されているものが安全性の面で好ましい。例えば、食品に添加することが認められているマグネシウム塩、カルシウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、亜鉛塩、銅塩などが挙げられる。 また、前記金属塩の混合物としては、例えば、ミネラルプレミックス（田辺製薬株式会社 グルコン酸亜鉛、クエン酸鉄アンモニウム、乳酸カルシウム、グルコン酸銅、リン酸マグネシウムを主成分としたミネラル混合物）のように金属塩を数種類含む物質が挙げられる。また、複数の金属塩を含む混合物として、ミネラルウォーターも挙げることができる。 本発明において、前記金属塩を含有したカフェ酸含有溶液を加熱する。所望の反応を効率的に進ませるために、加熱温度は９０℃以上が必要である。溶媒の沸点から考え、加圧加温が望ましい。開放容器にカフェ酸含有溶液を入れ高温で容器を加温する、密閉容器にカフェ酸含有溶液を入れ加温する、レトルト装置やオートクレーブを用いて加圧加温する等、少なくとも部分的に溶液温度が９０℃以上に達することが必要である。回収効率面から、溶液温度が均一に９０℃〜１５０℃になることが、さらに好ましい。１５０℃を越えると回収効率が低く適さない。加熱時間も加熱温度と同様に限られたものではなく、効率的に目的の反応が進行する時間条件とすればよい。特に、加熱時間は加熱温度との兼ね合いによるものであり、加熱温度に応じた加熱時間にすることが望ましい。例えば、１３０℃付近で加熱する場合は、５分〜３００分の加熱時間が望ましい。また、加熱反応は、一度でも良いし、複数回に分けて繰り返し加熱しても良い。効率面から判断すればよい。 また、本発明では、前記金属塩を含有したカフェ酸含有溶液のｐＨは９未満の範囲に調整することが好ましい。前記非特許文献２に記載のように、４−ビニルカテコールのオリゴマーは、もともとｐＨが４．９〜６．５付近では非常に不安定であることが知られていたが、本発明では、金属塩存在下で加熱することにより、ｐＨが４．９〜６．５付近の範囲としても安定して４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を製造することができる。 前記の金属塩存在下で加熱処理することでカフェ酸同士が反応して、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を含有した混合物が得られる。安全な原料のみを用いた工程で得られた場合には、混合物の状態で使用することが可能である。例えば、天然由来のカフェ酸をエタノール溶媒に溶解し、ミネラルミックスやミネラルウォーターを加え、加熱反応させた場合には、混合物として食品原料の一つとして使用が可能である。 風味面での改良やさらなる高機能化を望む場合は、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を濃縮して濃度を高める、あるいは精製し純品を得ることができる。濃縮、精製は、公知の方法で実施可能である。例えば、クロロホルム、酢酸エチル、エタノール、メタノール等の溶媒抽出法や炭酸ガスによる超臨界抽出法等で抽出して濃縮できる。カラムクロマトグラフィーを利用して濃縮や精製を施すことも可能である。再結晶法や限外ろ過膜等の膜処理法も適用可能である。最後に減圧乾燥や凍結乾燥により溶媒除去すると、粉末状の前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の純品を得ることができる。 前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩は、後述のように、優れたリパーゼ阻害活性、抗癌活性を有する。 ここで、従来から、からだの脂肪組織及び種々の臓器に異常な脂肪沈着を来し、その結果起こる肥満、あるいは血清脂質が異常に高い症状を示す高脂血症は、高血圧、動脈硬化、糖尿病などの各種生活習慣病の発症に密接に関与していることがわかっている。例えば、ヒトが食べた食餌中の脂肪は、膵臓のリパーゼで分解されて小腸から体内に吸収されるため、リパーゼ阻害剤を用て、肥満を防止したり、高脂血症状を改善したり、ニキビ等の皮膚疾患を治療することが可能とされており、その相関性も確認されている（例えば、特許第３６８９０９９号公報、特許第３８２６６９８号公報）。 したがって、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を有効成分として含有する抗肥満剤、皮膚疾患治療剤及び抗癌剤として使用することができる。また、前記抗肥満剤、皮膚疾患治療剤及び抗癌剤では、他の有効成分を含有しても良い。 また、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩は、前記抗肥満効果、皮膚疾患治療効果又は抗癌効果を目的として、液状、ペースト状、ゲル状、及び固形状の食品、医薬品、化粧品等として使用することができる。 