生命科学関連特許情報

タイトル：	公表特許公報(A)_自己免疫疾患、アレルギー性疾患及び癌の治療用インターフェロン−アルファ及びＣ−フィコシアニン
出願番号：	2008536916
年次：	2009
IPC分類：	A61K 38/21,A61K 38/00,A61P 37/00,A61P 37/08,A61P 35/00,A61P 25/28,A61P 29/00,A61P 37/04,A61P 43/00

特許情報キャッシュ

ペントン、ロル、ジゼル セルバンテス リアノス、マヘル ペントン アリアス、エドゥアルド ガルシア デル バルコ ヘレラ、ディアナ バレンズエラ シルバ、カルメン、マリア ロペス サウラ、ペドロ、アントニオ ギレン ニエト、ヘラルド エンリケ JP 2009513583 公表特許公報(A) 20090402 2008536916 20061030 自己免疫疾患、アレルギー性疾患及び癌の治療用インターフェロン−アルファ及びＣ−フィコシアニン セントロ デ インジエニエリア ジエネテイカ イ バイオテクノロジア 304012895 浅村 皓 100066692 浅村 肇 100072040 長沼 暉夫 100088926 池田 幸弘 100102897 ペントン、ロル、ジゼル セルバンテス リアノス、マヘル ペントン アリアス、エドゥアルド ガルシア デル バルコ ヘレラ、ディアナ バレンズエラ シルバ、カルメン、マリア ロペス サウラ、ペドロ、アントニオ ギレン ニエト、ヘラルド エンリケ CU 2005-0207 20051028 A61K 38/21 20060101AFI20090306BHJP A61K 38/00 20060101ALI20090306BHJP A61P 37/00 20060101ALI20090306BHJP A61P 37/08 20060101ALI20090306BHJP A61P 35/00 20060101ALI20090306BHJP A61P 25/28 20060101ALI20090306BHJP A61P 29/00 20060101ALI20090306BHJP A61P 37/04 20060101ALI20090306BHJP A61P 43/00 20060101ALI20090306BHJP JPA61K37/66 GA61K37/02A61P37/00A61P37/08A61P35/00A61P25/28A61P29/00 101A61P37/04A61P43/00 121 AP(BW,GH,GM,KE,LS,MW,MZ,NA,SD,SL,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,MD,RU,TJ,TM),EP(AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,NL,PL,PT,RO,SE,SI,SK,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DK,DM,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IS,JP,KE,KG,KM,KN,KP,KR,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LT,LU,LV,LY,MA,MD,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PG,PH,PL,PT,RO,RS,RU,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,SV,SY,TJ,TM,TN,TR,TT,TZ,UA,UG,US,UZ,VC,VN,ZA,ZM,ZW CU2006000012 20061030 WO2007048357 20070503 57 20080630 4C084 4C084AA02 4C084BA44 4C084DA22 4C084MA02 4C084MA52 4C084MA55 4C084MA59 4C084MA66 4C084NA05 4C084NA14 4C084ZA02 4C084ZB072 4C084ZB09 4C084ZB132 4C084ZB152 4C084ZB26 4C084ZC751 本発明は、生物科学、バイオテクノロジー及び医学、特に神経学、腫瘍学、内科学に関し一般に、自己免疫疾患、アレルギー及び癌を治療するための天然産物の活性成分として存在する公知の免疫調節剤の併用療法の使用に関する。本発明は、抗炎症効果、免疫調節効果、抗酸化効果、抗ウィルス効果、抗増殖効果及び抗腫瘍効果、特に本発明において初めて立証された調節Ｔ細胞誘導効果を有する医薬化合物を得ることに基づいている。本発明は、多発性硬化症（ＭＳ）及びリウマチ様関節炎（ＲＡ）などの自己免疫疾患（ＡＤ）、並びに気管支喘息（ＢＡ）などのアレルギー性疾患（ＡＬＤ）において、それらの再発性臨床形態における再発又は発症の数を減少させることによって、又はそれらの一相性の臨床形態における進行を抑えることによって、有益な効果を有する。その一方、癌（ＣＡ）において、腫瘍細胞の生育及び増殖を停止させ、これにより、腫瘍の進行を防止する。 疫学的調査により、この３０年間に先進国におけるＡＬＤ及びＡＤが増加しているという強力な証拠が提供されている。これら２つのタイプの疾患の発生は増加している：ＡＬＤを代表して、喘息（Ｗｏｏｌｃｏｃｋ ＡＪら、世界的な喘息増加の証拠（Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｉｎ ａｓｔｈｍａ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ）（１９９７）、ＣＩＢＡ Ｆｏｕｎｄ Ｓｙｍｐ ２０６：１２２〜１３４頁）、鼻炎（Ｕｐｔｏｎ ＭＮら、成人の喘息及び枯草熱の罹患率における世代間の２０年の傾向（Ｉｎｔｅｒｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｌ ２０ ｙｅａｒｓ ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ａｓｔｈｍａ ａｎｄ ｈａｙ ｆｅｖｅｒ ｉｎ ａｄｕｌｔｓ）：親子のスパン中央家族試験調査（Ｔｈｅ Ｍｉｄｓｐａｎ ｆａｍｉｌｙ ｓｔｕｄｙ ｓｕｒｖｅｙｓ ｏｆ ｐａｒｅｎｔｓ ａｎｄ ｏｆｆｓｐｒｉｎｇ）（２０００）、ＢＭＪ３２１：８８〜９２頁）、及びアトピー性皮膚炎（Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＨＣ、アトピー性皮膚炎の罹患率は増加しているか（Ｉｓ ｔｈｅ ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ａｔｏｐｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ？）（１９９２）、Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｄｅｒｍａｔｏｌ １７：３８５〜３９１頁）、並びにＡＤの代表例として、ＭＳ（Ｒｏｓａｔｉ Ｇら、サルデーニャのサッサリ町における１９６５年から１９８５年の多発性硬化症の発生率（Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｏｗｎ ｏｆ Ｓａｓｓａｒｉ，Ｓａｒｄｉｎｉａ，１９６５ ｔｏ １９８５）：疾病発生増加の証拠（ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅ）（１９８８）、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ３８：３８４〜３８８頁；Ｐｏｓｅｒ Ｓら、ドイツ、ザクセン南部におけるＭＳの発生率の増加（Ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ＭＳ ｉｎ Ｓｏｕｔｈ Ｌｏｗｅｒ Ｓａｘｏｎｙ，Ｇｅｒｍａｎｙ）（１９８９）、Ｎｅｕｒｏｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ８：２０７〜２１３頁）、特に若年者におけるインスリン依存性糖尿病（Ｉ型糖尿病）（ＴＩＤ）（ＥＵＲＯＤＩＡＢ ＡＣＥ研究グループ、欧州における小児糖尿病発生率の変動及び傾向（Ｖａｒｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｉｎ Ｅｕｒｏｐｅ）（２０００）、Ｌａｎｃｅｔ ３５５：８７３〜８７６頁）、及びクローン病（Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ ＥＴら、炎症性腸疾患における疫学的調査の発症レビュー（Ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ）、（２００１）Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ３６：５６０ａ頁）。 同時に、抗生物質の使用、ワクチン接種の結果として、又はより単純に、衛生及び社会経済的条件の改善により、先進国においては多くの感染性疾患の発生率は明らかに減少している。 ＡＤ及びＡＬＤの増加は、基本的に、それらの病因に関与する遺伝的及び環境的要因に関連付けて説明される。 例えば遺伝的要因に関して、日本では、若年性ＴＩＤに対する感受性を増加させる対立遺伝子ＤＲ３とＤＲ４−ＤＱＢ１＊０３０２の頻度は低い。したがって、この疾患の発生率は低いが、一方、サルデーニャの住民、並びにイタリア本土に移住したサルデーニャ住民の直接の子孫では、ＴＩＤの発生率は高い（近隣地域に比較した場合）（Ｍｕｎｔｏｎｉ Ｓら、イタリア、ラツィオ地域に出生したサルデーニャ遺伝小児間のインスリン依存性糖尿病の発生率（Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎｓｕｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ ａｍｏｎｇ Ｓａｒｄｉｎｉａｎ−ｈｅｒｉｔａｇｅ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｂｏｒｎ ｉｎ Ｌａｚｉｏ ｒｅｇｉｏｎ，Ｉｔａｌｙ）（１９９７）、Ｌａｎｃｅｔ３４９：１６０〜２頁）。 先進国におけるＡＤ及びＡＬＤの急速な増加は、環境的な要因によって解釈し得る。これらの疾患の発生率が異なるある国から他の国へ移住した集団におけるＭＳ、ＴＩＤ及びＢＡの発生率についての情報がある。英国に移住したパキスタン出身の小児におけるＴＩＤの発現率は、英国小児の発現率と同じ（１１．７／１０００００）か、又はパキスタンにおけるＴＩＤの発生率（１／１０００００）の約１０倍高い（Ｂｏｄａｎｓｋｙ ＨＪら、移動集団におけるインスリン依存性糖尿病の病因における環境的作用の証拠（Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ａｎ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｅｆｆｅｃｔ ｉｎ ｔｈｅ ａｅｔｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｉｎｓｕｌｉｎ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｉｎ ａ ｔｒａｎｓｍｉｇｒａｔｏｒｙ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）（１９９２）、ＢＭＪ ３０４：１０２０〜２頁）。イスラエルでは、ＭＳは、欧州からの移住者によく見られ、アフリカ又はアジアからの移住者ではまれであり、対照的に、欧州、アジア又はアフリカ出身の在来イスラエル人では、ＭＳの罹患率は、欧州の移住者と同様の高さである（Ｌｅｉｂｏｗｉｔｚ ＯＲら、イスラエルにおける多発性硬化症の頻度変化（Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｉｎｇ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｉｓｒａｅｌ）（１９７３）、Ａｒｃｈ Ｎｅｕｒｏｌ ２９：１０７〜１０頁）。また、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の頻度は、アメリカの黒人よりも、アフリカ東部出身者で劇的に低いことにも注目すべきである。これら２つの集団は、同じ民族集団出身だが、異なる環境に曝された（Ｓｙｍｍｏｎｓ ＤＰＭ、アフリカ出身者における狼瘡の頻度（Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ｌｕｐｕｓ ｉｎ ｐｅｏｐｌｅ ｏｆ Ａｆｒｉｃａｎ ｏｒｉｇｉｎ）（１９９５）、Ｌｕｐｕｓ ４：１７６〜８頁）。 ＡＤ及びＡＬＤに対する感受性に及ぼす遺伝的及び環境的要因の影響は、さらに明らかにする必要がある。 一卵性双生児におけるこれらの疾患の発生率から重要な情報が得られる。その比率は、ＭＳに関しては２５％（Ｍｕｒｎｆｏｒｄ ＣＪら、双生児における多発性硬化症の英国島調査（Ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｉｓｌｅｓ ｓｕｒｖｅｙ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ ｔｗｉｎｓ）（１９９４）、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ４４：１１〜５頁）、ＴＩＤに関しては、４０％（Ｂａｃｈ ＪＦ、自己免疫疾患としてのインスリン依存性糖尿病（Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ ａｓ ａｎ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ）（１９９４）、Ｅｎｄｏｃｒ Ｒｅｖ １５：５１６〜４２頁）及び、喘息に関しては、７５％（Ｓｋａｄｈａｕｇｅ ＬＲら、喘息に及ぼす遺伝的及び環境的影響：１１，６８８組のデンマーク人双生児の集団ベースの調査（Ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｎ ａｓｔｈｍａ：ｔｏ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ−ｂａｓｅｄ ｓｔｕｄｙ ｏｆ １１，６８８Ｄａｎｉｓｈ ｔｗｉｎ ｐａｉｒｓ）（１９９９）、Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ １３．８〜１４頁）である。双方の双生児とも罹患しやすい遺伝子総てを有していて疾患の無い双生児の組をこの分析に含めることが不可能であるという条件で、その一致は該疾患の浸透率に直接関連していると考えられ得る。ＭＳ（Ｏｋｓｅｎｂｅｒｇ ＪＲら、ＭＳ：ゲノム報酬（ＭＳ：ｇｅｎｏｍｉｃ ｒｅｗａｒｄｓ）（２００１）、Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ １１３：１７１〜８４頁）、ＴＩＤ（Ｔｏｄｄ ＪＡ、Ｉ型糖尿病の遺伝学（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｔｙｐｅ Ｉ ｄｉａｂｅｔｅｓ）（１９９７）、Ｐａｔｈｏｌ（Ｐａｒｉｓ）４５：２１９〜２７頁）及び喘息（Ｃｏｏｋｓｏｎ ＷＯＣ、「喘息遺伝学（Ａｓｔｈｍａ ｇｅｎｅｔｉｃｓ）」（２００２）、Ｃｈｅｓｔ １２１：増補：７Ｓ〜１３Ｓ頁）に対する人の素因を生じさせる遺伝子を含む染色体領域を同定する、最近重要なブレイクスルーがあったが、ＡＤにおけるＨＬＡ遺伝子を除いては、疾患に関連した遺伝子についての情報はほとんど得られていない。重大な要件は我々を環境的要因から助け、保護する、罹患率を直接調節する遺伝子（１つ又は複数）がどれかを同定することである。一例は、アレルギー性疾患に対して感染防御的効果に寄与し得る２種のサイトカインである。ＩＬ−１０及びＴＧＦ−βをコードする遺伝子において唯一の多型が見られる、アトピー性疾患に罹っている患者での観察である（Ｈｏｂｂｓ Ｋら、インターロイキン−１０及び形質転換成長因子−ベータはアレルギー及び喘息における多型を促進する（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０ ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ−ｂｅｔａ ｐｒｏｍｏｔｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ａｌｌｅｒｇｙ ａｎｄ ａｓｔｈｍａ）（１９９８）、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １５８：１９５８〜６２頁）。 たいていのＡＤの発現は、Ｔｈ１細胞によって産生されるＩＬ−２及びＩＦＮ−γサイトカインに依存しており、一方、アレルギー性疾患の発現には、ＩＬ−４及びＩＬ−５が必要であり、これらは双方ともＴｈ２細胞によって産生される。Ｔｈ２サイトカインに対するＴｈ１細胞及びＴｈ１サイトカインに対するＴｈ２細胞の相互的フィードバックは、これらのサイトカインが、ＡＤ又はＡＬＤに対する感染によって媒介される防御に関与していると考えられることを指示している。最初の報告（Ｔｈｅ ＥＵＲＯＤＩＡＢ Ｓｕｂｓｔｕｄｙ ２ ｓｔｕｄｙ ｇｒｏｕｐ、小児糖尿病患者におけるアトピー性疾患の罹患率減少（Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ａｔｏｐｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ ｄｉａｂｅｔｅｓ）（２０００）、Ｊ Ｐｅｄｉａｔｒ １３７：４７０〜４頁）と対照的に、個々の患者におけるＡＤとＡＬＤとの間には関連性がある：アトピー性疾患の頻度は、糖尿病及びリウマチ様関節炎患者において増加する（Ｋｅｒｏ Ｊら、ＴＨ１疾患とＴＨ２疾患は共存するか？腹腔病、Ｉ型糖尿病、又はリウマチ様関節炎の小児患者における喘息発生率の評価：登録調査に対して（ＴＨ１ ａｎｄ ＴＨ２ ｄｉｓｅａｓｅ ｃｏｅｘｉｓｔ？ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａｓｔｈｍａ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ ｃｏｅｌｉａｃ ｄｉｓｅａｓｅ，ｔｙｐｅ Ｉ ｄｉａｂｅｔｅｓ，ｏｒ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ｔｏ ｒｅｇｉｓｔｅｒ ｓｔｕｄｙ）（２００１）、Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １０８：７８１〜３頁；Ｓｉｍｓｏｎ ＣＲら、Ｔｈ１及びＴｈ２サブセットによって駆動された免疫媒介疾患の同時発生は、共通の病因を示唆する：コンピュータ化一般的実施日を用いた集団ベース調査（Ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｄｒｉｖｅｎ ｂｙ Ｔｈ１ ａｎｄ Ｔｈ２ ｓｕｂｓｅｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔ ｔｏ ｃｏｍｍｏｎ ａｅｔｉｏｌｏｇｙ：ｔｏ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ−ｂａｓｅｄ ｓｔｕｄｙ ｕｓｉｎｇ ｃｏｍｐｕｔｅｒｉｚｅｄ ｇｅｎｅｒａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｄａｔｅｓ）（２００２）、Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ａｌｌｅｒｇｙ ３２：３７〜４２頁）。これらの観察事項は、自己免疫とアレルギーとの間の共通機序のコンセプトを裏付けている。 健康なマウスにおけるＣＤ４＋Ｔ細胞の欠如により、多自己免疫症候群が誘発されることから、ＩＬ−２受容体（ＣＤ２５）のアルファ鎖を発現する、調節Ｔ細胞（ｒＴｃ）と呼ばれるＣＤ４＋Ｔ細胞がかなり注目されている（Ａｓｓａｎｏ Ｍら、Ｔ細胞亜集団の発達異常の結果としての自己免疫疾患（Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ ａｓ ａ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｙ ｏｆ ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）（１９９６）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １８４：３８７〜９６頁）。この観察は、ＡＤの発生を避けるためには、この細胞亜集団の濃度及び適切な機能の維持が重要であることを裏付けている。 これらの防御的自己免疫細胞についての以下の詳細な表現型特性化によって、動物及びヒトモデルにおける自己寛容の重要な媒介物としてのＴ調節細胞の存在に対する疑いは生じない。 調節性を有する細胞は、２つのタイプ：胸腺によって産生されるナチュラルｒＴｃ、及び「Ｔｈ３」、「Ｔｒ１」又は「適応性調節細胞」と呼ばれる、抹消における特定の条件下での抗原刺激によって産生される誘導ｒＴｃに分けることができる（Ｂｌｕｅｓｔｏｎｅ ＪＡら、ナチュラルＴ細胞対適応性調節Ｔ細胞（Ｎａｔｕｒａｌ ｖｅｒｓｕｓ ａｄａｐｔｉｖｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ）（２００３）、Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３：２５３〜２５７頁）。 誘導ｒＴｃに関する抑制機序は基本的に、ＩＬ−１０及びＴＧＦ−βなどのサイトカインの分泌による（Ｇｒｏｕｘ Ｈ．、１型Ｔ調節細胞：免疫応答の制御におけるそれらの役割（Ｔｙｐｅ １ Ｔ−ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ：ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ）（２００３）、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ７５：８Ｓ〜１２Ｓ頁）。しかし、ナチュラルｒＴｃは、細胞間接触を優先的に用いる。 Ｓａｋａｇｕｃｈｉらは初めて、ｒＴｃマーカーとしてＣＤ５分子を同定し（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｓ．ら、Ｔ細胞サブセット：Ｉの除去によるマウスにおいて誘導された臓器特異的自己免疫疾患。自然自己寛容におけるＴ細胞の活発な関与の証拠；自己免疫疾患の原因としての可能性があるＴ細胞サブセットの欠如（Ｏｒｇａｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔ：Ｉ．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｎａｔｕｒａｌ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ；ｄｅｆｉｃｉｔ ｏｆ ｔｏ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔ ａｓ ｔｏ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｃａｕｓｅｓ ｏｆ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ）（１９８５）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １６１：７２〜８７頁）、一方、ＣＤ４５ＲＢは、他のｒＴｃマーカーとして同定された（Ｐｏｗｒｉｅ Ｆら、ＣＤ４＋Ｔ細胞の表現型が異なるサブセットの誘導又はＣ．Ｂ−１７ ｓｃｉｄマウスにおける慢性腸炎症からの予測（Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃａｌｌｙ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｓｕｂｓｅｔｓ ｏｆ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎｄｕｃｅｓ ｏｒ Ｐｒｏｊｅｃｔ ｆｒｏｍ ｃｈｒｏｎｉｃ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ Ｃ．Ｂ−１７ ｓｃｉｄ ｍｉｃｅ）（１９９３）、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ５：１４６１〜１４７１頁）。 現在用いられている主要な表面マーカーはＣＤ２５である（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ Ｓら、アルファ鎖（ＣＤ２５）を受容するＩＬ−２を発現する活性化Ｔ細胞によって維持される免疫学的自己寛容（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＩＬ−２ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ａｌｐｈａ ｃｈａｉｎｓ（ＣＤ２５））。自己寛容の機序を遂行するものの破壊が種々の自己免疫疾患の原因となる（Ｂｒｅａｋｄｏｗｎ ｏｆ ｔｏ ｉｔ ｓａｉｌｓ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｙｏｕ ｃａｕｓｅ ｖａｒｉｏｕｓ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ）（１９９５）、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １５５：１１５１〜１１６４頁）。