例えば、食品の場合には、水、アルコール、澱粉質、蛋白質、繊維質、糖質、脂質、ビタミン、ミネラル、着香料、着色料、甘味料、調味料、安定剤、防腐剤等のような食品に通常配合される原料又は素材と組み合わせて、また医薬品の場合には、担体、賦形剤、希釈剤、安定剤等と組み合わせて、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を使用することが出来る。特に、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の有する生理活性を考慮すると、抗肥満効果によるメタボリックシンドロームなどの生活習慣病の予防、癌予防・癌治療等の健康維持増進、さらには疾病治癒分野において用いることが好ましい。また、ニキビ治療や予防を目的とした美容分野における化粧品などで用いることが望ましい。 前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩が持つさらなる効果効能は、得られた生理活性データより類推できる範囲で使用できる。 前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を医薬用途で使用する場合、例えば、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の摂取量は、所望の改善、治療又は予防効果が得られるような量であれば特に制限されず、通常その態様、患者の年齢、性別、体質その他の条件、疾患の種類並びにその程度等に応じて適宜選択される。１日当たり約０．１ｍｇ〜１，０００ｍｇ程度とするのがよく、これを１日に１〜４回に分けて摂取することができる。 前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩は、機能性食品、健康食品、健康志向食品等の食品に使用することができる。食品の形態としては、例えば、飲料、アルコール飲料、ゼリー、菓子等、どのような形態でもよく、例えば、菓子類の中でも、その容量等から保存や携帯に優れた、ハードキャンディ、ソフトキャンディ、グミキャンディ、タブレット等が挙げられるが、特に限定はない。 また、前記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を医薬品又は食品として経口から投与又は摂取する場合には、常法に基づいて、錠剤、丸剤、カプセル剤、細粒剤、顆粒剤等としてもよい。錠剤、丸剤、顆粒剤、顆粒を含有するカプセル剤の顆粒は、必要により、ショ糖等の糖類、マルチトール等の糖アルコールで糖衣を施したり、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等でコーティングを施したりすることもできる。又は胃溶性もしくは腸溶性物質のフィルムで被覆してもよい。また、製剤の溶解性を向上させるために、公知の可溶化処理を施すこともできる。常法に基づいて、注射剤、点滴剤に配合して使用してもよい。 前記化粧品としては、ローション、乳液、クリーム、パック剤、仕上げ化粧品、頭髪用化粧品、洗顔剤、浴剤、制汗剤等が挙げられる。これらの化粧品では、リパーゼ阻害効果からニキビ治癒に特に効果が期待され、ニキビ予防・治癒等の目的で利用することができる。 前記の医薬品又は食品は、安全性に優れたものであるので、ヒトに対してだけでなく、例えば、非ヒト動物、例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サル、チンパンジー等の哺乳類、鳥類、両生類、爬虫類等の治療剤又は飼料に配合してもよい。 次に、本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、本発明はかかる実施例にのみ限定されるものではない。（実施例１：４−ビニルカテコール重合化合物の生成） カフェ酸（和光純薬工業（株）製）１ｇをエタノール２０ｍｌに溶解し、ミネラルウォーター（商品名「ゲロルシュタイナー」サッポロ飲料（株）製）２０ｍｌを加えた混合液（ｐＨ５．０）をオートクレーブ（商品名「ＳＡＮＹＯ ＬＡＢＯ ＡＵＴＯＣＬＡＶＥ」、三洋電機（株）製）にて１３０℃、４０分間加熱した（１度目の加熱処理）。得られた反応後組成物１ｍｌをメタノールにて５０ｍｌにメスアップし、このうちの１０μｌをＨＰＬＣにより分析した。さらに、エタノール１０ｍｌ、ミネラルウォーター１０ｍｌを加え（ｐＨ５．４）、再度オートクレーブにて１３０℃、４０分間加熱し（２度目の加熱処理）、同様に希釈後、ＨＰＬＣ分析した。 ＨＰＬＣ分析は以下条件にて行った。カラム：逆相用カラム「Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ（登録商標）Ｃ−３０−ＵＧ−５」（４．６ｍｍｉ．ｄ．×２５０ｍｍ）移動相：Ａ・・・Ｈ2Ｏ（０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ））， Ｂ・・・アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）流速：１ｍｌ／ｍｉｎ注入：１０μｌ検出：２５４ｎｍ勾配（容量％）：８０％Ａ／２０％Ｂから２０％Ａ／８０％Ｂまで３０分間、２０％Ａ／８０％Ｂから１００％Ｂまで５分間、１００％Ｂで１０分間（全て直線） 得られたクロマトグラムを図１に示す。上からカフェ酸、１度目の加熱、２度目の加熱のクロマトグラムを示している。上図ではカフェ酸のピークが示されている。次いで、１度目の加熱でＡのピーク（中図）で示された４−ビニルカテコールが増大し、さらに、２度目の加熱で、カフェ酸、とＡのピークが減少し、増大したピークがいくつか確認されたことから、複数の化合物が生成されていることが確認された。中でも、最大のＢのピークで示された化合物は、カフェ酸から、４−ビニルカテコールを経て、生成されていることがわかる。（実施例２：４−ビニルカテコール重合化合物の単離・構造決定） 実施例１で得られた反応物のうち、図１のＢで示したピークに含まれる化合物を分取ＨＰＬＣにより単離した。常法に従って、乾燥したところ、褐色粉末状の４−ビニルカテコール重合化合物（以下、ＵＨＡ６００５）が３０ｍｇ得られた。 次いで、前記ＵＨＡ６００５の分子量を高分解能電子イオン化質量分析法（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ−Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）にて測定したところ、測定値は２７２．２９５５であり、理論値との比較から、以下の分子式を得た。理論値Ｃ１６Ｈ１６Ｏ４（Ｍ+）： ２７２．２９５８分子式Ｃ16Ｈ16Ｏ4 次に、前記ＵＨＡ６００５を核磁気共鳴（ＮＭＲ）測定に供し、１Ｈ−ＮＭＲ、１３C−NMR及び各種２次元ＮＭＲデータの解析から、ＵＨＡ６００５が前記式（１）で表される構造を有することを確認した。このことから、式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物は本発明の方法で効率的に生成できることが示された。 なお、ＮＭＲ測定値について、式（１）で表されるＵＨＡ６００５の各部位をとし、１Ｈ核磁気共鳴スペクトル、１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルをそれぞれ表１で示す。値はδ、ｐｐｍで、メタノール−ｄ３で測定した値である。 また、ＵＨＡ６００５の物理化学的性状は、以下のようになった。（性状）褐色粉末（溶解性）水： 不溶メタノール： 可溶エタノール： 可溶ＤＭＳＯ： 可溶クロロホルム： 可溶酢酸エチル： 可溶（実施例３：ＵＨＡ６００５のリパーゼ阻害作用） リパーゼに対する各化合物の阻害作用を見るため、ラット腸由来リパーゼを用いての阻害作用試験を行った。 リパーゼは、ラット腸アセトンパウダー（シグマアルドリッチジャパン（株）製）１００ｍｇを１００ｍＭクエン酸バッファー（ｐＨ６．０）１ｍｌに懸濁して４℃で１時間撹拌し、これを遠心分離（１５０００ｒｐｍ、４５分間、４℃）した上清を４００倍希釈したものをリパーゼ溶液として使用した。 試料は、カフェ酸（和光純薬工業（株）製）と、本発明品であるＵＨＡ６００５、従来よりリパーゼ阻害作用が高いとされる緑茶成分のエピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ、和光純薬工業（株）製）の３種類を用いた。試料調製については、各々の化合物をＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド、和光純薬工業（株）製）にて溶解し、０．1ｍＭ、０．５ｍＭ、１ｍＭ、２ｍＭ、４ｍＭに調製したものを使用した。 活性測定には「リパーゼキットＳ」（商品名、大日本製薬（株）製）を使用した。まず、リパーゼキットＳのカタログに記載の調製法に従い発色液を調製した。発色液を７０μｌ、エステラーゼ阻害剤を２μｌ、リパーゼ溶液を１０μｌ、試料を１０μｌ(終濃度１０μＭ、５０μＭ、１００μＭ、２００μＭ、４００μＭ)混合した反応液を調製し、３０℃で5分間プレインキュベートした後に基質溶液を８μｌ添加して反応を開始した。１０分間の反応後、リパーゼキットＳのカタログに記載の調製法に従い調製した反応停止液を１５０μｌ添加して反応を停止した。これを測定波長４１５ｎｍの吸光度測定をおこなった。