マウスにおいて、ＣＤ４＋細胞の約５〜１０％、及びＣＤ８＋細胞の１％が、ＣＤ５ｈｉｇｈ及びＣＤ４５ＲＢｌｏｗを発現し（Ｉｔｏｈ Ｍら、胸腺及び自己免疫：免疫学的自己寛容の維持における胸腺の重要な機能に関するＣＤ２５＋ＣＤ４＋自然アネルギー及び抑制性Ｔ細胞の産生（Ｔｈｙｍｕｓ ａｎｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ：ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ２５＋ＣＤ４＋ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ａｎｅｒｇｉｃ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｓ ｔｏ ｋｅｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｙｍｕｓ ｉｎ ｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）（１９９９）、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２：５３１７〜５３２６頁）、ヒトにおけるｒＴｃは、ＣＤ４＋細胞の６〜１０％である（Ｎｇ ＷＦら、ヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞：調節Ｔ細胞の天然集団に対して（Ｈｕｍａｎ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ｃｅｌｌｓ：ｔｏ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ）（２００１）Ｂｌｏｏｄ ９８：２７３６〜２７４４頁）。ｒＴｃは、明白な抗原刺激の非存在下で、高レベルのＣＤ１１ａ（ＬＦＡ−１）、ＣＤ４４、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ−１）、及びＣＤ１０３を示す（ＭｃＨｕｇｈ ＲＳら、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋免疫調節Ｔ細胞：遺伝子発現分析により解明される糖質コルチコイド誘導ＴＮＦ受容体の機能的役割（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ：ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｖｅａｌｓ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ＴＮＦ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）（２００２）、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １６：３１１〜３２３頁）。さらに、ｒＴｃは、細胞活性化の後でのみ発現される分子であるＣＤ１５２（ＣＴＬＡ−４）を発現させる（Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｔら、細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原４を構成的に発現するＣＤ２５＋ＣＤ４＋調節Ｔ細胞によって維持される免疫学的自己寛容（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｂｙ ＣＤ２５＋ＣＤ４＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｎｔｉｇｅｎ−４）（２０００）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９２：３０３〜３１０頁）。 ｒＴｃは、ヒトにおいて、高レベルのＣＣＲ５ケモカイン受容体及びその対応物（ＣＣＲ４及びＣＣＲ８）を発現させる（Ｂｙｓｔｒｙ ＲＳら、Ｂ細胞及びＣＣＬ４による専門的ＡＰＣ動員調節Ｔ細胞（Ｂ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ＡＰＣｓ ｒｅｃｒｕｉｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ＣＣＬ４）（２００１）、Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２：１１２６〜１１３２頁）。ケモカイン受容体発現のこの特徴的なパターンによって、ｒＴｃが炎症領域に向かって速やかに動員され得、免疫応答を効率的に制御することが示唆される。多くのグループが、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞における糖質コルチコイド誘導腫瘍壊死因子受容体（ＧＩＴＲ）の発現を報告している（ＭｃＨｕｇｈ ＲＳら、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋免疫調節Ｔ細胞：遺伝子発現分析によって解明される糖質コルチコイド誘導ＴＮＦ受容体に関する機能的役割（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ：ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｖｅａｌｓ ｔｏ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ＴＮＦ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）（２００２）、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １６：３１１〜３２３頁）。 ｒＴｒマーカーが活性化細胞にも見られるということにより、その単離及びサプレッサー細胞のマーカーとしてのＣＤ２５の同定が妨げられる（Ｓｈｅｖａｃｈ ＥＭ．、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋サプレッサーＴ細胞：答えよりも多い疑問（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ：Ｍｏｒｅ ｑｕｅｓｔｉｏｎｓ ｔｈａｎ ａｎｓｗｅｒｓ）（２００２）、Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２：３８９〜４００頁）。 最近の研究により、ｒＴｃが、ＩＬ−２受容体のアルファ鎖を高レベルに発現するＣＤ４＋Ｔ細胞に属するＣＤ２５ｈｉｇｈ細胞内で高濃度であることが示されている。ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈＴ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖及びサイトカイン分泌を完全に抑制する。ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈＴ細胞は、ＣＤ４５ＲＯ及びＨＬＡ−ＤＲの発現レベルにおいて、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞とは異なる（Ｂａｅｃｈｅｒ−Ａｌｌａｎ Ｃら、ヒト末梢血におけるＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ調節細胞（ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ）（２００１）、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６７：１２４５〜１２５３頁）。 マウス及びヒトの胸腺由来のｒＴｃが記載されている。マウスにおいて、ｒＴｃの非存在によって、臓器特異的な自己免疫が生じる。最近、転写因子、Ｆｏｘｐ３がマウスにおけるｒＴｃの機能にとって重要であることが立証された。Ｆｏｘｐ３の発現は、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞に典型的であり、これらの細胞の抑制活性に関連していることが示された。これは、ｒＴｃ産生の失敗がＡＤの一因となり得ることを示唆し、また、Ｆｏｘｐ３は、これらの疾患の治療において治療的役割を有することも示唆している（Ｗａｌｋｅｒ ＭＲら、Ｆｏｘｐ３の誘導及びヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞の刺激によるＴ調節活性の獲得（Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｏｘｐ３ ａｎｄ ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｈｕｍａｎ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ（２００３）、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １１２：１４３７〜１４４３頁）。 スカルフィン（Ｓｃｕｒｆｉｎ）タンパク質をコードするＦｏｘｐ３転写因子は、ｒＴｃのいくらかより限定的なマーカーのようである（Ｂｒｕｎｋｏｗ ＭＥら、新規フォーク頭／有翼螺旋タンパク質、スカルフィンの破壊によってもたらされるスカルフィーマウスの致死的リンパ球増殖障害（Ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏ ｎｅｗ ｆｏｒｋｈｅａｄ／ｗｉｎｇｅｄ−ｈｅｌｉｘ ｐｒｏｔｅｉｎ，ｓｃｕｒｆｉｎ，ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｆａｔａｌ ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｓｃｕｒｆｙ ｍｏｕｓｅ）（２００１）、Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ ２７：６８〜７３頁）が、その発現の可能性は、他の活性化条件及び他の細胞集団においては除外されていない（Ｍｏｒｇａｎ ＭＥら、ヒトにおいて、ＦＯＸＰ３ ｍＲＮＡの発現は、ＣＤ４（＋）ＣＤ２５（＋）Ｔ調節細胞に限定されていない（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＦＯＸＰ３ｍＲＮＡ ｉｓ ｎｏｔ ｃｏｎｆｉｎｅｄ ｔｏ ＣＤ４（＋）ＣＤ２５（＋）Ｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｕｍａｎｓ）（２００５）、Ｈｕｍ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１３〜２０頁）。 誘導ｒＴｃの作用機序は、ＴＧＦ−βを含む（Ｎａｋａｍｕｒａ Ｋら、ＣＤ４（＋）ＣＤ２５（＋）調節Ｔ細胞による細胞接触依存性免疫抑制は、細胞表面結合形質転換成長因子ベータによって媒介される（Ｃｅｌｌ ｃｏｎｔａｃｔ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｍｍｕｎｏ−ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ＣＤ４（＋）ＣＤ２５（＋）ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ−ｂｏｕｎｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｂｅｔａ）（２００１）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９４：６２９〜４４頁）。ＮＫ及びＴ細胞の性質を有するＮＫ細胞は、この免疫調節に寄与し得る（Ｂｅｎｄｅｌａｃ Ａら、マウスＣＤ−１特異的ＮＫ１Ｔ細胞：発現、特異性、及び機能（Ｍｏｕｓｅ ＣＤ１−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＮＫ１ Ｔ ｃｅｌｌｓ：ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ）（１９９７）、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｕｎｏｌ １５：５３５〜６２頁）。 誘導ｒＴｃによって産生されたＩＬ−１０、Ｔｈ２サイトカイン、単球及びマクロファージは、実験モデルにおけるＡＤ及びＡＬＤの進行を減速化する（Ｍｏｏｒｅ ＫＷら、インターロイキン１０及び受容体インターロイキン１０（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０）（２００１）、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９：６８３〜７６５頁）。ＩＬ−１０はまた、活性化好酸球の生存率を低下させることによって、ＡＬＤにおいて重要な役割を果たし得る（Ｔａｋａｎａｓｈｉ Ｓら、インターロイキン１０は、ヒト末梢血好酸球によるリポ多糖誘導生存及びサイトカイン産生を抑制する（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｌｙｐｏｐｏｌｉｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｓ）（１９９４）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １８０：７１１〜５頁）。研究者の２つのグループが、喘息患者の肺内には、健康対照の肺内よりも存在するＩＬ−１０がかなり少量であることを見出した（Ｌｉｍ Ｓら、重症喘息患者におけるインターロイキン１０の低産生に関連するハプロタイプ（Ｈａｐｌｏｔｙｐｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｌｏｗ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｓｅｖｅｒｅ ａｓｔｈｍａ）（１９９８）、Ｌａｎｃｅｔ ３５２：１１３頁；Ｔａｋａｎａｓｈｉ Ｓら、痰中のインターロイキン１０濃度は、気管支喘息、ＣＯＰＤ、及び喫煙者において低下する（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１０ ｌｅｖｅｌ ｉｎ ｓｐｕｔｕｒｎ ｉｓ ｒｅｄｕｃｅｄ ｉｎ ｂｒｏｎｃｈｉａｌ ａｓｔｈｍａ，ＣＯＰＤ ａｎｄ ｉｎ ｓｍｏｋｅｒｓ）（１９９９）、Ｅｕｒ Ｒｅｓｐ Ｊ １４：３０９〜１４頁）。 このことは、ｒＴｃによって産生されたＩＬ−１０及びＴＧＦ−βは、双方の応答（Ｔｈ１及びＴｈ２）を抑制でき、したがって、この調節の媒介物であることを示唆している。 ｒＴｃは、免疫応答の制御に重要な役割を果たしており、例えば、ｒＴｃは、微生物又は抗腫瘍免疫応答を制限できる。必要な場合に、免疫応答を増強又は減少させるために、ｒＴｃの戦略的操作を実施できる（Ｆｅｈｅｒｖａｒｉ Ｚら、自己寛容の見本に：ＣＤ２５＋ＣＤ４＋調節Ｔ細胞及び免疫応答の制御（Ｔｏ ｐａｒａｇｏｎ ｏｆ ｓｅｌｆ−ｔｏｌｅｒａｎｃｅ：ＣＤ２５＋ＣＤ４＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ）（２００４）、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｈｅａｄ Ｔｈｅｒ ６：１９〜２５頁）。 ｒＴｃの数及び／又は機能が低下して、エフェクター細胞とｒＴｃの不均衡が存在する場合のＡＤ及びＡＬＤにおいて、我々の発明で立証されたＩＦＮ−α／フィコシアニン併用のｒＴｃ誘導因効果は、その使用を正当化する。 自己免疫疾患は、有害な侵入微生物の同定及び破壊を担っている細胞が、自己の組織を異物として認め、それらを攻撃する免疫系（ＩＳ）の機能障害である。研究者は、ウィルス因又は細菌因：ヒトヘルペスウィルス６（Ｈｕｍａｎ Ｈｅｒｐｅｓ ｖｉｒｕｓ ６）、エプスタインバーウィルス（Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ）及びクラミジア肺炎菌（Ｃｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ）などの替わりに説明を提供している。 感染物質は、種々の実験条件下でＡＤを誘導し得、そのいくつかは、それらの臨床的に対応するものを有する。これらの観察事項を説明するために、分子擬態及び標的臓器の炎症によって引き起こされた自己抗原免疫原性の増強など、多くの機序が考えられている（Ｏｌｓｏｎ ＪＫら、ウィルス誘発自己免疫：Ｔ細胞媒介自己免疫疾患の開始、永続化、及び進行におけるウィルスの役割の可能性（Ｖｉｒｕｓ−ｉｎｄｕｃｅｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ｖｉｒｕｓｅｓ ｉｎ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ，ｐｅｒｐｅｔｕａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔ−ｃｅｌｌ ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ）（２００１）、ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ １４：２２７〜２５０頁）。逆説的であるが、感染物質は、自己免疫及びアレルギー性障害を抑制することもあり得る。 実験的自己脳脊髄炎（ＥＡＥ）は、臨床的及び病理学的特徴を示す中枢神経系（ＣＮＳ）炎症性及び脱髄性疾患であり、多発性硬化症の動物モデルと考えることができる。ＥＡＥが、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）などの炎症誘発性サイトカイン又は腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）の分泌を伴うＴｈ１疾患であることは、多くの証拠によって示されており、サイトカインによって誘発された酸化的ストレスが、ＥＡＥ神経病理学に重要な役割を果たし得ることが示唆されている。しかし、疾患の病因におけるこれら及び他のサイトカインとの個々の作用はまだ不明である。この報告において、Ｍｉｒｒｏｒ Ｃら（Ｍｉｒｒｏｒ Ｃら、実験的自己免疫脳脊髄炎時、インターフェロンガンマは、酸化的ストレスを制御する（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｇａｍｍａ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｄｕｒｉｎｇ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）（２００２）、Ｅｘｐ Ｎｅｕｒｏｌ １７７：２１〜３１頁）は、ＩＦＮ−γノックアウトマウスの受容体（ＩＦＮ−ｇａｍｍａ Ｒ（−／−））を用いて、ＥＡＥ時のＩＦＮ−γの役割を分析した。該マウスを、ラットミエリン乏突起膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）の４０〜５５ペプチドで免疫化した。酸化的ストレスのレベルは、誘発性シンターゼ一酸化窒素（ＮＯ）、ニトロチロシン及びマロニルデアルデヒドに関する免疫反応性の分析により、並びに、防御的組織抗酸化因子：メタロチオネインＩ＋ＩＩ（ＭＴ−Ｉ＋ＩＩ）の発現により判定した。又それらにより、ＴＵＮＮＥＬ法の使用を介して、アポトーシスを発現する細胞数が判定される。ＥＡＥによる酸化的ストレスのレベル、ＭＴ−Ｉ＋ＩＩ及びアポトーシス細胞死は、全てのマウス（ＩＦＮ−ｇａｍｍａ Ｒ（−／−）及び野生型）で増加したが、これが、ＩＦＮ−ｇａｍｍａ Ｒ（−／−）マウスではさらに多かった。このことは、ＩＦＮ−γが、ＥＡＥに対して防御的役割を果たすという仮説を裏付ける。 ＥＭは、基本的に若年成人が罹患する自己免疫脱髄性疾患である。キューバにおけるＭＳ発生率の最も控えめな値は、住民の１０／１００，０００人である（Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｖａｌｅｒｏ Ｅら、キューバ西部における多発性硬化症の臨床的特徴。当国の他の２つの地域との比較（Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｃｕｂａ．Ａ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ｔｗｏ ｏｔｈｅｒ ｒｅｇｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｕｎｔｒｙ）（２００４）、Ｒｅｖ Ｎｅｕｒｏｌ．Ｍａｙ １〜１５；３８（９）：８１８〜２３頁）。 それは、女性において、該疾患の開始によって変動する比率で広まっている（Ｗｉｎｇｅｒｃｈｕｋ ＤＭら、視神経脊髄炎（ドヴィック症候群）の臨床経過（Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｏｕｒｓｅ ｏｆ ｏｐｔｉｃ ｎｅｕｒｏｍｙｅｌｉｔｉｓ（Ｄｅｖｉｃ’ｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ））（１９９９）、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ５３：１１０７〜１４頁）。人種に関しては、白人により多い。 ＭＳは、脳及び脊髄に罹患するＣＮＳ疾患である。それは、２つの基本的な特徴：脱髄及び軸索損失を有する。 その症状、重症度及び臨床経過は、プラークの位置及び脱髄の程度に依って変化し得る。したがって、それは２つの主要なカテゴリー：再発−寛解の形態及び進行性慢性形態に分類できる。 ＭＳはＡＤと称される。理論的に、この病態は、免疫系が遺伝的要因又は環境的要因又は双方によって損傷され、自己の組織への攻撃を引き起こす場合に発現する。ＭＳの場合、該組織はミエリンである。該生体は、ミエリン産生細胞（乏突起膠細胞）の破壊の効果を「消す」ために、修正的事象も実施する。例えば、数が増加する電気装荷を有するナトリウムチャネルの密度の増加があり、それによって、神経細胞は、ミエリンの損失に関わらず、伝達を継続できること；逆に、神経はいくらか再ミエリン化能力を保持することが観察されている。 複数の感染性生物が、ＭＳの発現における原因物質又は補因子として提案されている（Ｊｏｈｎｓｏｎ ＲＴ、Ｖｉｒａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ、第２版、フィラデルフィア：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ、２４８〜２５８頁における多発性硬化症のウィルス因の可能性（Ｖｉｒａｌ Ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｃａｕｓｅｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）（１９９８））、ＨＩＶ−１に関する感染（Ｂｌａｎｃｈｅ Ｐら、ドヴィック視神経脊髄炎及びＨＩＶ−１感染（Ｄｅｖｉｃ’ｓ ｎｅｕｒｏｍｙｅｌｉｔｉｓ ｏｐｔｉｃ ａｎｄ ＨＩＶ−１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）（２０００）、Ｊ Ｎｅｕｒｏｌ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ ６８：７９５〜７９６頁）、それらは、この研究で現地集団におけるＭＳに関連していた。内因性レトロウィルス（ＥＲＶ）は、ＭＳの病因に関連しており、種々のグループがＭＳに関連した特定のＥＲＶを同定している（Ｐｅｒｒｏｎ Ｈら、多発性硬化症患者から反復単離された初期レトロウィルスの分子同定（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏ ｂｅｇｉｎｎｅｒ ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ ｒｅｐｅａｔｅｄｌｙ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）（１９９７）、多発性硬化症についての共同研究グループ、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９４：７５８３〜７５８８頁；Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ Ｔら、多発性硬化症患者のリンパ球から確立したＢリンパ芽球腫細胞系における逆転写酵素活性及び粒子産生（Ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐａｒｔｉｃｌｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ Ｂ ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｏｉｄ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｆｒｏｍ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）（１９９９）、ＡＩＤＳ Ｈｅａｄ Ｈｕｍ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ １５：２８５〜２９１頁）。これらの疾患における抗ウィルス性を有する薬剤の使用がこれによって裏付けられる。