試料の溶媒であるＤＭＳＯのみを添加した反応液をポジティブコントロールとし、リパーゼ溶液の代わりに１００ｍＭクエン酸バッファー（ｐＨ６．０）１０μｌを添加したものをネガティブコントロールとした。これらから得られたデータを基に算出したリパーゼ阻害率と各化合物濃度の関係から、リパーゼ活性を５０％阻害する濃度ＩＣ50（５０％阻害濃度：ｈａｌｆ ｍａｘｉｍａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を算出した（表２）。これらの結果からＵＨＡ６００５には高いリパーゼ阻害活性が認められた。この効果はカフェ酸では認められず、エピガロカテキンガレートよりも高い活性を有していることからカフェ酸を４−ビニルカテコール重合化合物に変換する有意性が強く示唆された。 したがって、ＵＨＡ６００５は優れたリパーゼ阻害作用を奏することから、抗肥満剤として、さらにはメタボリックシンドローム予防剤として有用であると考えられる。また、皮膚におけるリパーゼ阻害はニキビ予防・治癒に有効であるから、ニキビ予防・治癒などの皮膚疾患治療剤としても有用であると考えられる。（実施例４：ＵＨＡ６００５の抗癌作用１） 次に癌細胞に対する各化合物の効果を見るため、ＨＬ−６０細胞（Ｈｕｍａｎ ｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ ｌｅｏｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ：ヒト骨髄球性白血病細胞）を用いた癌細胞増殖抑制作用について試験した。 ＨＬ−６０細胞の培養には、４ｍＭグルタミン（Ｌ−Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、シグマアルドリッチジャパン（株）製）、１０％ＦＢＳ（Ｆｏｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ、バイオロジカルインダストリーズ社製）を含む高栄養培地ＲＰＭＩ−１６９０（シグマアルドリッチジャパン（株）製）を使用した。試験には細胞培養用９６ウェルプレート（コーニングジャパン（株）製）を用い、５×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍｌとなるように細胞数を調整したＨＬ−６０細胞を１ウェルあたり１００μｌずつ播種した。 試料は、カフェ酸と、本発明品であるＵＨＡ６００５との２種類を用いた。試料調製については、各々の化合物をＤＭＳＯにて溶解し、ＨＬ−６０細胞培養液中の最終濃度がそれぞれ６．３μＭ、１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、及び1００μＭとなるように調製し、試験を開始した。 生存細胞数の定量は「Ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ−８」（商品名、ドージンドー・モレキュラー・テクノロジー（株）製）を用いたＭＴＴ法にて行った。試験開始より２４時間後、各ウェルにＣｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ−８溶液を１０μｌ添加し、よく攪拌した。１時間の遮光反応後にプレートリーダー（「ＢＩＯ−ＲＡＤ Ｍｏｄｅｌ ６８０」、バイオ・ラッドラボラトリーズ（株）製）を用いて測定波長４５０ｎｍの吸光度測定を行い、得られたデータをもとに細胞生存率を算出した（図２）。細胞生存率とは、溶媒であるＤＭＳＯのみを添加した培養液の生存細胞数を１００％とし、各化合物の濃度下における細胞の生存細胞数を相対値として算出した値である。各化合物濃度と細胞生存率の関係から、細胞増殖を５０％抑制する濃度ＩＣ50（５０％阻害濃度：ｈａｌｆ ｍａｘｉｍａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を算出した（表３）。これらの結果から、ＵＨＡ６００５には、強い癌細胞増殖抑制能が認められた。この効果は、カフェ酸には全く認められず、カフェ酸を４−ビニルカテコール重合化合物に変換する有意性が強く示唆された。（実施例５：ＵＨＡ６００５の抗癌作用２） 次いで、抗癌作用の試験を、ＨＬ−６０細胞を用いて実施した。ＨＬ−６０細胞を５．０×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍｌとなるように１００ｍｍスタンダードディッシュ（「ＢＤ Ｆａｌｃｏｎ」商品名、日本ベクトン・ディッキンソン（株）製）に播種し、ＤＭＳＯにて調整したカフェ酸とＵＨＡ６００５をそれぞれ３７．５μＭ、７５μＭ、１００μＭとなるように添加した。２４時間培養を行い、回収した細胞をＰＢＳ（ＤｕｌＢｅｃｃｏ'ｓ ＰＢＳ（−）、和光純薬工業（株）製）にて洗浄し、既知のＤＮＡ抽出法を用いて細胞からＤＮＡを抽出した。得られたＤＮＡサンプルを１％アガロースゲル（「Ａｇａｒｏｓｅ ＴＡKＡＲＡ」、タカラバイオ（株）製）に２００ｎｇ／ｗｅｌｌとなるようにアプライした。電気泳動を行い、染色反応はエチジウムブロマイド（Ｅｔｈｉｄｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ、バイオ・ラッドラボラトリーズ（株）製）を用いて行った。また、同様の条件にて培養した細胞から既知のタンパク質抽出法を用いて細胞からタンパク質を抽出した。得られたタンパク質サンプルをポリアクリルアミドゲル（「ＲＥＡＤＹ ＧＲＬＳ Ｊ」、バイオ・ラッドラボラトリーズ（株）製）に２００ｎｇ／ｗｅｌｌとなるようにアプライした。電気泳動を行い、ＰＶＤＦ膜（「Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ-ＰＳＱ」商品名、日本ミリポア（株）製）にタンパク質を転写した。検出抗体は一次抗体にカスパーゼ３ウサギポリクローナム抗体（「Ｃａｓｐａｓｅ−３ Ｒａｂｂｉｔ ＡＢ」商品名、セル・シグナリング・テクノロジー・ジャパン（株）製）、二次抗体にＨＲＰ連結ウサギＩｇＧポリクローナム抗体（「Ａｎｔｉ−Ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ ＨＲＰ−ｌｉｎｋｅｄ ＡｎｔｉＢｏｄｙ」商品名、セル・シグナリング・テクノロジー・ジャパン（株）製）を使用した。検出反応にはテトラメチルベンジジン溶液（「３，３’，５，５’−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｉｄｉｎｅ ＴＭＢ Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｆｏｒ ＨＲＰ」商品名、プロメガ（株）製）を用いて行った。 得られた結果を図３、図４に示す。 図３は、各試料のＤＮＡ抽出物の電気泳動写真であり、電流は上から下に流されている。レーン左より、ＤＮＡ分子量マーカーλ/Ｐｓｔ(第１レーン)、通常培養細胞（第２レーン）、ＤＭＳＯ処理（第３レーン）、カフェ酸３７．５μＭ処理（第４レーン）、同７５μＭ処理（第５レーン）、同１００μＭ処理（第６レーン）、ＵＨＡ６００５ ３７．５μM処理（第７レーン)、同７５μM処理(第８レーン)、同１００μM処理(第９レーン)を流した。無添加の培養細胞（第２レーン）及びＤＭＳＯ処理細胞（第３レーン）ではＤＮＡラダーが確認されないことから、本実験の信頼性が確認できる。 また、ＵＨＡ６００５を３７．５μM以上で処理した細胞（第７、第８、第９レーン）にてＤＮＡのラダー化が観察できるのに対して、同濃度のカフェ酸ではＤＮＡのラダー化は観察されなかった（第３、第４、第５レーン）。 図４は、各試料のタンパク質抽出物の電気泳動写真であり、電流は上から下に流されている。レーン左より、タンパク質分子質量マーカー（「Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｐｌｕｓ ＰｒｏｔｅｉｎＴＭ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ」商品名、バイオ・ラッドラボラトリーズ（株）製、第１レーン）、以下のレーンは先のＤＮＡ抽出物の電気泳動写真のレーンに準じている。無添加の培養細胞（第２レーン）及びＤＭＳＯ処理細胞（第３レーン）では１７ｋＤａ付近に活性化されたカスパーゼ３は検出されていないことから、本実験の信頼性が確認できる。 また、ＵＨＡ６００５を３７．５μM以上で処理した細胞（第７、第８、第９レーン）にて活性化されたカスパーゼ３が１７ｋＤａ付近に観察できるのに対して、同濃度のカフェ酸ではカスパーゼ３の活性化は観察されなかった（第３、第４、第５レーン）。この結果は先に示したＤＮＡラダーと同様の傾向を示している。これより、ＵＨＡ６００５はアポトーシスを誘導する高い効果を有し、その効力はカフェ酸よりも顕著に高いことが示された。 したがって、ＵＨＡ６００５は優れた抗癌作用を奏することから、抗癌剤とて、さらには癌予防剤として有用であると考えられる。（実施例６：加熱温度によるＵＨＡ６００５の生成量の違い） カフェ酸１００ｍｇ、エタノール１ｍｌ、ミネラルウォーター１ｍｌの混合溶液（ｐＨ＝５．０）を、オートクレーブにて７０℃、９０℃、１１０℃、１３０℃の各温度条件で２０分間加熱した。それぞれの温度条件で得られた反応後組成物１ｍｌをメタノールにて５０ｍｌにメスアップし、実施例１と同様にＨＰＬＣにより分析した。 その結果、７０℃以外の条件下においてＵＨＡ６００５の生成は確認できた。カフェ酸からＵＨＡ６００５の生成比率は７０℃で非生成、９０℃で極微量、１１０℃で０．