ＭＳの原因は不明だが、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２ ＴＮＦ−α及びリンホトキシンの産生に関して分極化されている限定されたＭＨＣ ＩＩ ＣＤ４＋Ｔ細胞によって開始されるＡＤであること、言い換えれば、それらはＴｈ１細胞であることは広く認められている。ＭＳはＴｈ１細胞（ＣＤ４−Ｔｈ１モデル）によって媒介されるＡＤであるという証拠が示されている（Ｌａｓｓｍａｎｎ Ｈら、多発性硬化症に関するＣＤ４−Ｔｈ１モデル：重要な再評価に対して（Ｔｈｅ ＣＤ４−Ｔｈ１ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：ｔｏ ｃｒｕｃｉａｌ ｒｅａｐｐｒａｉｓａｌ）（２００４）、Ｔｒｅｎｄ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２５：３、１３２〜１３７頁）。このモデルに関して認められた予測は：ａ）ＭＳ病巣のリンパ球集団において、ＣＤ４＋Ｔ細胞が優勢であるはずである。他のリンパ球集団は、付属的な少数集団のはずである。ｂ）Ｔｈ１に分極化したＣＤ４＋Ｔ細胞及びそれらの主要なエフェクターサイトカイン、ＴＮＦ−α及びＩＦＮ−γは、ＭＳ病巣において病原性のはずである。ｃ）Ｔｈ２に分極化したＣＤ４＋Ｔ細胞は、ＭＳ病巣において、調節性又は抗炎症性であるはずである。ＣＤ４−Ｔｈ１モデルにより、ＭＳの臨床的及び病理学的特徴に見られる変動性が解明されるはずである。ｄ）前記過程は明らかに自己免疫であり、これは、宿主のＣＮＳが、ＣＤ４−Ｔｈ１媒介機序による自己免疫攻撃の前には損傷されていなかったという証拠が確かに存在したことを意味している。 ＭＳの病因に関し、遺伝的素因のある宿主では、自己のミエリン抗原と交差反応する配列を含有する一般的病原体は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）を介して抗原提示細胞（ＡＰＣ）を活性化し、これが、ＣＮＳ自己免疫炎症性疾患の誘発にとって最少要件であることが推測される。ＭＳ患者の血流中の調節Ｔ細胞の減少などの基礎的な免疫調節の欠損によって、自己反応性Ｔ細胞の最終的な病的活性化に至る。活性化されたミエリン反応性Ｔ細胞はＣＮＳへ移動し、それらはミクログリア、局所ＡＰＣによって提示された抗原を認識する。Ｔｈ１サイトカインが分泌され、炎症のカスケードが始まる。自然に生じる機序は、ＣＮＳに移動するＴ細胞（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１３）、Ｔｈ３（ＴＧＦ−β）又はＴｒ１（ＩＬ−１０）によって分泌されたＴｈ２サイトカイン類の誘導などの自己免疫応答を調節でき、Ｔｈ１炎症性自己反応性Ｔ細胞を負に調節できる（Ｈａｆｌｅｒ ＤＡ．、多発性硬化症（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）（２００４）、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖ １１３：７８８〜９４頁）。 正常な状態では、血液脳関門（ＢＢＢ）により、血液細胞とミエリンとの間に効果的な隔離が提供され、したがって、誤ってプログラムされた白血球があったとしても、無関連にされる。したがって、ＭＳ攻撃時はＢＢＢの不十分な機能が推測されている。 ＩＳのいくつかの細胞は、細胞外マトリックスを分解する酵素を産生する。たいていの生物において、これは、白血球を感染領域により接近させることになる。しかしながら、これらの細胞がＣＮＳ内部の毛細血管中に化学物質を放出すると、ＢＢＢの破壊が生じ、少なくとも一定の個体において病巣を生じさせる。白血球によって放出され得る化学物質の１つは、細胞「接着物」間を弱めるメタロプロテイナーゼ類（ＭＭＰ）である。それらは、放出される時は活性ではないが、他の酵素によって活性化する（Ｍａｅｄａ Ａら、正常なヒト中枢神経系、ミクログリア節、多発性硬化症病巣におけるマトリックスメタロプロテイナーゼ（Ｍａｔｒｉｘ Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｈｕｍａｎ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ，ｍｉｃｒｏｇｌｉａｌ ｎｏｄｕｌｅｓ，Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ａｎｄ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｌｅｓｉｏｎｓ）（１９９６）、Ｊ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ Ｅｘｐ Ｎｅｕｒｏｌ．５５（３）：３００〜３０９頁）。したがって、これらの疾患の治療として可能性のあるものの他の特徴は、ＭＭＰ類の阻害及び／又はそれらの阻害剤の刺激であると考えられる。 ＢＢＢの完全性に影響を及ぼす機序として可能性のあるものがもう１つある。白血球は侵襲性の微生物を破壊する際、きわめて活性なスーパーオキシド及びフリーラジカルを放出しそれらの標的の多くを破壊することができるが、ＢＢＢにおいてこの過程が生じると、病巣を作り始め、ＢＢＢの完全性に対して１種又は複数の攻撃を引き起こし得る（Ｊｅａｎ Ｃｌａｕｄｅ Ｍｏｎｂｏｉｓｓｅら、スーパーオキシドイオンによる酸溶解性子ウシ皮膚コラーゲンの非酵素的分解：フラボノイドの保護的効果（Ｎｏｎ−ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｉｄ−ｓｏｌｕｂｌｅ ｃａｌｆ−ｓｋｉｎ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｂｙ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｉｏｎ：ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ）（１９８３）、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３２（１）：５３〜５８頁）。したがって、我々の発明において立証されたＩＦＮ−α／Ｃ−フィコシアニン併用の抗酸化性は、この疾患における使用を根拠づける。 ＭＳプラークは、ミエリンをそのタンパク質及び脂質を消化することによって破壊すると考えられるマクロファージを大量に含有する。これらの酵素の阻害剤は、ミエリンの破壊を減少させるか、該組織へのマクロファージの移動を妨害することができる。急性の病態を治療するためにこの疾患に用いられる薬剤の原理は、その抗炎症性に基づいている（Ｗ．Ａ．Ｓｉｂｌｅｙ及びＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｃｌａｉｍｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｅｄｅｒａｔｉｏｎ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｏｆ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ Ｓｏｃｉｅｔｉｅｓ、多発性硬化症における治療的請求（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｃｌａｉｍｓ ｉｎ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、第３版、１９９２年）。 ＭＳの早期に影響を及ぼす３つのタイプの免疫調節療法：ミトキサントロン及びシクロスホスファミドなどの免疫抑制剤；インターフェロンベータ、及びＴ細胞受容体（ＴＣＲ）、グラチラマーアセテート（Ｇｌａｔｉｒａｍｅｒ Ａｃｅｔａｔｅ）（ＧＡ）に結合している主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）に対する結合ペプチドの有効性立証に伴って、ＭＳに対する療法が最近の２０年間に現れてきた。 現在のところ、この疾患に対して、ＦＤＡが承認した薬剤は、１９９３年にインターフェロンベータ−１ｂ（ベタセロン）、１９９６年にインターフェロンベータ−１ａ（アボネックス）及び１９９６年にコパキソン（ＧＡ又はコポリマー１）であるが、それらはきわめて高価である。 ＩＦＮ−βは、再発−寛解ＭＳに大きな影響を及ぼしたが、これが進行性の二次的ＭＳへの移行を予防し得るかどうかは不明である。ＩＦＮ−βの作用機序は明らかではない。それは恐らく、ＩＬ−１０の誘導及びメタロプロテイナーゼのブロックによるＴ細胞移動の抑制を含む多数の種々の機序の改変を含むと考えられる（Ｓｔｕｖｅ Ｏ．ら、インターフェロンベータ１ｂは、インビトロでＴリンパ球の移動を減少させる：マトリックスメタロプロテイナーゼ−９に及ぼす効果（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｂｅｔａ−１ｂ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ：ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ−９）（１９９６）、Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．４０：８５３〜８６３頁）。ＩＬ−１２及びＩＬ−２３の共通のｐ４０鎖のブロックに基づいた臨床試験が現在始まっている。これらの臨床試験はまた、Ｂ７−ＣＤ２８とＩｇ ＣＴＬＡ−４との相互作用を介した共刺激性シグナルのブロックを含む。 ＧＡに関しては、多くの患者において、ＧＡの毎日の注射により、ＣＤ４＋Ｔ細胞に関するＩＬ−５及びＩＬ−１３の分泌が生じ、Ｔｈ２応答の変化を示している（Ｄｕｄａ ＰＷら、複合抗原に対するヒト及びマウスＣＤ４ Ｔ細胞反応性：合成ランダムポリペプチドグラチラマーアセテートの認識（Ｈｕｍａｎ ａｎｄ ｍｕｒｉｎｅ ＣＤ４ Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ｃｏｍｐｌｅｘ ａｎｔｉｇｅｎ：ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｒａｎｄｏｍ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｇｌａｔｉｒａｍｅｒ ａｃｅｔａｔｅ）（２０００）、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６５：７３００〜７３０７頁）；Ｑｉｎ Ｙ．ら、グラチラマーアセテートで処置した多発性硬化症患者由来のＴ細胞系の特性化（Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｇｌａｔｉｒａｍｅｒ−ａｃｅｔａｔｅ−ｔｒｅａｔｅｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ）（２０００）、Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ １０８：２０１〜２０６頁）；Ｄａｂｂｅｒｔ Ｄ．ら、グラチラマーアセテート（コポリマー１）特異的、ヒトＴ細胞系：サイトカインプロフィール及びミエリン塩基性タンパク質に対して反応性のＴ細胞系の抑制（Ｇｌａｔｉｒａｍｅｒ ａｃｅｔａｔｅ（ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１）−ｓｐｅｃｉｆｉｃ，ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ：ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｐｒｏｆｉｌｅ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｒｅａｃｔｉｖｅ ａｇａｉｎｓｔ ｍｙｅｌｉｎ ｂａｓｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ）（２０００）、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ ２８９：２０５〜２０８頁）。さらに、ＧＡに対して反応性のＴ細胞の生存率は、多様なペプチドと交差反応するその能力によって測定すると、変性の程度が高いことが示されている。 現在、免疫学において検討中の独創的なコンセプトが存在している。それらは、調節Ｔ細胞の存在によって裏付けられているクローン選択及びその代替、優性寛容のパラダイムとは相容れない証拠の解釈を制限している従来の規則より優れているからである。 我々の発明によって提供される療法オプションは、他の療法の中でもとりわけ、この細胞集団：ナチュラルｒＴｃ ＣＤ４＋ＣＤ２５ ｈｉｇｈ、Ｆｏｘｐ３＋又はＩＬ−１０又はＴＧＦ−βの誘導ｒＴｃ産生物質を増加させる能力によって自己免疫疾患において重要な役割を果たしていると考えられるこのエフェクター／レギュレーターの不均衡を復帰させることに焦点を当てている。 ＲＡは、大きな不利益を生む別の自己免疫炎症性疾患である。ＲＡに罹患した人の５０％から９０％が、最初の診断の１０年後に重篤な身体障害を有すると考えられている（Ｍａｒｋｅｎｓｏｎ ＪＡ．（１９９１）、社会経済的影響及び長期予測における世界的傾向又はリウマチ様関節炎（Ｗｏｒｄｗｉｄｅ ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｏｃｉｏｅｃｏｎｏｍｉｃ ｉｍｐａｃｔ ａｎｄ ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｏｒ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ）、Ｓｅｍｉｎ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ：２１（２）、４〜１２頁）。米国においてＲＡによって生じる治療及び身体障害の費用は、毎年６兆５千億ドルにもなる（Ｆａｎｃｉ Ａら（編集者）（１９９８）、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ ｐｒｉｎｃｉｐａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．（第１４版）（３７６章、２４１２頁）．Ｎｅｗ Ｃｏｒｋ：ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ；Ｙｅｌｉｎ Ｅ．（１９９６）。リウマチ様関節炎の費用：絶対、増分及び限界予測（Ｔｈｅ ｃｏｓｔ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ａｂｓｏｌｕｔｅ，ｉｎｃｒｅｍｅｎｔａｌ，ａｎｄ ｍａｒｇｉｎａｌ ｅｓｔｉｍａｔｅｓ）、Ｊ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ：（増補４４）２３、４７〜５１頁）。 ＲＡは最も一般的な炎症性関節炎であり、世界の成人集団の０．５〜１％における身体障害の主要な原因である。 ＲＡは、主に手及び足の小型の関節が罹患する多関節対称性の炎症である。滑膜の炎症以外に、パンヌスと称される組織塊が侵入し局所関節構造を破壊する。ＲＡでは、ＣＤ４＋Ｔ細胞、Ｂリンパ球及びマクロファージが滑膜に浸潤し、時には、発芽中心を有する別のリンパ球凝集物として組織化される。内膜層の肥厚化は、線維芽細胞及びマクロファージタイプの滑膜細胞の著しい増加の結果である。局所的に発現する分解酵素としては、メタロプロテイナーゼ類、絹プロテアーゼ類及びアグレガナーゼ類が挙げられ、細胞下マトリックスを消化し、関節構造を破壊する（Ｆｉｒｅｓｔｅｉｎ ＧＳ．リウマチ様関節炎の進展するコンセプト（Ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ）（２００３）、Ｎａｔｕｒｅ ４２３：３５６〜６１頁）。 ＲＡの病因は、一般にまだ不明であり、特に、関節構造の特異的抗原に対する自己免疫の役割については議論がある。この疾患の病因における獲得免疫の抗原特異的活性化の罹患に導く遺伝的因子、感染因子及び神経内分泌因子を含む多因子性の機序に有利な実験的証拠がある。ＨＬＡ−ＤＲ４／Ｄｗ４の存在は、罹患した白人患者の約７０％に示されている（Ｓｔａｓｔｎｙ Ｐ．、ＲＡによるＢ細胞アロ抗原ＤＲｗ４の結合（Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｂ−ｃｅｌｌ ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎ ＤＲｗ４ ｗｉｔｈ ＲＡ）（１９７８）、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２９８：８６９〜７１頁）。 病因機序に関して、「エピトープ共有」が、関節炎原性ペプチドに対する、又は恐らく外来抗原を模倣する自己抗原（分子模倣）に対する結合部位として作用し得る。ある病原菌が、ＲＡを開始させる可能性のある実体として提案されており（Ｆｅｌｄｍａｎｎ Ｍ．ら、ＲＡにおけるサイトカインの役割（Ｒｏｌｅ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ＲＡ）（１９９６）、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １４：３９７〜４４０頁）、特に、生理学的表現型を変化させることによって正常なヒト滑膜線維芽細胞に侵襲性を誘導するウィルスの能力を有するパルボウィルスＢ１９が立証されている（Ｒａｙ ＮＢら、正常なヒト滑膜線維芽細胞におけるヒトパルボウィルスＢ１９による侵襲性表現型の誘導（Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ Ｂ１９ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｈｕｍａｎ ｓｙｎｏｖｉａｌ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ）（２００１）、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ４４：１５８２〜６頁）。 他の重要な病因は、プロテウスミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）である（Ｅｂｒｉｎｇｅｒ Ａ．ら、ＲＡに関連するＨＬＡ−ＤＲ１サブタイプとＤＲ４サブタイプとの間の配列類似性及びプロテウス／セラチア膜ヘモリシン（Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｂｅｔｗｅｅｎ ＨＬＡ−ＤＲ１ ａｎｄ ＤＲ４ ｓｕｂｔｙｐｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＲＡ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｕｓ／Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｈａｅｍｏｌｙｓｉｎｓ）（１９９２）、Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ ５１：１２４５〜６頁）。最近、この疾患の進行における生得的免疫の直接的な役割が強調されている。ＲＡの自然な経過は、３つの段階：誘導、維持及び組織破壊を特徴とする。Ｔ細胞の活性化に関与する分子、壊食機序におけるＴ細胞の役割についての知識の進展、並びに「ホーミング」及び血管新生の過程に関与するケモカインについての研究により、適応免疫系の抗原特異的活性化の理論が裏付けられている。したがって、ＲＡ時、滑膜炎及び壊食の病因は、生得的免疫系と適応免疫系の双方を機序を含んで、最終的な関節損傷の誘導が生じる。（Ｖａｌｅｎｉｓｉ Ｇ．、Ｂａｒｏｎｅ Ｆ．ら、免疫学及びリウマチ様関節炎病因論の進展（Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ）（２００４）、ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ ５６：９〜２０頁）。 最近、膜に、又は特定の可溶性媒介物質に結合した分子に対して用いられる生物学的薬剤の開発が、ＲＡの治療を革命的に変えた。ＴＮＦ−αの抑制、及び重要性は劣るがＩＬ−１抑制の成功により、ＲＡの臨床管理における堅固に確立された療法が提供されている。臨床試験における、及び実際の生活経験におけるＴＮＦ−α抑制剤の使用データにも関わらず、相当な割合の患者がこれらの薬剤に応答しないか、又はそれらに対する初期の応答性を失って、新たな療法の探索が必要となっている。昨年、モノクローナル抗体のリツキシマブを用いるＢ細胞枯渇により、この疾患の症状及び徴候に著しい改善が生じた。同時に、Ｉｇ ＣＴＬＡ−４の使用により、Ｔ細胞の共刺激シグナルの抑制を介して、改善及び許容し得る毒性が見られた。選択的ＩＬ−６抑制、ＲＡにおける中枢炎症誘発性サイトカインは、該疾患の状態、特にＲＡに関連した急性応答段階において、臨床的改善を生じさせた（Ｓｉｎｇｈ Ｒ．ら、リウマチ様関節炎における生物学的療法の出現：細胞標的及びサイトカイン（Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｉｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ｃｅｌｌ ｔａｒｇｅｔｓ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ）（２００５）、Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ １７：２７４〜７９頁）。 アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、薬剤に対するアレルギー及びアトピー性アレルギー性湿疹／皮膚炎症候群及び他のものを含むアレルギー性疾患は、免疫グロブリンＥによって媒介されると思われる一般的な機能障害の一群である。世界のいずれの国でもあらゆる年齢の人々がこれらの疾患に罹る。アレルギーの罹患率は、最近増加している。世界の人口の３０〜４０％が罹患し、２１世紀の三大疾患の１つと考えられている。 最近の２０年間、炎症はアレルギー反応の主要な病態生理学的特徴の１つである。肥満細胞は、アレルギー反応の主要な伝達物質であり、それらの活性化は、アレルゲンに曝露された感受性の個体における微小血管透過性及び組織浮腫の急速な発現のための必要十分条件である。肥満細胞は、ヒスタミン、中性プロテイナーゼ類、プロテオグリカン類、プロスタグランジンＤ２、ロイコトリエンＣ４及び一定のサイトカインなど、アレルギー性炎症の伝達物質の主要源である（Ｐａｒｉｋｈ ＩＮＣら、肥満細胞顆粒における予備形成酵素及びアレルギー性鼻炎におけるそれらの役割の可能性（Ｐｒｅｆｏｒｍｅｄ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｍａｓｔ ｃｅｌｌ ｇｒａｎｕｌａｔｅｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｒｈｉｎｉｔｉｓ）（２００３）、Ｃｕｒｒ Ａｓｔｈｍａ Ｒｅｐ ３：２６６〜２７２頁）。これらのうちで、ヒスタミンは、喘息に関与する病態生理学的変化の最初の伝達物質である。 気管支喘息は、アレルゲンに対する過敏症にとって、恐らく二次的な、気道の慢性炎症の１つの表現である。したがって、この疾患の治療は、アレルゲン刺激に関連した炎症性応答を最小化するための環境制御、並びに、炎症を減少させ、該疾患の進行を防ぐための抗炎症療法の使用からなる（Ｃｒａｉｇ ＭＬ．、喘息の多様性：病態生理学のコンセプトの進展及び遺伝学からの教訓（Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ａｓｔｈｍａ：ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｏｆ Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｌｅｓｓｏｎｓ ｆｒｏｍ ｇｅｎｅｔｉｃｓ）（２００５）、Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １１５：Ｓ５２６〜３１頁）。 喘息は、先進国に固有であり、小児の４人に１人が罹患し得る（Ａｓｈｅｒ ＭＩ．、Ｋｅｉｌ ＯＲ．ら、小児期における喘息及びアレルギーの国際的調査（ＩＳＡＡＣ）：根拠及び方法（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ａｓｔｈｍａ ａｎｄ ａｌｌｅｒｇｉｅｓ ｉｎ ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ（ＩＳＡＡＣ）：ｒａｔｉｏｎａｌｅ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄｓ）（１９９５）、Ｅｕｒ Ｒｅｓｐ Ｊ ８：４８３〜９１頁）。気管支の過敏性は、喘息の生理学的体制内で見られるが、それはまた、喘息に罹っていない個体でも生じる（集団全体の１０〜１５％以内）。 現在、喘息は、複雑な免疫生物学による遺伝的−環境的相互作用によって生じる疾患であると考えられている。喘息は、気道内へのアレルゲンの放出により、人生早期に始まる。喘息の免疫認識における第１の段階は、抗原が免疫細胞に進入する際に生じる。樹状細胞などのＡＰＣが抗原として働き得る外来タンパク質を組み込む。ＡＰＣは、それらを小型ポリペプチドへと加水分解し、それらはＭＨＣクラスＩＩコンテキストにおいて、ＡＰＣの表面上に発現され得る。この提示に伴って、ＡＰＣの表面上に付属分子が発現する。この過程は気道表面の近くで生じ得、これは、ＣＣＲ７リガンド、ＥＢＩ−１及び二次的リンパ球組織のケモカインの影響下で、リンパ球組織へＣＣＲ７を有するこれらの細胞が移動することによって継続され、これによって、記憶Ｔ細胞及びＣＣＲ７を有する「ナイーブな」細胞も引き寄せられる。Ｔ細胞の活性化は、ＡＰＣでロードされた抗原に対する局所のリンパ球組織で起こる。サイトカインの局所的発現は、抗原提示に対するＴ細胞の応答に深い影響を与え得、この過程は免疫偏向と称される。ＩＬ−１２の存在下、これらの細胞は、ＩＦＮ−γを発現するＴｈ１表現型を有する。ＩＬ−１０の影響下、これらの細胞は、喘息の進行を制限する上で重要であると考えられるレギュレーター表現型を発現し得る。ＩＬ−４及びＩＬ−１３の影響により、喘息の存在にとって必要なＴｈ２表現型の発現に至る。興味深いことに、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、ＣＤ４０及び活性化によって誘導されたシチジンデアミナーゼと称される酵素の組合せ作用が、アトピー性喘息で増加しているＢリンパ球の組換え及びアレルゲンに対する特異的ＩｇＥの産生に欠失変化を生じさせる。これが、アレルゲンに、並びに肥満細胞、好塩基球及び好酸球などのアレルギー性応答のエフェクター細胞上の受容体に特異的に結合し、喘息の症状を引き起こす伝達物質の放出に至らしめるＩｇＥの能力である。 喘息におけるエフェクター分子としては、血小板の活性化因子であるヒスタミン、プロテアーゼ類及びアラキドン酸（ＡＡ）の代謝物が挙げられる。プロスタグランジン（ＰＧ）及びロイコトリエン（ＬＴ）は、アレルギー反応及び喘息反応の間に酵素的に産生されるＡＡの代謝物であり、それらは気道環境内の限定された場所に存在し、肺内の常在細胞に影響を及ぼす一方、特定の受容体に作用する（Ｄｒａｚｅｎ ＪＭ．、喘息におけるロイコトリエン（Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓ ｉｎ ａｓｔｈｍａ）（２００３）、Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ ５２５：１〜５頁）。喘息におけるエフェクター炎症細胞は、ロイコトリエンを産生する一方、肺の構造細胞はプロスタグランジンを産生する（Ｈｏｌｇａｔｅ ＳＴ．ら、気道炎症におけるシステイン化ロイコトリエンの役割（Ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｃｙｓｔｅｉｎｙｌ ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓ ｉｎ ａｉｒｗａｙ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）（２００３）、Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １１１（増補）：Ｓ１８〜３６頁）。 ＰＧ及びＬＴはまた、酸化的ストレスの結果としても形成され得る。ペルオキシダ−ゼを含有する気道の顆粒球の活性化は、この段階でのオキシダントの生成に関連している。窒素及び酸素の反応性の種の形成が気道環境の低下させる能力を超えると、脂質膜の過酸化が生じ得る。この過程により、イソプロスタン形成が導かれ、これらは酸化的ストレスのマーカーである。 多型マーカー、並びに喘息罹患のいく人かの成員の表現型に特徴のある家族を利用して、該疾患に関連した遺伝子変異体の同定が可能になっている。喘息に関連があることが疑われた遺伝子（ＩＬ４、ＩＬ１３、Ｔｂｅｔ及びＧＡＴＡ３）の１２の試験からの集団の検査により、該疾患に関連がないことが示された。喘息に関連があった遺伝子としては、デスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ３３（ＡＤＡＭ３３）（Ｖａｎ Ｅｅｒｄｅｗｅｇｈ Ｐ．、Ｌｉｔｔｌｅ ＲＤら、ＡＤＡＭ３３遺伝子と喘息及び気管支応答性亢進との関連（Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＡＤＡＭ３３ ｇｅｎｅ ｗｉｔｈ ａｓｔｈｍａ ａｎｄ ｂｒｏｎｃｈｉａｌ ｈｙｐｅｒｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ）（２００２）、Ｎａｔｕｒｅ ４１８：４２６〜３０頁）、ジペプチジルペプチダーゼ１０（ＤＰＰ１０）及びＰＨＤフィンガータンパク質１１（ＰＨＦ１１）（Ｚｈａｎｇ Ｙ．ら、免疫グロブリンＥ濃度及び喘息に影響を与える染色体１３ｑ１４上の定量的特性座の位置的クローニング（Ｐｏｓｉｔｉｏｎａｌ ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ｔｏ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｔｒａｉｔ ｌｏｃｕｓ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ １３ｑ１４ ｔｈａｔ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｅ ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ａｓｔｈｍａ）（２００３）、Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ ３４：１８１〜６頁）などのいくつかのよく知られた多機能遺伝子が挙げられる。これらの遺伝子の変異体が喘息の病因に影響を及ぼす機序は現在研究されている。 喘息の病因において出されているモデルがある。喘息の伝統的なモデルは、気道における平滑筋の機能及び炎症経路に焦点を当てていた。現在、それは、サイトカイン及びケモカインの発現に影響を及ぼすレギュレーター系のコンセプトを組み込み、気道における常在細胞の成長及び増殖に及ぼすアレルゲンの効果を含み（Ｈｏｌｇａｔｅ ＳＴら、気道炎症におけるシステイン化ロイコトリエンの役割（Ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｃｙｓｔｅｉｎｙｌ ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓ ｉｎ ａｉｒｗａｙ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）（２００３）、Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １１１（増補）：Ｓ１８〜３６頁）、喘息におけるＤＰプロスタノイド受容体の役割を説明している。このモデルにおいて、刺激物質、毒素又はアレルゲンへの曝露は、適応免疫系の偏向並びに気道へのＴｈ２リンパ球、好酸球及び肥満細胞の動員を可能にするのみならず、気道の平滑筋の細胞の近くへの肥満細胞の配置においても間接的に作用し（Ｂｒｉｇｈｔｌｉｎｇ ＣＥら、喘息における気道平滑筋の肥満細胞浸潤（Ｍａｓｔ−ｃｅｌｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｉｒｗａｙ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｉｎ ａｓｔｈｍａ）（２００２）、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３４６：１６９９〜７０５頁）、プロスタノイドＤＰ受容体を活性化して、その生存を助長する（Ｇｅｒｖａｉｓ ＦＧら、ＰＧＤ２受容体、ＣＲＴＨ２及びＤＰを介したケモキネシスの選択的調節、脱顆粒、及び好酸球のアポトーシス（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓｉｓ，ｄｅｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ，ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ＰＧＤ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ＣＲＴＨ２ ａｎｄ ＤＰ）（２００１）、Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １０８：９８２〜８頁）。アレルゲンへの反復的曝露により、気道上皮細胞の活性化条件に変化が生じ、上皮下の線維芽細胞が、コラーゲン分泌型筋芽細胞表現型へと形質転換する因子が放出される。気道の基底膜上へのコラーゲンの沈着により、気道の平滑筋の狭窄応答を変化させ、管腔面積に影響が及ぼされる（Ｗｉｇｇｓ ＢＲら、喘息及び慢性閉塞性肺疾患における気道狭小化のモデル（Ａ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａｉｒｗａｙ ｎａｒｒｏｗｉｎｇ ｉｎ ａｓｔｈｍａ ａｎｄ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ）（１９９２）、Ａｍ Ｒｅｖ Ｒｅｓｐ Ｄｉｓ １４５：１２５１〜８頁）。喘息の症状は、気道からの好酸球及び肥満細胞の収縮性伝達物質の放出エピソードを介して生じる。出されているコンセプトは、喘息が、感染性物質、アレルゲン及び環境毒素によって生じ、時間を経て、細胞組成及び気道構造の変化に至る疾患であるというものである。 喘息では、動物モデルにおいて、エフェクター細胞の「インビトロ」及び「インビボ」活性化を防止し得る抑制性又は調節性Ｔ細胞の種々のサブタイプが記載されている。最近の証拠において、アレルギー感作の発現に役割を果たし得るＣＤ４（＋）ＣＤ２５（＋）ナチュラル調節Ｔ細胞及びＩＬ−１０産生調節Ｔ細胞の抑制活性の欠損が示唆されている。該療法は、喘息における調節Ｔ細胞とエフェクター細胞との間の均衡の維持を標的化する必要がある（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ ＤＳ、喘息病因における調節リンパ球の役割（Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ａｓｔｈｍａ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ）（２００５）、Ｃｕｒｒ Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｒｅｐ ５：１３５〜４１頁）。 腫瘍形成について提案されたモデルは、種々のタイプの癌の特徴的な主要なコミュネシス（ｃｏｍｕｎｅｓｅｓ）の分析に基づいている。 最近の研究（Ｋａｒｐｉｎｅｔｓ Ｖ．ら、腫瘍形成：持続ストレス環境に対する、後成的変化及び引き続くマッチド変異による哺乳動物細胞の適応（Ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ：ｔｈｅ ａｄａｐｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｓｔｒｅｓｓ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｂｙ ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｓｕｃｃｅｅｄｉｎｇ ｍａｔｃｈｅｄ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ）（２００５）、Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２６：１３２３〜１３３４頁）で、腫瘍形成の悪性転換時、該細胞は、エラー及び異常有糸分裂を生じる性向を有するポリメラーゼの関与による細胞分裂時のエラーを犯す傾向の結果、それら自体に変異を生じさせ得ることが示されている。これらの機序は、持続ストレス環境（ＳＳＥ）におけるシグナル伝達の存続及び増殖の継続により、細胞において活性化され得る：このシグナル伝達に対する長期曝露は、後成的に一定の細胞のゲノムを再プログラム化し、それらの配列を生じさせる。後成的な再プログラム化により以下のことが生じる：細胞周期停止、ＤＮＡ修復及びアポトーシスの開始に関与する腫瘍抑制遺伝子の過剰メチル化、持続的増殖活性に関連した癌原遺伝子の低メチル化、全ゲノム脱メチル化、並びにＤＮＡ反復配列の活性化。 このモデルに従って、ＳＳＥにおける持続的増殖及びシグナル伝達が、例えば、発癌物質曝露の結果としての永続的攻撃に曝された組織におけるサイトカインの継続的な産生によって生じ得る。同様なストレスに関連したシグナル伝達は、炎症、ホルモン及びウィルス感染など、極めてよく知られた癌誘発物質などの他の生理学的及び環境的な因子によって誘導され得る。 癌の原因及び発現に関与したホルモンは、十分に文書化されている。多くのホルモンが、多くの細胞における増殖応答とシグナル伝達存続双方を活性化し、それらの増殖並びにアポトーシス抑制を誘導することが知られている（Ｍｏｇｇｓ ＪＧら、エストロゲンに誘導された子宮成長時に遺伝子発現の表現型固定が変化する（Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ａｎｃｈｏｒｉｎｇ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｈａｎｇｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｅｓｔｒｏｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｕｔｅｒｉｎｅ ｇｒｏｗｔｈ）（２００４）、Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｈｅａｌｔｈ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ １１２：１５８９〜１６０６頁）。 これらの問題は、新生物の成長及び発現において細胞周期の調節及びアポトーシス機序がいかに重要であるかを理解する上で大切であり、これらは、細胞の損傷が修復できない場合、活性化プログラム化細胞死の道をもたらし得るシグナル伝達ポイントである（Ｐｉｅｔｅｎｐｏｌ ＪＡら、細胞周期のチェックポイントシグナル伝達：細胞周期停止対アポトーシス（Ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ：ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ｖｅｒｓｕｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）（２００２）、Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ １８１〜１８２：４７５〜４８１頁）。 ｐ５３及びｐ２１がＧ２／Ｍ期における細胞周期の阻止及びＤＮＡ損傷後のアポトーシスの維持に必須であることが、研究により示されている。Ｇ２／Ｍ ｐ５３依存性の停止機序は、ｐ２１に関するＢ１／Ｃｄｃ２サイクリンの活性の初期抑制、及び引き続くＢ１及びＣｄｃ２タンパク質サイクリン濃度の減少を含む（Ｆｌａｔｔ ＰＭら、Ｇ（２）のｐ５３調節チェックポイントｉ網膜芽細胞腫タンパク質依存性（ｐ５３ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇ（２）ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｉ ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ）（２０００）、Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２０：４２１０〜２３頁）；Ｉｎｎｏｃｅｎｔｅ ＩＮＣら、ｐ５３は、サイクリンＢ１を介してＧ２チェックポイントを調節する（ｐ５３ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｏ Ｇ２ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１）（１９９９）、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９６：２１４７〜５２頁）。Ｂ１／Ｃｄｃ２サイクリン濃度及びｐ２１活性の調節の他に、ｐ５３は、カスケード下のさらなる標的遺伝子の正の転写調節を介して、チェックアップ応答も実施する（Ｃｈａｎ ＴＡら、ＤＮＡ損傷後の有糸分裂カタストロフィーを防ぐために、１４−３−３ Ｓｉｇｍａが必要である（１４−３−３ Ｓｉｇｍａ ｉｓ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｔｏ ｐｒｅｖｅｎｔ ｍｉｔｏｔｉｃ ｃａｔａｓｔｒｏｐｈｅ ａｆｔｅｒ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ）（１９９９）、Ｎａｔｕｒｅ ４１０：６１６〜２０頁）。 アポトーシスの誘導は、カスケード下のｐ２１などのｐ５３標的遺伝子の正の調節に関連していることが報告されている（Ｋａｎｎａｎ Ｋ．ら、ｐ５３により調節される一次的及び二次的標的遺伝子のＤＮＡマイクロアレイ同定（ＤＮＡ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅｓ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｐ５３）（２００１）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２０：２２２５〜２２３４頁）。 細胞過程に及ぼす形質転換株ウィルスの効果は、ＳＳＥの多くの態様を模倣している。一定のウィルスによってコードされる腫瘍性タンパク質発現は、生存及び増殖シグナルと同じ方法で宿主細胞過程を変化させる。悪性疾患のおよそ１／４は、慢性炎症の段階を経る（Ｃｏｕｓｓｅｎｓ ＬＭら、炎症及び癌（Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ）（２００２）、Ｎａｔｕｒｅ ４２０：８６０〜７頁）。発癌物質に付されたＳＳＥと同様に、この細胞環境により、該系の細胞防御における重要な要素としての酸素反応性種の産生が導かれる。したがって、炎症は、その原因論とは関わりなく、細胞侵襲、ＤＮＡ損傷を引き起こし、ＳＳＥを誘導する、サイトカイン及び成長因子に富んだミクロ環境を生じさせる。「癌免疫編集」と称されるより全体的な過程の一部であり得る、腫瘍に対する免疫学的監視の自然の機序の存在を持続させる多くの証拠が存在する。これは、認識及び腫瘍除去から腫瘍脱出を含む、腫瘍発現に及ぼす生得及び獲得免疫の作用の完全な一連の過程を含む（Ｄｕｎｎ ＧＰら、癌免疫編集の３つ：免疫監査から腫瘍脱出まで（Ｔｈｅ Ｔｈｒｅｅ ｉｓ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｉｍｍｕｎｏｅｄｉｔｉｎｇ：ｆｒｏｍ ｉｍｍｕｎｏｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ ｔｏ ｔｕｍｏｒ ｅｓｃａｐｅｓ）（２００４）、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２２：３２９〜３６０頁）。驚くべきことに、非損傷免疫系の非存在下で形成された腫瘍は、免疫競合宿主において形成された腫瘍よりもより免疫原性である。これによって、腫瘍発現に対する宿主の防御面のみならず、免疫原性に基づいた腫瘍変異体の選択に及ぼす影響面での免疫系の役割が強化される。 基本的に、ＭＨＣクラスＩコンテキストにおいて提示された抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞（ＣＴＬ）のリンパ球毒性応答は、抗腫瘍免疫応答における獲得免疫の主要なエフェクター分枝であると考えられ、この様式で、抗腫瘍免疫療法の傾向としては、ＣＴＬ応答の増加に焦点が当てられていることが多い。 腫瘍に対する免疫学的監査の理論により、免疫系が腫瘍細胞を認識し、排除することができることが疑いもなく立証されている。 腫瘍に対する免疫学的監視の機序における最も関連性のある態様の１つは、ＩＦＮ−γの役割である。免疫細胞系によって産生されたＩＦＮ−γは、移植された腫瘍の成長に対して、並びに化学的に誘導された、及び自然の腫瘍の誘導に対して、宿主を防御することができる（Ｄｉｇｈｅ ＡＳら、ＩＦＮ−γ受容体の非活性形態の過剰発現により誘導されたインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）に対する細胞応答の阻害（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ ｔｏ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−γ（ＩＦＮ−γ）ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｉｎａｃｔｉｖｅ ｆｏｒｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ＩＦＮ−γ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）（１９９３）、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６８：１０６４５〜５３頁）。先の記述を裏付ける証拠が存在する。例えば、移植された腫瘍を有するマウスに、モノクローナル抗体、抗ＩＦＮ−γを注射すると、ＬＰＳによって誘発されるそれらの拒絶反応を阻止することが示され；移植された線維肉腫は、非処置マウスにおいてよりも、モノクローナル抗体、抗ＩＦＮ−γで処置されたマウスにおいて、より速やかに、より効率的に成長し；ノックアウトマウス（−／−）ＩＦＮ−γＲ又は（−／−）ＳＴＡＴ１は、対照マウスよりもより短時間で、より低用量のメチルコラントレン（ＭＣＡ）によってより多くの腫瘍を具体的に発現することにより、対照マウスよりも、ＭＣＡによる腫瘍誘発に対して、１０倍から２０倍感受性であった（Ｑｉｎ Ｚ．ら、メチルコラントレン誘発発癌の、ＩＦＮ−γ受容体依存性異物反応による抑制（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈｙｌｃｈｏｌａｎｔｈｒｅｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ｂｙ ａｎ ＩＦＮ−γ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｆｏｒｅｉｇｎ ｂｏｄｙ ｒｅａｃｔｉｏｎ）（２００２）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １９５：１４７９〜９０頁）。 ＩＦＮ−γに感受性でない腫瘍系は、感受性のものよりも多く増殖する。腫瘍免疫拒絶は、ノックアウトマウスときわめて類似した方法で抑制される。この実験モデルにおいて、腫瘍細胞は、拒絶過程におけるＩＦＮ−γの生理学的標的である。ＩＦＮ−γは、腫瘍に及ぼす直接的作用を有する抗増殖性及びアポトーシス促進性を与える。抗腫瘍応答生成におけるＴｈ１応答誘導の重要性と同様に、ＩＦＮ−γ依存性ＭＨＣ Ｉ抗原提示増強の重要性が立証されている。 ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｆｉｃｏ組合せの一部をなす２つの独立した活性成分を用いる根拠に関連して、ＭＳにおけるＩ型ＩＦＮ類（ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−β）の有益な効果を示唆する証拠がある。 抗ウィルス効果：Ｉ型ＩＦＮ類は、強力な抗ウィルス効果を有し、それらは、細胞がウィルスに感染した後に誘導され、ＲＮＡ又はＤＮＡのウィルス複製を妨害する２’５’オリゴアデニレートシンセターゼなどの多数の酵素の合成を促進する。この初期応答（抗原に非特異的）は、抗原に対する特異的応答が感染を完全に制御し得る前のウィルス感染拡大の制限において重要である。 ＭＳ素因における感染の役割に関しては不一致があり、例えば、Ｓｉｅｖｅら（Ｓｉｅｖｅ ＡＮら、ＳＪＬマウスにおけるサイラーウィルス初期感染時の慢性の拘束ストレスは、引き続く脱髄疾患を悪化させる（Ｃｈｒｏｎｉｃ ｒｅｓｔｒａｉｎｔ ｓｔｒｅｓｓ ｄｕｒｉｎｇ ｅａｒｌｙ Ｔｈｅｉｌｅｒ’ｓ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｓ ｔｈｅ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｄｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ＳＪＬ ｍｉｃｅ）（２００４）、Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．１０月号、１５５（１−２）：１０３〜１８頁）は、ＳＪＬマウスにおける脱髄性疾患の動物モデルにおいて、サイラーウィルスの感染が、脱髄事象の増強を生じさせることを立証し、対照的に、住血吸虫症が、ＥＡＥモデルにおいて、ＭＳに対する防御を提供することを報告し、マンソン住血吸虫感染によるＭＳ開始の直接的抑制を観察している（Ｔｈｅ Ｆｌａｍｍｅ ＡＣら、住血吸虫症は多発性硬化症を防御する（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）（２００４）、Ｍｅｍ Ｉｎｓｔ Ｏｓｗａｌｄｏ Ｃｒｕｚ；９９（増補５版、１）：３３〜６頁、Ｅｐｕｂ、２００４年、１０月１３日）。 抗増殖、抗アポトーシス及び細胞分化効果：ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βは、全ての細胞周期の段階：Ｍ、Ｇ１及びＧ２に影響を及ぼし得る。線維芽細胞が血清、上皮成長因子（ＥＧＦ）又はインスリンによって刺激されると、ＩＦＮｓは、Ｇｉ期の延長、Ｓ期への進入速度の低下並びにＳ期及びＧ２期の遅速化を生じさせる（Ｂａｌｋｗｉｌｌ Ｆら、インターフェロンは、静止状態から増殖へと刺激された細胞におけるＧ１とＳ＋Ｇ２の双方に影響を及ぼす（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｆｆｅｃｔｓ ｂｏｔｈ Ｇ１ ａｎｄ Ｓ＋Ｇ２ ｉｎ ｃｅｌｌｓ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｑｕｉｅｓｃｅｎｃｅ ｔｏ ｇｒｏｗｔｈ）（１９７８）、Ｎａｔｕｒｅ ２７４：７９８〜８００；Ｇｅｗｅｒｔ ＤＲＭＧら、インターフェロン１による細胞増殖の抑制。