５重量％、１３０℃で３重量％であった。すなわち、１３０℃での加熱が最も効率的であった。（実施例７：ＵＨＡ６００５含有エキスの調製） キウィフルーツジュース濃縮物１０ｇ、エタノール１０ｍｌ、ミネラルウォーターを１０ｍｌ加えて調製した混合溶液を、オートクレーブにて１３０℃、６０分間加熱した。得られた反応溶液を減圧加熱させて乾固し、ＵＨＡ６００５含有エキスを１０ｇ得た。得られたＵＨＡ６００５エキス１０ｇ中には、実施例６と同様の手法で確認したところＵＨＡ６００５が０．０１５ｇ含有されていた。必要に応じてこの作業を繰り返した。（実施例８：ＵＨＡ６００５を含有する食品） 実施例７で得たＵＨＡ６００５含有エキス１ｇをあらかじめ１００ｍＬのエタノールに溶解させ、これに砂糖５００ｇ、水飴４００ｇを混合溶解し、生クリーム１００ｇ、バター２０ｇ、練乳７０ｇ、乳化剤１．０ｇを混合した後、真空釜にて−５５０mmＨｇ減圧させ、１１５℃の条件下で濃縮し、水分値３．０重量％のミルクハードキャンディを得た。このミルクハードキャンディは、菓子として食べ易いものであることはもちろん、肥満を改善したり、肥満を予防したり、癌患者における癌の拡散のリスクを低減したり、癌の発症のリスクを低減したり、癌の予防を期待した機能性食品としても利用できる。（実施例９：ＵＨＡ６００５を含有する医薬品） 実施例１及び２と同様の方法で得たＵＨＡ６００５をエタノールに溶解し、これを微結晶セルロースに吸着させた後に、減圧乾燥させた。これを常法に従い、打錠品を得た。処方は、ＵＨＡ６００５を１０重量部、コーンスターチ２３重量部、乳糖１２重量部、カルボキシメチルセルロース８重量部、微結晶セルロース３２重量部、ポリビニルピロリドン４重量部、ステアリン酸マグネシウム３重量部、タルク８重量部の通りである。本打錠品は、肥満改善や肥満防止、癌の治癒を目的とする医薬品として有効に利用できる。（実施例１０：ＵＨＡ６００５を含有する化粧品） テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビット１重量部、ポリオキシエチレンステアリルエーテル０．５重量部、親油型モノステアリン酸グリセリン１重量部、ピルビン酸０．５重量部、ステアリルアルコール０．５重量部、アボガド油１重量部、実施例１及び２と同様の方法で得たＵＨＡ６００５の０．１重量部を、常法に従って溶解させ、これに、乳酸ナトリウム１重量部、プロピレングリコール５重量部、カルボキシビニルポリマー０．１重量部、ごく少量の香料及び精製水８９．３重量部を加え、ホモゲナイザーにかけ乳化し、乳液を得た。本乳液は、ニキビなどの皮膚疾患治療や予防効果をもつ薬用化粧品として有効に利用できる。 カフェ酸を金属塩存在下で加熱処理することにより下記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物を生成することを特徴とする式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩の製造方法。下記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなるリパーゼ阻害剤。 下記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなる抗肥満剤。 下記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなる皮膚疾患治療剤。 下記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩からなる抗癌剤。 下記式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含有することを特徴とする食品、医薬品、又は化粧品。 【課題】優れた抗癌活性及びリパーゼ阻害活性を有する４−ビニルカテコール重合化合物又は薬学的に許容可能な塩を効率よく製造する方法、４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含有するリパーゼ阻害剤、抗肥満剤、皮膚疾患治療剤及び抗癌剤、さらには４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含有する食品、医薬品、又は化粧品を提供する。【解決手段】カフェ酸を金属塩存在下で加熱処理することを特徴とする式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩の製造方法、及び式（１）で表される４−ビニルカテコール重合化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含有する抗肥満剤、皮膚疾患治療剤、抗癌剤、さらには食品、医薬品又は化粧品。【選択図】なし