ヒトリンパ芽球（ダウディ）細胞における細胞分裂及びＤＮＡ合成に及ぼす効果（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ １．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｃｅｌｌ ｄｉｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｓ（Ｄａｕｄｉ）ｃｅｌｌｓ）（１９８４）、Ｅｕｒ Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ １３９：６１９〜６２５頁）。正常細胞及び腫瘍細胞におけるＩＦＮによる細胞周期延長の累積効果により、細胞分裂停止、細胞容量の増加及びアポトーシスが生じる（Ｏｔｓｕｋｉ Ｔら、インターフェロンαによって誘導されたヒト骨髄腫細胞のアポトーシス（Ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｍａ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−α）（１９９８）、Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ １０３：５１８〜５２９頁）。 腫瘍細胞は、細胞周期の進行を制御する１種又は複数のタンパク質における改変を発現する。ＩＦＮによって調節される癌原遺伝子としては、ｃ−ｍｙｃ（Ｒａｖｅｈ Ｔら、二本鎖ＲＮＡ依存性タンパク質キナーゼは、タイプＩインターフェロンによって誘導されるｃ−Ｍｙｃ抑制を媒介する（Ｄｏｕｂｌｅ−ｓｔｒａｎｄｅｄ ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｃ−Ｍｙｃ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ）（１９９６），Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７１：２５４７９〜２５４８４頁）、ｂｃｌ−２（Ｋｏｓｈｉｊｉ Ｍら、Ｂｃｌ−２発現のダウンレギュレーションに起因する腫瘍壊死因子アルファ及び／又はインターフェロンガンマによる結腸直腸腺癌（ＣＯＬＯ２０１）のアポトーシス（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＣＯＬＯ２０１）ｂｙ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ ａｎｄ／ｏｒ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｇａｍｍａ ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ｆｒｏｍ ｄｏｗｎ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｃｌ−２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）（１９９８），Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｕｎｏｌ １１１：２１１〜２１８頁）、ｃ−Ｈａ−ｒａｓ（Ｓａｍｉｄ Ｄ．ら、ヒト発癌遺伝子によって形質転換されたインターフェロン処理マウス細胞における表現型復帰の生化学的関連性（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｏｆ ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ｒｅｖｅｒｓｉｏｎ ｉｎ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｔｒｅａｔｅｄ ｍｏｕｓｅ ｃｅｌｌｓ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ ｂｙ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｏｎｃｏｇｅｎｅ）（１９８４）、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍ １１９：２１〜２８頁）及びｃ−ｓｒｃが挙げられる。多くの腫瘍において他の重要な変異タンパク質は、網膜芽腫（Ｒｂ）である。Ｅ２Ｆ転写因子との結合によるこのタンパク質のリン酸化過剰により、細胞周期の進行が抑制され；ＩＦＮ−αによる処理によって、このリン酸化過剰の抑制が生じる（Ｋｕｍａｒ Ｒら、インターフェロンαは、ヒトのバーキットリンパ腫ダウディ細胞において網膜芽腫遺伝子産物の発現を誘導する：増殖調節における役割（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−α ｉｎｄｕｃｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ ｇｅｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｎ ｈｕｍａｎ Ｂｕｒｋｉｔｔ ｌｙｍｐｈｏｍａ Ｄａｕｄｉ ｃｅｌｌｓ：ｒｏｌｅ ｉｎ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ）（１９９２），Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８９：６５９９〜６６０３頁；Ｒｅｓｎｉｔｚｋｙ Ｄ．ら、インターフェロン及びインターロイキン６は、増殖感受性造血細胞において、網膜芽腫タンパク質のリン酸化を抑制する（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ６ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｇｒｏｗｔｈ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｃｅｌｌｓ）（１９９２）、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８９：４０２〜４０６頁）。ＩＦＮ−αの効果により、Ｅ２Ｆ、Ｅ２Ｆ−１タンパク質の減少が生じる。 アポトーシス誘導に用いられる経路の１つは、ＦａｓＬへのＦａｓの結合を含み、そのことが死ドメイン、ＦＡＤＤを含有するタンパク質の動員とその結果であるカスパーゼ８などのカスパーゼ類の活性化をもたらす。ＩＦＮ類はＦａｓ発現を正に調節し、したがって、Ｆａｓ媒介のアポトーシス経路を介して作用し得る（Ｗｅｌｌｅｒ Ｍら、培養ヒト膠腫細胞の抗Ｆａｓ／ＡＰＯ−１抗体媒介アポトーシス。サイトカイン類による感受性の誘導及び調節（Ａｎｔｉ−Ｆａｓ／ＡＰＯ−１ ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｈｕｍａｎ ｇｌｉｏｍａ ｃｅｌｌｓ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ（１９９４），Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ ９４：９５４〜９６４頁）。Ｆａｓは、ＩＦＮ−αによって正に調節することができ、（Ｇｏｒｄｏｎ Ｍら、インターフェロンαによる処置は、慢性骨髄腫白血病患者からの顆粒球−マクロファージ前駆体（ＣＦＵ−ＧＭ）の増殖に関する能力を優先的に減少させるが、正常なスペアＣＦＵ−ＧＭは減少させず（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ａｌｐｈａ ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｒｅｄｕｃｅｓ ｔｈｅ ｃａｐａｃｉｔｙ ｆｏｒ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ−ｍｅｃｒｏｐｈａｇｅ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ（ＣＦＵ−ＧＭ）ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋａｅｍｉａ ｂｕｔ ｎｏｒｍａｌ ｓｐａｒｅｓ ＣＦＵ−ＧＭ）（１９９８）、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １０２：７１０〜７１５頁）、この事象は、Ｆａｓによって媒介されるアポトーシスを促進する（Ｓｅｌｌｅｒｉ ＣＭＪら、慢性骨髄腫白血病におけるｂｃｒ／ａｂｌのＦａｓ媒介調節は、アポトーシスに差異的効果をもたらす（Ｆａｓ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｃｒ／ａｂｌ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋａｅｍｉａ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）（１９９８）、Ｂｌｏｏｄ ９２：９８１〜９８９頁）。 遺伝子調節：酵素、２〜５オリゴアデニレートシンセターゼ（２〜５Ａ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）、タンパク質キナーゼ（ＰＫＲ）及びインドレアミン ２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）がＩＦＮ類によって誘導され、２〜５Ａシンターゼは、ＩＦＮシグナル伝達の比較的特異的なマーカーである（Ｈａｓｓｅｌ ＢＡら、２〜５Ａ依存性ＲＮアーゼのドミナントネガティブ変異体は、インターフェロンの抗増殖効果及び抗ウィルス効果を抑制する。（２−５Ａ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮａｓｅ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ａｎｔｉ−ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｎｄ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ）（１９９３）、ＥＭＢＯ Ｊ １２：３２９７〜３３０４頁）。潜在性リボヌクレアーゼは、２〜５Ａによって活性化され；これらの酵素の誘導により、ＲＮＡ及びタンパク質の合成を抑制できる。酵素的に不活性なリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ−Ｌ）の細胞内発現により、ＩＦＮ類の抗ウィルス効果及び抗増殖効果が抑制される。種々のアポトーシス剤によって処置されたマウス無ＲＮａｓｅ−Ｌにおいて、アポトーシスが抑制される（Ｚｈｏｕ Ａら、２’５’−オリゴアデニレート依存性ＲＮａｓｅ Ｉを欠いたマウスは、インターフェロン作用及びアポトーシスを欠く（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｒｅ ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ ｉｎ ｍｉｃｅ ｄｅｖｏｉｄ ｏｆ ２’５’−ｏｌｉｇｏａｄｅｎｙｌａｔｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＲＮａｓｅ Ｉ）（１９９７）、ＥＭＢＯ Ｊ １６：６３５５−６３６３頁）。 ＰＫＲの濃度は、種々のヒト腫瘍及び腫瘍細胞系における増殖活性に逆相関しており、侵襲性の乳癌では、ＰＫＲ活性が小さいことが判明した（Ｈａｉｎｅｓ ＧＫＣＲら、ヒト乳房組織における二本鎖ＲＮＡ依存性タンパク質キナーゼ（ｐ６８）の発現（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｄｏｕｂｌｅ−ｓｔｒａｎｄｅｄ ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ（ｐ６８）ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｔｉｓｓｕｅｓ）（１９９６），Ｔｕｍｏｒ Ｂｉｏｌ １７：５〜１２；Ｓａｖｉｎｏｖａ ＯＪＢら、乳癌細胞におけるｄｓ ＲＮＡ活性化タンパク質キナーゼ、ＰＫＲの異常濃度及び最小活性（Ａｂｎｏｒｍａｌ ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ｍｉｎｉｍａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｄｓ ＲＮＡ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ，ＰＫＲ，ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ）（１９９９）、Ｉｎｔ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ３１：１７５〜１８９頁）。 ＩＦＮに誘導された転写因子であるＩＲＦ−１は増殖時の静止期の細胞で速やかに増加することから、ＩＲＦ−１によってＰＫＲの発現を制御でき、これによって、細胞増殖の負の制御に関与している遺伝子の発現及びＩＦＮに媒介された抗増殖効果に影響を及ぼすことができる。 ＩＤＯによるキヌレニンへのトリプトファンへの分解もまた、トリプトファン欠乏の結果としてのタンパク質合成の抑制及び抗増殖効果に関連している（Ｂｙｒｎｅ Ｇ．ら、インビトロ及びインビボでのトリプトファン分解の誘導：ガンマインターフェロン刺激活性に対して（Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ：ｔｏ ｇａｍｍａ−ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ）（１９８６）、Ｊ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｒｅｓ ６：３８９〜３９６頁）。 また、ＩＦＮ類は、結腸癌のヒト細胞における多剤耐性遺伝子（ｍｄｒ１）を負に調節する（Ｓｔｅｉｎ Ｕら、ヒト結腸癌細胞におけるサイトカインによるｍｄｒ１発現の調節：多剤耐性の逆転アプローチ（Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｄｒ１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ：ａｎ ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ ｒｅｖｅｒｓａｌ ｏｆ ｍｕｌｔｉ−ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．）（１９９６）、Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ７４：１３８４〜１３９１頁）。また、ｂｃｒ遺伝子（ブレークポイントクラスター領域）も、ＩＦＮ−αによって負に調節できることが、ヌクレオチドアレイによって立証されている（Ｄｅｒ ＳＤら、オリゴヌクレオチドアレイを用いた、インターフェロンα、β又はγによって差異的に調節された遺伝子の同定（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｅｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−α，β ｏｒ γ ｕｓｉｎｇ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ａｒｒａｙｓ）（１９９８）、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９５：１５６２３〜１５６２８頁）。 免疫調節効果：ＩＦＮアルファの存在下で培養されクローン化されたＴ細胞において増加したＩＦＮ−γ細胞産生物質（Ｔｈ１細胞タイプ）の比率（Ｐａｒｒｏｎｃｈｉ Ｐら、ＩＬ−４並びにＩＦＮアルファ及びＩＦＮガンマは、Ｔｈ１又はＴｈ２ヒトＴ細胞クローンによる細胞溶解潜在能力の発現に対して、反対の調節効果を及ぼす（ＩＬ−４ ａｎｄ ＩＦＮ ａｌｐｈａ ａｎｄ ＩＦＮ ｇａｍｍａ ｅｘｅｒｔ ｏｐｐｏｓｉｔｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｃｙｔｏｌｙｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｂｙ Ｔｈ１ ｏｒ Ｔｈ２ ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌ ｃｌｏｎｅｓ）（１９９２）、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １４９：２９７７〜２９８３頁）か、又はＴＣＲ／ＣＤ３複合経路を介して、直接的に刺激する（Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｖら、インターフェロンアルファは、ＩＦＮガンマ産生ＣＤ４＋ Ｔ細胞の頻度を増加させる（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｐｈａ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｔｈｅ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ＩＦＮ ｇａｍｍａ−ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ）（１９９３）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １７８：１６５５〜１６６３頁）。他の報告では、ＩＦＮ−αがＩＦＮ−γを誘導することを立証している。ＩＦＮ−γ「ノックアウト」マウスでは、炎症及び脱髄の増加が見られており（Ｔｒａｎ ＥＨら、ＩＦＮガンマは、ケモカインの調節によって中枢神経系の免疫侵襲を形成する（ＩＦＮ−ｇａｍｍａ ｓｈａｐｅｓ ｉｍｍｕｎｅ ｉｎｖａｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ ｖｉａ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ）（２０００）、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６４：２７５９〜２７６８頁）、これは、ＭＳなどの脱髄性自己免疫疾患におけるＩＦＮ−γの保護的役割、及びその結果として、ＩＦＮ−γの増加を示す疾患における有益な役割を示唆しており、これはそれに帰属されることが多い病因性の炎症促進的な役割とは対照的である。 エフェクター免疫細胞に及ぼす効果：ＩＦＮ類は、全ての細胞型の免疫エフェクターの有効性を増大させる。これらには、細胞毒性Ｔ細胞及びナチュラルキラー細胞（ＮＫ）が含まれる。また、抗体依存性細胞の細胞毒性（ＡＤＣＣ）もＩＦＮ類によって増大し得る。ヒトロイコサイト抗原（ＨＬＡ）分子の発現増強に加えて、ＩＦＮ類は、腫瘍細胞の細胞毒性に関する関連Ｔ細胞の機能を直接増大させる（Ｋａｙａｇａｋｉ Ｎら、タイプＩのインターフェロンは、ヒトＴ細胞上の腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導性リガンド（ＴＲＩＬ）の発現を調節する：タイプＩのインターフェロンの抗腫瘍効果に関する新規機序（Ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ ｒｅｇｕｌａｔｅ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ−ｒｅｌａｔｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｌｉｇａｎｄ（ＴＲＡＩＬ）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌｓ：ａ ｎｏｖｅｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｙｐｅ Ｉ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ）（１９９９）、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １８９：１４５１〜１４６０頁）。ＮＫ細胞活性及びそれらの単球機能を増大させるＩＦＮ類の能力は、インビトロ及びインビボで立証されている。 血管新生作用：ＩＦＮ媒介抗腫瘍効果の別の要素は、血管新生阻害である。ＩＦＮ−αの全身投与によって、血管新生タンパク質発現の直接的制御によりＩＦＮ感受性細胞における腫瘍細胞ｂＦＧＦの増殖速度が低下する（Ｄｉｎｎｅｙ ＣＰら、マウスにおけるヒト膀胱癌の塩基性線維芽細胞成長因子発現阻害、血管新生阻害、及び増殖阻害（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｌａｄｄｅｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｍｉｃｅ）（１９９８）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５８：８０８〜８１４頁）。 臨床的にＩＦＮ−αの処置は、異常内皮細胞を含有する腫瘍である血管腫の退縮誘導に成功を収めている（Ｅｚｅｋｏｗｉｔｚ ＲＡＢら、乳児期の生命を脅かす血管腫に対するインターフェロンアルファ−２ｂ治療（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｐｈａ−２ｂ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｌｉｆｅ−ｔｈｒｅａｔｅｎｉｎｇ ｈｅｍａｎｇｉｏｍａｓ ｏｆ ｉｎｆａｎｃｙ）（１９９２）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３２６：１４５６〜１４６３頁）。カポジ肉腫、内皮細胞起源の新生物疾患も又、ＩＦＮ−α処置に応答する（Ｋｒｏｗｎ ＳＥ．、インターフェロン−α：ＡＩＤＳ−関連カポジ肉腫に関する治療の展開（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−α：ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ＡＩＤＳ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｋａｐｏｓｉ’ｓａｒｃｏｍａ）（１９９８）Ｊ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｃｙｔｏ Ｒｅｓ １８：２０９〜２１４頁）。 ＩＦＮ類の抗腫瘍効果：それらの抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の機能的能力又は抗原組成に対する直接作用或いは腫瘍細胞と相互作用する免疫細胞集団の調節に対する間接的作用の結果であると推定されている。 しかしながら、一定数のＩ型ＩＦＮ誘導遺伝子は、アポトーシスに関与し、ＰＫＲ、ＰＭＬ、ＰＡＰ４６／Ｂａｇ−１、リン脂質スクラムブレーズ及びヒポキシ誘導性アルファ−１因子を含む（Ｄｅｒ ＳＤら、オリゴヌクレオチドアレイを用いたインターフェロンα、β又はγにより差動的に調節された遺伝子の同定（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｅｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ α，β ｏｒ γ ｕｓｉｎｇ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ａｒｒａｙｓ）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ（１９９８）；９５：１５６２３〜１５６２８頁）。インビボでのＩＦＮ類効果を、アポトーシス誘導試剤とを組み合わせることにより増加し得るかどうかを判定することが重要となろう。 最近の研究（Ｄｕｎｎ ＧＰら、癌免疫編集におけるＩ型インターフェロンに関する重要な機能（Ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｉｍｍｕｎｏｅｄｉｔｉｎｇ）（２００５）Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ ６：７２２〜２９頁）は、腫瘍の治療におけるＩ型ＩＦＮ（ＩＦＮα／β）の使用を支持する。本研究では、癌「免疫編集」過程における重要な成分として、ＩＦＮα／β並びにＩＦＮ−γを同定した。このグループは特に、免疫適格性マウスにおいて、内因的に産生されたＩＦＮα／βが、高度に免疫原性であるＭＣＡ肉腫の拒絶に必要であり、又、宿主の造血細胞が、防御的抗腫瘍応答の発現時にＩＦＮα／βの重要な標的であることから、一次発癌物質により誘導された腫瘍の過成長を防止することを立証している。 ヒト抗腫瘍効果：ＩＦＮ類は、臨床実践において重要な役割を果たしている。単独剤としてＩＦＮ−α２の臨床的に有益な治療活性は、多くの疾患において立証されている。これらの発見により、癌患者の生存率を増加させる最初のヒトタンパク質としてＩＦＮ類が是認されている。ＩＦＮ類と他の薬物との併用によって有望な成績及び新規で且つより有効な臨床適用が立証されている。動物モデル及び細胞において他の療法と併用する場合、ＩＦＮ類は、多種多様な組織学の悪性疾患における治療有効性を増大させている。多くの場合、腫瘍の細胞数又はサイズの減少及び生存延長は、相加的又は相乗的効果を有した。 悪性血液学的疾患に対するＩＦＮ類の効果：毛様細胞性白血病（ＨＣＬ）患者の活性度及び生活の質の改善により、ＩＦＮに関しての実施権が米国において最初に承認された。患者の８５％超は、ＩＦＮ−α２に対する部分的又は完全な血液学的応答について客観的証拠を有した（Ｑｕｅｓａｄａ Ｊら、毛様細胞性白血病のアルファインターフェロンによる治療（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈａｉｒｙ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｗｉｔｈ ａｌｐｈａ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ）（１９８５）Ｂｌｏｏｄ １９８６年：４９３〜４９７頁）。 慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）：ＩＦＮ−αの適用により、新規に診断された患者の大部分において重要な治療応答（７５％超）を生じた（Ｋａｎｔａｒｊｉａｎ ＨＭら、慢性骨髄性白血病：簡潔な更新（Ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ：ａ ｃｏｎｃｉｓｅ ｕｐｄａｔｅ）（１９９３）Ｂｌｏｏｄ ８２：６９１〜７０３頁；Ｔａｌｐａｚ Ｍ．、慢性骨髄性白血病の治療におけるインターフェロンの使用（Ｕｓｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）（１９９４）Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２１：３〜７頁）。ＣＭＬにおける最良の結果から、ＩＦＮ−α２による著しい臨床応答及び細胞遺伝学的応答が実証されている（Ｔａｌｐａｚ Ｍ．、慢性骨髄性白血病の治療におけるインターフェロンの使用（Ｕｓｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）（１９９４）Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２１：３〜７頁）。連続処置により、患者のおよそ２５％は、フィラデルフィア（Ｐｈ）染色体の発現喪失により完全な細胞遺伝学的応答を有する。細胞遺伝学的応答の証拠を示す（完全応答ではないが）応答患者の平均生存期間は、およそ６年であり；完全な細胞遺伝学的応答を示す患者の９０％超が、１０年超の寛解を有している。１０年の平均生存では、化学療法と比較してＩＦＮ−α２が有意な有益性を示している（白血病ＴＩＣＳＧｏＣＭ。慢性骨髄性白血病において従来の化学療法に対するインターフェロン−アルファのイタリア臨床試験の長期追跡調査（ｌｅｕｋｅｍｉａ ＴＩＣＳＧｏＣＭ．Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｔａｌｉａｎ ｔｒｉａｌ ｏｆ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ａｌｐｈａ ｖｅｒｓｕｓ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）（１９９８）Ｂｌｏｏｄ ９２：１５４１〜１５４８頁）。Ｐｈ染色体を有する陽性又は陰性血小板増多症に関連する骨髄増殖性機能不全は、ＩＦＮ−α２により調節できる（Ｌｕｄｗｉｇ Ｈ．ら、組換えＩＦＮα−２ｃによる治療：骨髄増殖性疾患における多発性骨髄腫及び血小板増加症（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＩＦＮα−２ｃ：ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ ａｎｄ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｈａｅｍｉａ ｉｎ ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅ）（１９８５）Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ４２（増補１）：１９〜２５頁；Ｔａｌｐａｚ Ｍら、血小板増多症を有する染色体−陰性骨髄増殖性障害の組換えＩＦＮ−α２療法（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＩＦＮ−α２ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｗｉｔｈ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｓｉｓ）（１９８９）Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ ８６：５５４〜５５８頁）。 以前に治療されなかった多発性骨髄腫患者の５０％は、ＩＦＮ−α２による療法に応答している（Ｑｕｅｓａｄａ ＪＲら：転移性乳癌、悪性リンパ腫、及び多発性骨髄腫における組換えＤＮＡ−産生白血球インターフェロン（クローンＡ）の第Ｉ〜ＩＩ相の共同試験（Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ ｐｈａｓｅ Ｉ−ＩＩ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ−ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ（ｃｌｏｎｅ Ａ）ｉｎ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ，ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｌｙｍｐｈｏｍａ，ａｎｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ）（１９８４）Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ ７７：４２７〜４３２頁）。 ＩＦＮ−αは、異なる組織学及びＴ並びにＢ細胞表現型のリンパ腫において治療的役割を有している（Ｂｏｒｄｅｎ ＥＣ．非ホジキンリンパ腫及び多発性骨髄腫に対する革新的治療戦略（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｆｏｒ ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ ａｎｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ）（１９９４）Ｓｅｍ Ｏｎｃｏｌ ２１：１４〜２２頁）。ＩＦＮ−α２は、３カ月から２５カ月の応答により、進行性皮膚Ｔ細胞リンパ腫患者の４５％に活性を示した（Ｂｏｒｄｅｎ ＥＣ．非ホジキンリンパ腫及び多発性骨髄腫に対する革新的治療戦略（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｆｏｒ ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ ａｎｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ）（１９９４）Ｓｅｍ Ｏｎｃｏｌ ２１：１４〜２２頁）。分化不良のＢ細胞のリンパ腫において、４５％超の応答頻度が、ＩＦＮ−α２による処置後に見られた（Ｆｏｏｎ ＫＡら、組換え白血球インターフェロンαによる進行性非ホジキンリンパ腫の治療（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｄｖａｎｃｅｄ ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｗｉｔｈ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ α ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ）．（１９８４）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３１１：１１４８〜１１５２頁；Ｏ’Ｃｏｎｎｅｌｌ Ｍ、Ｃｏｌｇａｎ ＪＰ、Ｏｋｅｎ ＭＭら、組織学的に有利な非ホジキンリンパ腫及び慢性リンパ球性白血病に対する初期療法として組換え白血球Ａインターフェロンの臨床試験（Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ａ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｓ ｉｎｉｔｉａｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａｓ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋａｅｍｉａ）。Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐのパイロット試験（Ａｎ Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ ｐｉｌｏｔ ｓｔｕｄｙ）（１９８６）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ４：１２８〜１３６頁）。 固形腫瘍に対するＩＦＮ類の効果：一定の転移性固形腫瘍の治療において、ＩＦＮ−αは、最良の化学療法剤と同等の応答をもたらした。黒色腫のＩＦＮ−αに対する応答は、２％から２９％の間の範囲で変動する（Ｃｒｅａｇａｎ ＡＮＤら、播種性悪性黒色腫における組換え白血球インターフェロン（ｒＩＦＮ−アルファ−Ａ）の第ＩＩ相試験（Ｐｈａｓｅ ＩＩ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ（ｒＩＦＮ−ａｌｐｈａ−Ａ）ｉｎ ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｅｄ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｌａｎｏｍａ）（１９８４）Ｃａｎｃｅｒ ５４：２８４４〜２８４９頁；Ｒｏｂｉｎｓｏｎ Ｗら、組換えインターフェロンアルファ２による転移性黒色腫の治療（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｍｅｌａｎｏｍａ ｗｉｔｈ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｐｈａ ２）（１９８６）Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ １７２：２７５〜２８２頁）。ＩＦＮ類とホルモン類化学療法及び／又はＩＬ−２との併用では、治療様式としてその組込みは、それらの毒性により限定されたが、転移性黒色腫では応答が増加し、生存を延長できた（Ｌｅｇｈａ ＳＳＲＳら、転移性黒色腫におけるバイオ化学療法の開発及び成績（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｂｉｏ−ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｍｅｌａｎｏｍａ）：ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｘａｓ Ｍ．Ｄ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｓｃｉ Ａｍ；３（増補１）：Ｓ９〜Ｓ１５頁）。 転移性腎癌において、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−α＋ＩＬ−２の併用、ＩＦＮ−α＋ＩＦＮ−γの併用療法が使用されているが、メタ分析の結果により、ＩＦＮ−αで治療を受けた患者は、併用療法で治療された患者よりも、主としてそれらの毒性のため良好な応答を有することが示唆されている（Ｈｅｍｂｅｒｇ Ｍ．ら、転移性黒色腫及び腎細胞癌に対する治療としてのインターフェロン−アルファの有無での措置：無作為試験の総括（Ｒｅｇｉｍｅｎｓ ｗｉｔｈ ｏｒ ｗｉｔｈｏｕｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ａｌｐｈａ ａｓ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｍｅｌａｎｏｍａ ａｎｄ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｔｒｉａｌｓ）（１９９９）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ２２：１４５〜１５４頁）。 自然において調節的役割を果たす有機起源の生物活性物質は、個体自体の固有の潜在的治癒能力の発現に基づく治療機序を有する薬物として作用できる基礎的な活性成分を構成している。このアプローチは、疾患において変化した機能的ホメオスタティックバランスの回復を達成する目的で個体能力を促進するか、解除するか、又は刺激するために用いられるバイオ調節産物及び手法の使用に基づいている。これらの活性成分及び生物学的応答変更因子の合理的な使用には、生理的な機序及び経路により、患者に対して直進的及び漸進的な方法で変化した機能の調和を回復させる目的がある。 状況証拠又は実験的証拠により、治療可能性のある天然物又は抽出源、或いは植物誘導体の使用が示唆される。これらのバイオ医薬品は、業界において治療適用の可能性のある１つ又はいくつかの知られた或いは関連した薬理活性を供するという一般的な特徴を有する天然起源、又は単離成分、濃縮又は半精製物の複雑な混合物である可能性があり、Ｃ−フィコシアニン（Ｃ−Ｐｈｙｃｏ）もこのケースである。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、緑藻類−藍藻類に見られるタンパク質に結合した色素である。Ｃ−Ｐｈｙｃｏモノマー類は、共有結合した少なくとも３つのビリン発色団及び金属錯体の無い鎖状テトラピロールを含有する２つの異なるα及びβタンパク質サブユニットに結合している（Ｄｕｅｒｒｉｎｇ Ｍら、１．６６Ａ分解能における色順応シアノバクテリウム−フレミエラディプロシプロン（Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｅｍｙｅｌｌａ ｄｉｐｌｏｓｉｐｌｏｎ）からの構成的ｃ−フィコシアニンの単離、結晶化、結晶構造解析及び精製（Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ，ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎａｌｉｓｉｓ ａｎｄ ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ ｏｆ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ｃ−ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｉｃａｌｌｙ ａｄａｐｔｉｎｇ Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｅｍｙｅｌｌａ ｄｉｐｌｏｓｉｐｌｏｎ ａｔ １．６６ Ａ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）（１９９１）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ；２１７：５７７〜９２頁）。この補欠分子族団は、藻類質量のおよそ４％を占め、１分子量単位当りおよそ１６の発色団の存在を示す（Ｏｈ Ｅｏｃｈａ Ｃ．、フィコビリン類（Ｐｈｙｃｏｂｉｌｉｎｓ）．Ｌｅｗｉｎ ＲＡ編集者、藻類の生理学及び生化学（Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｌｇａｅ）：ニューコーク：Ａｃａｄｅｍｙ Ｐｒｅｓｓ、１９６２年：４２１〜３５頁）。４つの異なる構造形体：モノマー、トリマー、ヘキサマー及びデカマーがあり（ＭａｃＣｏｌｌ Ｒら、フィコビリタンパク質類（Ｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｓ）Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ：ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、１９８７年：１〜１０頁）、藍藻類−緑藻類中の最も豊富な色素である（藻類乾燥重量の２０％超）（Ｒｉｃｈｍｏｎｄ Ａ．大規模微細藻類培養及び適用（Ｌａｒｇｅ ｓｃａｌｅ ｍｉｃｒｏａｌｇａｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）Ｒｏｕｎｄ Ｃｈａｐｍａｎ編集者、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｐｈｙｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．７巻Ｂｉｏｐｒｅｓ社、１９９０年：８頁）。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏのビリン発色団の化学構造（開鎖テトラピロール）は、ビリルビンと極めて類似している。Ｓｔｏｃｋｅｒら（Ｓｔｏｃｋｅｒ Ｒら、ビリルビンは生理学的に重要である可能性を有する抗酸化剤である（Ｂｉｌｉｒｒｕｂｉｎ ｉｓ ａｎ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｏｆ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ）（１９８７）Ｓｃｉｅｎｃｅ；２３５：１０４３〜６頁）は、全ビリルビン分子に拡大する共鳴安定化を有する中心炭素とラジカルを形成するためにテトラピロール分子のＣ−１０に結合された水素原子に送達するペルオキシドラジカルを除去できることから、ビリルビンは生理学的に重要である可能性を有する抗酸化剤であることを報告した。酸素反応性種（ＯＲＳ）は、炎症、アテローム硬化症、癌、再灌流による損傷を含む医療において多種多様の重要な過程に関与することがよく知られている（Ｋｅｈｒｅｒ ＪＰ．組織損傷及び疾患の媒介物質としてのフリーラジカル（Ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ ａｓ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ）（１９９３）Ｃｒｉｔ Ｒｅｖ Ｔｏｘｉｃｏｌ ２３：２１〜４８頁）。物質がこれらの過程を妨害できる方法の中の１つは、抗酸化剤又はフリーラジカルのスカベンジャーとしての作用を介するものである。 抗酸化効果：Ｃ−Ｐｈｙｃｏの抗酸化性及び抗炎症性に関する最初の報告はＲｏｍａｙらにより行われ（Ｒｏｍａｙ Ｃら、藍藻類−緑藻類由来のＣ−フィコシアニンの抗酸化性及び抗炎症性（Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｃ−ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｆｒｏｍ ｂｌｕｅ−ｇｒｅｅｎ ａｌｇａｅ）（１９９８）Ｉｎｆｌａｍｍ Ｒｅｓ ４７（１）：３６〜４１頁）、「インビトロ」及び「インビボ」での抗酸化剤としてＣ−Ｐｈｙｃｏの可能性を評価した。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、ヒドロキシラジカル（ＩＣ５０＝０．９１ｍｇ／ｍｌ）（ＩＣ５０：過酸化損傷の阻止を５０％誘導する添加物の濃度）及びアルコキシルラジカル（ＩＣ５０＝７６μｇ／ｍｌ）を排除することができ、それぞれこれらのラジカルの特異的スカベンジャーである０．１２５ｍｇ／ｍｌのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）及び０．０３８μｇ／ｍｌのＴｒｏｌｏｘと同様の活性を有する。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは又、肝ミクロソーム脂質過酸化を阻止した（ＩＣ５０＝１２ｍｇ／ｍｌ）（Ｈａｌｌｉｗｅｌｌ Ｂ．生物学的抗酸化剤を特性化する方法（Ｈｏｗ ｔｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ ａ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ）（１９９０）Ｆｒｅｅ ｒａｄ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍ；９：１〜３２頁）。興味深いことに、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの酸素排除活性は、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）よりも丁度３倍低かったことが強調され、Ｃ−ＰｈｙｃｏへのＳＯＤの添加により、その抗酸化能力は変わらないことから、異なる作用機序が示唆された。その抗酸化作用の別の効能は、部位特異的様式でデオキシリボースの損傷を阻止する能力である。デオキシリボースアッセイにおいて、Ｃ−Ｐｈｙｃｏに関して算出された速度定数は、インドメタシン及びイブプロフェンなどのいくつかの非ステロイド系抗炎症剤に関して同じ方法で得られたものと同様であった（１．８×１０１０Ｍ−１Ｓ−１）（Ｐａｒｉｊ Ｎら、非ステロイド系抗炎症剤とヒドロキシルラジカルとの反応に関する速度定数の決定に対するデオキシリボースアッセイにおける線形及び非線形競合プロット（Ｌｉｎｅａｒ ａｎｄ ｎｏｎ ｌｉｎｅａｒ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ ｐｌｏｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｓｅ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔｅ ｃｏｎｓｔａｎｔｓ ｆｏｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎ ｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ ｗｉｔｈ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌｓ）（１９９５）Ｆｒｅｅ Ｒａｄ Ｈｅａｄ；２３：５７１〜９頁）。 同グループは最近、Ｃ−Ｐｈｙｃｏが、非常によく知られている抗酸化剤であるＴｒｏｌｏｘ及びアスコルビン酸と同様の方法で２，２’−アゾビス（２ミジノプラパン）ジヒドロキシクロリド（ＡＡＰＨ）赤血球溶血を阻止することを報告した（Ｒｏｍａｙ Ｃら、フィコシアニンは、ペルオキシルラジカルによる溶解に対してヒト赤血球を抗酸化的に保護する（Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｉｓ ａｎ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｌｙｓｉｓ ｂｙ ｐｅｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌｓ）（２０００）Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ５２：３６７〜３６８頁）。ＩＣ５０値に基づき、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、Ｔｒｏｌｏｘよりも１６倍有効であり、アスコルビン酸よりもおよそ２０倍有効な抗酸化剤であることを立証した。これらの知見は、別の研究によっても確認されており（Ｈｉｒａｔａ Ｔら、スピルリナプラテンシス（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）から調製されたフィコシアノビリンの抗酸化活性（Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｏｂｉｌｉｎ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）（２０００）Ｊ Ａｐｐｌ Ｐｈｙｃｏｌ ４３５〜４３９頁）、フィコシアノビリン（Ｃ−Ｐｈｙｃｏの成分）の抗酸化活性は、アルファトコフェロールよりもモル量において高かったことが立証された。フィコシアノビリンの抗酸化効果は、疎水性系における、又はホスファチジルコリンリポソーム類とのリノール酸メチルの酸化に対して評価された。又、この研究ではスプレー乾燥スピルリナからのＣ−Ｐｈｙｃｏが、新鮮なスピルリナからのＣ−Ｐｈｙｃｏと同様の抗酸化活性を有することが示された。これらの結果により、アポタンパク質成分は乾燥工程中に変性し得ることから、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの抗酸化活性は、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの補欠分子団であるフィコシアノビリンに起因し得ることを示唆している。乾燥Ｃ−Ｐｈｙｃｏが、無処置タンパク質と同様の活性レベルを示すという事実により、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの調製及び使用が商業的に実行可能なものになる。 Ｒｅｄｄｙらの結果（Ｒｅｄｄｙ ＣＭら、スピルリナプラテンシス（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）からのビリタンパク質（ｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎ）であるＣ−フィコシアニンによるシクロオキシゲナーゼ−２の選択的阻害（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｉｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２ ｂｙ Ｃ−ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ，ａ ｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ３：５９９〜６０３頁）によれば、スピルリナプラテンシスからのＣ−Ｐｈｙｃｏは、極めて低いＩＣ５０ＣＯＸ−２／ＩＣ５０ＣＯＸ−１（０．０４）比を有する選択的シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）阻害剤である。興味深いことに、この研究では、ＣＯＸ−２に関してＣ−Ｐｈｙｃｏによって達成された阻害ＩＣ５０値は、非常によく知られているＣＯＸ−２選択的阻害剤であるセレコキシブ（２５５ ＮＭ）及びロフェコキシブ（４０１ ＮＭ）よりもはるかに小さかった（１８０ ＮＭ）ことを示した。フィコシアノビリン及び還元Ｃ−Ｐｈｙｃｏは無効であったことから、ＣＯＸ−２阻害を担っていたのはＣ−Ｐｈｙｃｏアポタンパク質成分であった。文献に報告されたＣ−Ｐｈｙｃｏの抗関節炎性、抗炎症性及び肝保護性は、部分的にＣＯＸ−２選択的阻害性によるが、それらはフリーラジカルを効率的に排除し、脂質過酸化を阻止する能力によるＣ−Ｐｈｙｃｏの同様の効果を排除しないことを、この著者らは示唆している。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏは用量依存様式でルミノール増幅化学発光（ＬＣＬ）を阻止するが、それは恐らく食作用細胞のレスピラトリーバースト時に増加したフリーラジカル（ＯＨ、Ｈ２Ｏ２、ＲＯ）及びペルオキシドを排除する能力によるものと考えられる。しかしながら、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、例えば、活性化食細胞、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ及びミエロペルオキシダーゼにより反応性酸素種の産生に関与する酵素に影響を与えるか、又はアクチベーターの結合若しくはアラキドン酸代謝経路を干渉する他の経路を介してＬＣＬレベルを減じ得ることも可能である。最近、動物炎症モデルにおいて、Ｃ−ＰｈｙｃｏによるロイコトリエンＢ４（ＬＴＢ４）の放出阻害が立証された。 Ｈ２Ｏ２及びＯＨの排除作用の可能性を有する薬剤を同定するために「インビトロ」モデルにおいて、ペルオキシドにより誘導された炎症応答が評価されている。マウスの足に注入されたグルコースオキシダーゼ（ＧＯ）は、内因性グルコースと反応し、ＯＨラジカルの連続産生によりＨ２Ｏ２を生成する；双方とも、組織損傷及び付随する炎症変化の原因となる（Ｓｐｉｌｌｅｒｔ ＣＲら、薬物試験のためのペルオキシド誘導炎症モデル（Ａ ｐｅｒｏｘｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｄｒｕｇ ｔｅｓｔｉｎｇ）（１９８７）２１：２９７〜８頁）。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、マウス足におけるグルコースオキシダーゼ誘導浮腫を減じた。この抗炎症作用は、少なくとも部分的にヒドロキシルラジカルの除去によるものであろう。 Ｈ２Ｏ２により誘導された多くのインビボ損傷は、強力な反応性の酸化剤、主としてＯＨへの変換のためであるというコンセンサスが多く（Ｈａｌｌｉｗｅｌｌ Ｂ．生物学的抗酸化剤を特性化する方法（Ｈｏｗ ｔｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ ａ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ）（１９９０）Ｆｒｅｅ ｒａｄ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍ；９：１〜３２頁）、したがって、恐らくＣ−ＰｈｙｃｏのＯＨ排除作用は、その抗炎症効果にとって重要である。 抗炎症効果：Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、スピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）（ＳＰ）藻類に見られるフィコビリンである。キューバなど、多くの国において微細藻類が栄養サプリメントとして用いられていることを考慮すると、その抗炎症活性に関わる報告があることから（Ｇｏｎｚａｌｅｚ Ｒら、ラットにおける酢酸誘導大腸炎においてフィコシアニン抽出物の抗炎症活性（Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｅｘｔｒａｃｔ ｉｎ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｎ ｒａｔｓ）（１９９９）Ｐｈａｒｍ Ｈｅａｄ ３９；１：５５〜５９頁）、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、重要な炎症因子を有する疾患にも使用できると考えられる。Ｇｏｎｚａｌｅｚらは、潰瘍性大腸炎に見られるいくつかの急性炎症反応を模倣する動物モデルの酢酸誘導大腸炎におけるＣ−Ｐｈｙｃｏ抽出物の効果を評価した（Ｆｒｅｔｔｌａｎｄ ＤＪら、エイコサノイド類及び炎症性腸疾患：治療に関する規制と見通し（Ｅｉｃｏｓａｎｏｉｄｓ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ：ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｙ）（１９９０）Ｐｒｏｓｔ Ｌｅｕｋｏｔｒ Ｅｓｓ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ；４１：２１５〜３３頁）。この試験において最も重要な知見はラットにおけるＣ−Ｐｈｙｃｏは酢酸誘導大腸炎を減少させたことであって、これは、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの抗大腸炎効果の最初の報告であり、その組織学的特徴並びに大腸組織の構造的解析により評価され、ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）活性測定により確認された。この研究において、Ｃ−Ｐｈｙｃｏで処置した大腸炎動物の損傷大腸粘膜において好中球浸潤及びＭＰＯ活性の有意な減少が見られ、このことにより、この病態に対する有益な効果が裏付けられる。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏ抗炎症活性は又、ラット足におけるカラゲーン誘導浮腫及びラットにおけるコットンスペック肉芽腫においても同じ用量範囲で見られた（Ｒｏｍａｙ Ｃｈら、いくつかの炎症動物モデルにおけるフィコシアニンの抗炎症活性に対するさらなる研究（Ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｉｎ ｓｏｍｅ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）（１９９８）Ｉｎｆｌａｍｍ Ｈｅａｄ ４７（８）：３３４〜８頁）。これらの実験的炎症モデル並びに実験的大腸炎において、アラキドン酸の代謝物は重要な役割を果たしている。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、用量依存様式でマウスの耳のアラキドン酸誘導浮腫並びにラット足のカラゲーン誘導浮腫を有意に減少させた。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは又、滅菌コットンスペックがラット腋窩に移植されるコットンスペック亜慢性肉芽腫アッセイにおいて抗炎症活性を示した。Ｃ−Ｐｈｙｃｏの経口投与は、どの試験モデルにおいても有意な抗炎症活性をもたらした。観察された抗炎症活性は、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの酸素排除及び抗酸化活性に起因すると考えられ、アラキドン酸代謝に対するその阻害効果によるものと考えられる。 他の報告では、記述されたその参照の抗酸化作用及び抗炎症作用に由来する化学的誘導肝損傷を防止する上でＣ−Ｐｈｙｃｏの役割が評価されている。（Ｖａｄｉｒａｊａ ＢＢら、Ｃ−フィコシアニンの肝保護効果：ラットにおける四塩化炭素及びＲ−（＋）−プレゴン媒介肝毒性に対する保護（Ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃ−Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ：Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ Ｒ−（＋）−ｐｕｌｅｇｏｎｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ−ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｒａｔｓ）（１９９８）Ｂｉｏｃｈｅｍ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍ ２４９：４２８〜４３１頁）。Ｖａｄｉｒａｊａらは、ラットにおけるＲ−（＋）−プレゴン及びＣＣｌ４誘導肝毒性に対するＣ−Ｐｈｙｃｏの効果を研究した。この研究において、Ｒ−（＋）−プレゴン（２５０ｍｇ／ｋｇ）又はＣＣｌ４（０．６ｍｌ／ｋｇ）の投与１時間から３時間前にＣ−Ｐｈｙｃｏの単一用量（２００ｍｇ／ｋｇ）が、ラットに腹腔内投与され、これらの化学試剤により生じた肝毒性を有意に減少させた。双方の試剤は、フリーラジカルの発生により肝毒性を引き起こすことが示唆されている。 肝保護効果：したがって、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの肝保護効果は、反応性代謝物発生に関与する反応阻害に、また恐らくはそのラジカル除去活性によるものと考えられた。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、反応性代謝物の形成に関与するチトクロームＰ４５０により媒介されるいくつかの反応を阻止する。この場合、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、効率的なラジカル除去剤として作用できる可能性もある。最近、Ｂｈａｔら（Ｂｈａｔ ＶＢら、Ｃ−フィコシアニン：インビボ及びインビトロで強力なペルオキシルラジカルスカベンジャー（Ｃ−ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ：ａ ｐｏｔｅｎｔ ｐｅｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｅｒ ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ）（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｕｎ １：２０〜２５頁）は、Ｃ−Ｐｈｙｃｏが、ラットにおいて「インビボ」でＣＣｌ４により誘導された脂質過酸化を阻止し、この阻止は、１１．３５μＭのＩＣ５０を有して濃度依存的であることを報告した。これらの研究により、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、尿酸（よく知られたペルオキシルラジカル除去剤）の３．５と比較して１．５４の一定速度比を有する強力なペルオキシルラジカル除去剤であることが明瞭に立証されている。 抗酸化剤防御機序の減少及び酸素並びに窒素反応種の増加は、加齢に関連した機能性の減退及び神経変性疾患における原因因子であることが提案されている（Ｈａｒｍａｎ Ｄ．加齢化：フリーラジカル及び放射線化学に基づく理論（Ａｇｉｎｇ：ｔｏ ｔｈｅｏｒｙ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ａｎｄ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）（１９５６）Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ １１：２８９〜３００頁；Ｌｅｉｂｏｖｉｔｚ ＢＥら、生物学系におけるフリーラジカル反応の態様：加齢化（Ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｙｓｔｅｍｓ：ａｇｉｎｇ（１９８０）Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ ３５：４５〜５６頁；Ａｍｅｓ ＢＮら、酸化剤、抗酸化剤、及び加齢化の神経変性疾患（Ｏｘｉｄａｎｔｓ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ ａｇｉｎｇ）（１９９３）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９０：７９１５〜７９２２頁）。炎症過程は中枢神経系（ＳＮＣ）の酸化的損傷に関連することを示唆する証拠が増えている。抗酸化酵素スーパーオキシドジスムターゼの注入により、いくつかの動物モデルの炎症が減少する。抗酸化剤を「インビトロ」で単離免疫細胞に加えるか、又は抗酸化剤を「インビボ」で動物及びヒトにサプリメントとして与える場合、それらは免疫機能の一定のパラメータを増加させる（Ｉａｎ ＳＮら、抗酸化剤、サイトカイン類、及び老齢マウス及び高齢ヒトにおけるインフルエンザ感染（Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ，ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，ａｎｄ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｇｅｄ ｍｉｃｅ ａｎｄ ｅｌｄｅｒｌｙ ｈｕｍａｎｓ）（２０００）Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ １８２：Ｓ７４〜Ｓ８０頁）。可能性として考えられる機序は、サイトカイン類などの免疫調節分子産生に対する抗酸化作用である。サイトカイン類は、脳損傷に応答して誘導され、細胞損傷を媒介し、阻止して再生を有利にし得る。多くの臨床試験により、脳損傷又は梗塞症を有した患者の脳脊髄液（ＣＳＦ）中、又は死後大脳組織中のサイトカイン類の発現増加が報告されている。ＩＬ−１及びＴＮＦなどの炎症誘発性サイトカイン類は、加齢化と共に増加する証拠が示されている（Ｌｙｎｃｈ ＭＡ．海馬における長期強化に関する加齢関連機能障害。サイトカイン、インターロイキン−１βの役割とは何か（Ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｉｎ ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．Ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃｙｔｏｋｉｎｅ，ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１β？）（１９９８）Ｐｒｏｇ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ ５６：５７１〜５８９頁；Ｋｎｏｂｌａｃｈ ＳＭら、実験的脳傷害後の腫瘍壊死因子−αの早期ニューロン発現は、神経学的機能障害に寄与する（Ｅａｒｌｙ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ−α ａｆｔｅｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｂｒａｉｎ ｉｎｊｕｒｙ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ）（１９９９）Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ ９５：１１５〜１２５頁）。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、疎水性系におけるリノール酸メチルの酸化に対して評価されたＳｐに見られる全ての化合物の中で最高抗酸化活性を有する（Ｈｉｒａｔａ Ｔら、スピルリナプラテンシスから調製されたフィコシアノビリンの抗酸化活性（Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｏｂｉｌｉｎ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｆｒｏｍ ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）（２０００）Ｊ Ａｐｐｌ Ｐｈｙｃｏｌ １２：４３５〜４３９頁）。 一研究において（Ｇｅｍｍａ Ｃら、小脳β−アドレナリン機能における加齢誘導減少及び炎症誘発性サイトカインの増加を再検討するための高抗酸化活性を有する食餌に富んだ飼料（Ｄｉｅｔｓ ｅｎｒｉｃｈｅｄ ｉｎ ｆｏｏｄｓ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ｂｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ ａｇｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ ｉｎ ｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ β−ａｄｅｎｅｒｇｉｃ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｉｎ ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ）（２００２）Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２２；１４：６１１４〜６１２２頁）、Ｓｐのみに基づく飼料を用いて１４日間給餌された３４４匹の加齢Ｆｉｓｃｈｅｒラットは、ｂ−アドレナリン受容体機能の改善、炎症誘発性サイトカイン類の減少（ＴＮＦ−α及びＴＮＦ−βのｍＲＮＡレベルの減少により立証されている）、及び小脳における酸化損傷のマーカーであるマロニルジアルデヒドレベル（ＭＤＡ）の減少を示した。等量のキュウリで補足された飼料又は低レベルのＯＲＡＣ（酸素反応性吸収能力）を有する食餌で給餌されたラットにおいて、これらの事象は生じなかった。 神経保護効果：最近の精巧且つ興味深い研究では、ラットにおいてＣ−Ｐｈｙｃｏ（１００ｍｇ／ｋｇ）の経口投与により、膠細胞反応性及びラット海馬におけるカイニン酸により誘導された挙動が防止されることが示され、ニューロンに対する保護効果が示唆されている。この研究は、Ｃ−Ｐｈｙｃｏが実験的てんかん病態を軽減し、ある一定のタイプのてんかん治療における治療的関与の可能性を示唆することを示した。これらの著者（Ｒｉｍｂａｕ Ｖら、ラット海馬におけるカイニン酸誘導ニューロン損傷に対するＣ−フィコシアニンの保護効果（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃ−ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ａｇａｉｎｓｔ ｋａｉｎｉｃ ａｃｉｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｄａｍａｇｅ ｉｎ ｒａｔ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ）（１９９９）Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｅｔｔｅｒｓ；２７６：７５〜７８頁）によれば、カイニン酸は、酸素反応性種の産生を生じるエクサイト毒性を引き起こす。したがって、彼らは、ニューロン損傷におけるＣ−Ｐｈｙｃｏの保護効果が、フリーラジカルの排除及びそれらの抗酸化剤性のためであり得ると推定している。この研究において興味深い特色は、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの経口投与により、血液脳関門を交差する海馬に対して効果を及ぼすという知見である。これらの知見及びＣ−Ｐｈｙｃｏの毒性の事実上の欠如により、この光化学は、酸化的ストレスにより誘導されたニューロン損傷を特徴とするアルツハイマー病及びパーキンソン病などの神経変性疾患の治療に使用し得ることを示唆している。 抗アレルギー効果：既に詳細に言及されたその抗酸化性により媒介されるＣ−Ｐｈｙｃｏの抗炎症性の他にも、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、誘導されたアレルギー性炎症応答及び単離ラット肥満細胞のヒスタミン放出に対する抗炎症性効果を有することが報告されている（Ｒｅｍｉｒｅｚ Ｄら、アレルギー性炎症応答の実験的モデルでのフィコシアニンの阻害効果におけるヒスタミンの役割（Ｒｏｌｅ ｏｆ ｈｉｓｔａｍｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ）（２００２）Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｏｆ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ、１１：８１〜８５頁）。「インビボ」実験において、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、予めオボアルブミン（Ｏｖａ）感作マウスの耳にＯｖａによる誘発１時間前に投与された。１時間後、ＭＰＯ活性及び浮腫が耳において評価された。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、双方のパラメータを有意に減少させ、単離されたラット腹腔肥満胖細胞のヒスタミンの放出を阻害した。Ｃ−Ｐｈｙｃｏの作用は用量依存的である。 血漿タンパク質に対する血管透過性の増加は、ラット及びマウスにおいて、肥満細胞が予備形成された血管作動性伝達物質である主としてヒスタミン及びセロトニンを分泌できるため、それらが重要な役割を果たすアレルギー性炎症反応の特徴の１つである（Ｈａｌｐｅｒｎ ＢＮら、マウスにおけるアナフィラキシー反応に関与する化学伝達物質の性質に関して（Ｏｎ ｔｈｅ ｎａｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ａｎａｐｈｙｌａｃｔｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ）（１９６３）Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ２０：３８９〜３９８頁；Ｏｈｕｃｈｉ Ｋら、ラットにおけるアレルギー性炎症のアナフィラキシー相における血管透過性応答の薬理学的分析（Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ａｎａｐｈｙｌａｃｔｉｃ ｐｈａｓｅ ｏｆ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ）（１９８５）Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １１７：３３７〜３４５頁）。肥満細胞は又、ＩｇＥ依存反応で分泌され得、アレルギー性炎症反応中に肥満細胞エフェクター及び免疫調節能力を生じ得るものの中でも、ＴＮＦ−α及び血管透過性因子／血管内皮細胞成長因子などの予備形成されたサイトカイン類を含有することが立証されている。この反応において、プロスタグランジンＤ２、ロイコトリエン類（ＬＴＣ４、ＬＴＤ４、ＬＴＥ４、ＬＴＢ４）及び血小板活性化因子（ＰＡＦ）などの肥満細胞からの新たに合成された脂質伝達物質、並びに反応性酸素種（ＲＯＳ）の関与も又重要である（Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＣＭら、アレルギー性疾患における肥満細胞の多種多様の潜在的エフェクター及び免疫調節的役割（Ｔｈｅ ｄｉｖｅｒｓｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｍａｓｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ）（２０００）Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １０５：８４７〜８５９頁；Ｆａｎｔｏｚｚｉ Ｒら、肥満細胞と好中球との相互作用：スーパーオキシドアニオン及びヒスタミンに関する役割（Ｍａｓｔ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ａｎｉｏｎ ａｎｄ ｈｉｓｔａｍｉｎｅ）（１９８５）Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎｓ １６：２６０〜２６４頁）。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、マウスの耳におけるアラキドン酸誘導炎症アッセイにおいてプロスタグランジンＤ２レベル及びＬＴＢ４を減少させる（Ｒｏｍａｙ Ｃら、マウス耳の炎症試験におけるプロスタグランジンＥ２レベルに対するフィコシアニン抽出物の効果（Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｎ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ Ｍｏｕｓｅ ｅａｒｓ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ）（２０００）Ａｒｚｎｅｉｍ Ｆｏｒｓｃｈ／Ｄｒｕｇ Ｈｅａｄ ５０：１１０６〜１１０９頁；Ｒｏｍａｙ Ｃら、アラキドン酸誘導マウス耳の炎症試験において、フィコシアニン抽出物はロイコトリエンＢ４レベルを減少させる（Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｅｘｔｒａｃｔ ｒｅｄｕｃｅｓ ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓ Ｂ４ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｍｏｕｓｅ ｅａｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ）（１９９９）Ｊ Ｐｈａｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ５１：６４１〜６４２頁）。 単離ラット肥満細胞のヒスタミン放出に対するＣ−Ｐｈｙｃｏの阻害効果は、抗炎症剤としてのＣ−Ｐｈｙｃｏの作用機序におけるこの事象の寄与を裏付けている。 スーパーオキシドアニオン類、過酸化水素、及びペルオキシルヒドロキシルラジカル類などのＲＯＳは、アラキドン酸カスケード、ＰＡＦ合成又はヒスタミン放出を開始できる証拠がある。ＲＯＳ脱顆粒肥満細胞は、ヒスタミン、セロトニン、ＴＮＦ−α及び他の炎症伝達物質を放出させることが立証されている。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、ペルオキシド、ヒドロキシル及びアルコキシルラジカルを除去することができる（Ｌｉｓｓｉ ＥＡら、ペルオキシルラジカルによるフィコシアニンビリン群破壊の速度論（Ｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｂｉｌｉｎ ｇｒｏｕｐｓ ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｐｅｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌｓ）（２０００）Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ ２８：１０５１〜１０５５頁）。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏに関して示された抗酸化性、抗炎症性及び抗アレルギー性の他にも、抗腫瘍性も又観察されている。 抗癌効果：Ｓｃｈｗａｒｔｚらは（Ｓｃｈｗａｒｔｚ Ｊら、ベータカロテン及び藻類抽出物により実験的ハムスター癌の退縮（Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｈａｍｓｔｅｒ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ｂｅｔａ ｃａｒｏｔｅｎｅ ａｎｄ ａｌｇａｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ）（１９８７）Ｏｒａｌ Ｊ Ｍａｘｉｌｌｏｆａｃ Ｓｕｒｇ；４５：５１０〜５１５頁）、ＤＭＢＡ（７，１２−ジメチルベンズ（ベンザ）−アントラシン）により誘導された口腔扁平上皮癌において２５０μｇのスピルリナ抽出物の投与効果を調査し、他の処置は、ベータカロテン類、カンタキサンチン及び１３シス−レチノイン酸の注射を含んだ。全ての処置は、４週間に亘り週２回適用した。処置の終わりに、藻類抽出物で処置された動物の３０％、ベータカロテン類で処置された動物の２０％、及びカンタキサンチンで処置された動物の１５％に完全退縮があった。藻類抽出物で処置された動物の残りの７０％は部分的腫瘍退縮であった。この研究において興味深い観察事項は、藻類抽出物がベータカロテン単独よりも有効であることであり、藻類のいくつかの成分との相乗効果を示唆した。この同じグループの別の研究において（Ｓｃｈｗａｒｔｚ Ｊら、藻類由来のフィコシアニンは、口腔扁平上皮癌（ヒト又はハムスター）に対する細胞増殖抑制及び細胞毒性の双方である（Ａｌｇａｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｉｓ ｂｏｔｈ ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ ａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ｔｏ ｏｒａｌ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ｈｕｍａｎ ｏｒ ｈａｍｓｔｅｒ））（１９８７）．Ｊ Ｄｅｎｔ Ｈｅａｄ ６６：１６０頁）、彼らは、藻類由来のＣ−Ｐｈｙｃｏが、扁平上皮癌（ヒト及びハムスターにおいて）に対する細胞増殖抑制及び細胞毒性能力を有することを立証した。 一研究において（Ｌｉｕ ＡＮＤら、ヒト白血病Ｋ５６２細胞の増殖に対するスピルリナプラテンシスからのフィコシアニンの阻害効果（Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｋ５６２ ｃｅｌｌｓ）（２０００）Ｊ Ａｐｐｌ Ｐｈｙｃｏｌ １２：１２５〜１３０頁）、スピルリナプラテンシスからのＣ−Ｐｈｙｃｏは、ヒト白血病Ｋ５６２細胞系の増殖を阻害した。Ｃ−Ｐｈｙｃｏの効果は最初、２０、４０、８０及び１６９ｍｇ−１の濃度で半固体寒天培養におけるＫ５６２細胞の増殖後に調べた。この結果から、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、８０及び１６０ｍｇ−１で見られた統計的に有意な阻害により用量依存様式でＫ５６２白血病細胞の増殖を阻害することを示した。Ｃ−Ｐｈｙｃｏの効果は、還元染色ＸＴＴアッセイにおいて細胞生存度を用いても調べた。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、用量依存様式で細胞生存度を再度阻害した。Ｃ−ＰｈｙｃｏのＩＣ５０値は、７２．５ｍｇ−１であった。ＤＮＡ含量の分析に基づくフローサイトメトリー実験により、細胞を６日間Ｃ−Ｐｈｙｃｏとインキュベートした場合、Ｋ５６２細胞の蓄積はＧ−１期に生じることが判明した。Ｇ−１期における最高パーセンテージの細胞は、４０及び８０ｍｇ−１濃度のＣ−Ｐｈｙｃｏの場合であった。ＤＮＡ断片化分析では、典型的なアポトーシスステッピングパターンを示さず、異なる機序がこの阻害に関与している可能性を示した。 以前の調査で、Ｃ−ＦｉｃｏによるＣＯＸ−２の選択的阻害が報告されており（Ｒｅｄｄｙ ＣＭら、スピルリナプラテンシスからのビリタンパク質であるＣ−フィコシアニンによるシクロオキシゲナーゼ−２の選択的阻害（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｉｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２ ｂｙ Ｃ−ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ，ａ ｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ３：５９９〜６０３頁）、この調査及びこの性質に基づいて、グループ（Ｂｏｂｂｉｌｉ Ｖ．Ｖら、ＡＫ−５腫瘍細胞におけるフィコシアニン媒介アポトーシスは、Ｂｃｌ−２のダウンレギュレーション及びＲＯＳの産生を含む（Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ＡＫ−５ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎｖｏｌｖｅｓ ｄｏｗｎ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｃｌ−２ ａｎｄ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＲＯＳ）（２００３）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ ２：１１６５〜１１７０頁）は、組織球性ラット腫瘍細胞系に及ぼすＣ−Ｐｈｙｃｏの効果を調べた。アポトーシスが抗腫瘍効果を媒介しなかった以前の調査結果と異なり、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、ＡＫ−５細胞のプログラム化アポトーシス死を誘導した。このプログラムはカスパーゼ−３活性化を含む。Ｃ−Ｐｈｙｃｏにより媒介されたアポトーシス死は、ＲＯＳの産生により誘導される。アポトーシス阻害剤であるＢｃｌ−２は、ＲＯＳ産生を調節した。Ｂｃｌ−２遺伝子を形質移入されたＡＫ−５細胞は、Ｃ−Ｐｈｙｃｏにより誘導されたその死に対して抵抗性になった。Ｂｃｌ−２の過剰発現はＣ−Ｐｈｙｃｏで処理されたＡＫ−５細胞におけるＲＯＳ産生を阻害したが、このことは、ＡＫ−５細胞においてＣ−Ｐｈｙｃｏにより誘導されたアポトーシスがフリーラジカル産生の調節を介してＢｃｌ−２により阻害されることを立証している。Ｃ−Ｐｈｙｃｏ並びにＣＯＸ−２の他の阻害剤は、腫瘍細胞に対するそのアポトーシス活性のために可能性のある化学療法剤として使用できるであろう。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏの抗癌性に関する最も最近の調査は、ヒト慢性骨髄性白血病細胞系Ｋ５６２の増殖及び増倍に対して高度に精製されたＣ−Ｐｈｙｃｏの効果を評価したＳｕｂｈａｓｈｉｎｉらにより報告された（Ｊａｇｕ Ｓｕｂｈａｓｈｉｎｉら、Ｃ−フィコシアニンの分子機序により、ヒト慢性骨髄性白血病細胞系−Ｋ５６２におけるアポトーシスが誘導された（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｉｎ Ｃ−Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ−Ｋ５６２）（２００４）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍａｃ ６８：４５３〜４６２頁）。この結果は、５０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏで４８時間処理されたＫ５６２細胞の増殖において有意な減少（４９％）を示している。又、電子顕微鏡及び蛍光調査により、細胞退縮、膜隆起及び核縮合などアポトーシスの特徴が明らかにされた。Ｃ−Ｐｈｙｃｏで処理された細胞のゲノムＤＮＡ電気泳動は、アポトーシス細胞断片化の典型的なパターンを示した。２５及び５０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏによる４８時間のアポトーシス細胞のフローサイトメトリー分析では、サブＧ０／Ｇ１期においてそれぞれ１４．１１％及び２０．９３％の細胞が示された。Ｋ５６２細胞のＣ−Ｐｈｙｃｏによる処理は又、細胞質ゾルに対するチトクロームＣの放出及びポリ（ＡＤＰ）リボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の破壊を生じた。又、この調査では、抗アポトーシスＢｃｌ−２の減少が示されたが、前アポトーシスＢａｘにおける変化はなく、したがってＢｃｌ−２／Ｂａｘ比はアポトーシスに有利である。Ｃ−Ｐｈｙｃｏの効果は、未知の機序を介する細胞質ゾルへのＣ−Ｐｈｙｃｏの流入により媒介されると思われる。又、Ｃ−Ｐｈｙｃｏが、ミトコンドリアから細胞質ゾルに放出されたチトクロームＣ、ＰＡＲＰの破壊及びＢｃｌ−２の減少を介してＫ５６２のアポトーシスを誘導することも本調査により立証されている。 日本国特許（Ｄａｉｎｉｐｐｏｎ Ｉｎｋ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ社（ＤＩＣ）．フィコビリンを含有する抗腫瘍剤（Ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒａｌ ａｇｅｎｔｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｈｙｃｏｂｉｌｌｉｎ）（１９８３）特開昭５８−６５２１６号）によれば、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの経口投与により、肝臓からの腫瘍細胞を注入されたマウスの生存度が増加した。処理群におけるリンパ球活性は、対照群よりも有意に高く、免疫系の一定程度の刺激を示唆した。 種々の調査において示されたＣ−Ｐｈｙｃｏの他の性質：Ｃｈｅｎｇ−Ｗｕら（Ｃｈｅｎｇ−ｗｕ Ｚら、マウスの末梢血及び骨髄の造血系に及ぼすスピルリナプラテンシスの多糖類及びフィコシアニンの効果（Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ ｏｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ａｎｄ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｉｎ ｍｉｃｅ）（１９９４）Ｂｏｏｋ ｏｆ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ．Ｓｅｃｏｎｄ Ａｓｉａ Ｐａｃｉｆｉｃ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ａｌｇａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；５８頁）、マウスの末梢血及び造血系の骨髄における多糖類及びＣ−Ｐｈｙｃｏの効果についての予備的調査において、Ｃ−Ｐｈｙｃｏが高いエリトロポイエチン（ＥＰＯ）様活性を有することが立証された。 本発明は、疾患により変化したホメオスタティック機能不均衡の回復を達成するために、罹患者の能力の促進、解放又は回復を扱うバイオレギュレーター医薬化合物の使用を記載する。 この化合物は、本発明において自己免疫疾患及びアレルギー性疾患、並びに癌の治療に有効性を実証した、天然起源の産物と組合わされるインターフェロンファミリーに属するタンパク質によって形成されることから、その処方において独創的である。 本発明に記述された化合物は、アルファインターフェロン（ＩＮＦ−α）、特に組換えＩＮＦα−２ｂと、Ｃ−フィコシアニンとを含み、これらは、適切な賦形剤との非経口又は経口投与のために薬学的に組合せて含ませることができる。 上記の薬学的組合せは、単一治療のために同じ個体において活性成分の別個の投与による治療法として使用できる。 実験的自己免疫脳炎（ＥＡＥ）モデルにおける特定の試験において、この組合せの成分は、種々の経路を経て投与された。ＩＮＦ−αは腹腔内に投与され、Ｃ−フィコシアニンは同じ治療の一部として経口投与された。同じ投与量を用いて異なる経路を介して成分を別個に投与した場合と、単一経路を介して製剤の一部として投与した場合では有意差を示さなかった。これにより、投与経路による影響はなく、この組合せは、筋肉内、静脈内、皮下、経口、経鼻及び鞘内経路を介してもまた投与できることが示された。 本発明の独創性は、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ製剤の効果の立証、並びに適応性及びナチュラル調節Ｔ細胞の誘導におけるそれらの別個の活性原理である。 免疫系の重要な性質は、ＩＦＮ−αに関しては既に示唆されているが、我々の発明においては、それをＩＦＮ−αに関して示す他に、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ医薬化合物における双方の成分の相乗効果を示す、Ｃ−フィコシアニンによる調節性Ｔ細胞の誘導を初めて報告する。これによって、アレルギー性疾患及び自己免疫疾患など、調節Ｔ細胞（ｒＴｃ）の数又は機能の低下を生じる疾患において、発症の発現、特にこれらの疾患の再発形態での発現を防止する場合でのその使用が裏付けられる。 かくして、本発明により、免疫調節の喪失のためにアレルギー性疾患及び自己免疫疾患で破壊されるエフェクター−レギュレーター均衡を回復させると同時に、これらの疾患の病因の異なる段階で同時に介入することができ、ＩＦＮ−α及びＣ−フィコシアニンに関して文献に記載された抗炎症免疫調節性及び抗酸化性が、双方の活性成分の組合せにより増強される。 一方、本発明は、抗増殖性、抗酸化性及び抗炎症性に関し、且つ腫瘍細胞のアポトーシスの誘導能力において、個別の成分の活性と比較してＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ製剤の相乗効果を立証している。 この場合における本発明の新規性は、当該医薬化合物が、腫瘍細胞における抗増殖性及びアポトーシス誘導性に関して個別成分よりも有意に高い抗癌効果を有することが示されたことにある。これは、Ｇ２／Ｍ期の細胞周期の停止及びＤＮＡ損傷後のアポトーシスを維持するために必要なｐ５３タンパク質及び後期のｐ２１の正の調節により立証されている。 さらに、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ化合物の統計的に有意な相乗的抗増殖及び用量依存効果は、異なる起源の腫瘍系の増殖阻害に関して示された。 Ｃ−Ｐｈｙｃｏの最も広く調査された効果のうちの１つは、インビトロ及びインビボ試験における抗酸化能力である（Ｒｏｍａｙ Ｃら、藍藻由来のＣ−フィコシアニンの抗酸化性及び抗炎症性（Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｃ−Ｐｈｙｃｏｃｙｎｉｎ ｆｒｏｍ ｂｌｕｅ−ｇｒｅｅｎ ａｌｇａｅ）（１９９８）Ｉｎｆｌａｍｍ Ｈｅａｄ ４７（１）：３６〜４１頁）。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、ヒドロキシル及びアルコキシルラジカルに特異的に用いられる他のものと同じスカベンジャー活性によりこれらのラジカルを排除することができた。Ｃ−Ｐｈｙｃｏは又、肝ミクロソーム脂質過酸化を阻害した（Ｈａｌｌｉｗｅｌｌ Ｂ．生物学的抗酸化剤を特性化する方法（Ｈｏｗ ｔｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ ａ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ）（１９９０）Ｆｒｅｅ ｒａｄ Ｈｅａｄ Ｃｏｍｍ；９：１〜３２頁）。Ｃ−Ｐｈｙｃｏの腫瘍細胞における抗炎症性、免疫調節及び抗増殖効果並びにアポトーシス誘導能力は、主としてその強力な抗酸化活性により媒介されると考えられている。このことは、大部分の新生物形成過程が、慢性炎症成分及び著しい酸化的ストレスを発現する他の要素を有することからＣ−Ｐｈｙｃｏの抗癌効果を説明できる。 これらは、新生物の増殖及び発生において細胞周期の調節及びアポトーシスの仕組みがいかに重要であるかを理解するための重要な一面である。これらのシグナル伝達ポイントは、細胞損傷が修復されなければプログラム化細胞死に導く経路の活性化にとって代わられる（Ｐｉｅｔｅｎｐｏｌ ＪＡ、Ｓｔｅｗａｒｔ ＺＡ．細胞周期チェックポイントのシグナル伝達：細胞周期停止対アポトーシス（Ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ｖｅｒｓｕｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）（２００２）Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ １８１〜１８２：４７５〜４８１頁）。 腫瘍細胞に対するＩＦＮ−αの抗増殖効果及びアポトーシス誘導効果は極めてよく知られている。それらは、Ｇ１期の延長、Ｓ期へのエントリー速度の減少並びにＳ期及びＧ２期の減速を生じる（Ｂａｌｋｗｉｌｌ Ｆら、インターフェロンは、静止状態から増殖へと刺激される細胞のＧ１及びＳ＋Ｇ２の双方に影響を及ぼす（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｆｆｅｃｔｓ ｂｏｔｈ Ｇ１ ａｎｄ Ｓ＋Ｇ２ ｉｎ ｃｅｌｌｓ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｑｕｉｅｓｃｅｎｃｅ ｔｏ ｇｒｏｗｔｈ）（１９７８）Ｎａｔｕｒｅ ２７４：７９８〜８００頁）。正常細胞並びに腫瘍細胞においてＩＦＮ−αによる細胞周期の延長の累積効果によって、細胞分裂静止、細胞サイズ及びアポトーシスの増加に至る（Ｏｔｓｕｋｉ Ｔら、インターフェロン−αにより誘導されたヒト骨髄細胞アポトーシス（Ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｍａ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−α）（１９９８）ＢＲ Ｊ ＨＡＥＭＡＴＯＬ １０３：５１８〜５２９頁）。 腫瘍細胞は、細胞周期の進行を調節する１種又は複数のタンパク質において変性を発生させ、それらの中にはＩＦＮにより調節されるｂｃｌ２などの癌原遺伝子を見ることができる（Ｋｏｓｈｉｊｉ Ｍら、Ｂｃｌ−２発現のダウンレギュレーションから生じる腫瘍壊死因子−アルファ及び／又はインターフェロン−ガンマにより結腸直腸腺癌（ＣＯＬＯ２０１）のアポトーシス（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＣＯＬＯ２０１）ｂｙ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ ａｎｄ／ｏｒ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｇａｍｍａ ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ｆｒｏｍ ｄｏｗｎ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｃｌ−２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）（１９９８）Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ １１１：２１１〜２１８頁）。我々の発明の特定例において、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ組合せにより刺激した場合、相乗的且つ用量依存効果が、腫瘍細胞に対してｂｃｌ２の負の調節で示された。 アポトーシス誘導に対する経路の中の１つは、ＦａｓＬに対するＦａｓの結合を含み、その結合によりＦＡＤＤ死因ドメインを含有するタンパク質の動員及びその後のカスパーゼ−８などのカスパーゼ類の活性化を生じる。ＩＦＮ−αは、Ｆａｓの発現を正に調節する。したがって我々の発明の別の特定例で実証されるようにＦａｓにより媒介されるアポトーシス経路を操作でき、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ医薬化合物は、腫瘍細胞におけるＦａｓの発現の正の重要な調節を生じさせることも示された。 ＣＯＸ−２は、よく知られた抗アポトーシス分子であり、Ｃ−Ｐｈｙｃｏは、ＣＯＸ−２の選択的阻害剤であり、したがって腫瘍細胞のプログラム化細胞死に都合がよいことが報告されている（Ｒｅｄｄｙ ＣＭら、スピルリナプラテンシスからビリタンパク質にＣ−フィコシアニンによりシクロオキシゲナーゼ−２の選択的阻害（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｉｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２ ｂｙ Ｃ−Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ，ｔｏ ｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｈｅａｄ Ｃｏｍｍｕｎ ３：５９９〜６０３頁）。本発明では、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ化合物が、用量依存的にＣＯＸ−２の発現レベルを有意に減少させることも実証され、記載された組合せに関して腫瘍細胞に対するアポトーシス誘導効果を説明できる可能性のある機序を示している。 Ｓｕｂｈａｓｈｉｎｉらにより実施された調査（Ｊａｇｕ Ｓｕｂｈａｓｈｉｎｉら、ヒト慢性骨髄性白血病細胞系−Ｋ５６２におけるＣ−フィコシアニン誘導アポトーシスの分子機構（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｉｎ Ｃ−Ｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ−Ｋ５６２）（２００４）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍａｃ ６８：４５３〜４６２頁）は、ミトコンドリアから細胞質ゾルへＣ−Ｐｈｙｔｏの放出及びｂｃｌ−２の減少により、Ｃ−ＰｈｙｔｏがＫ５６２細胞系においてアポトーシスを誘導することを示した。本発明においては、上記の医薬化合物がチトクローム−Ｃ発現の誘導レベルにおいてその個別の成分と比較して正の相乗効果を有し、したがってこれがこの化合物により生じた腫瘍細胞のアポトーシス誘導に関する機序とみなされることが示されている。 臨床実施において、ＩＦＮ−αとホルモン類、化学療法及び／又はＩＬ−２との併用により、多くのタイプの腫瘍に対する患者の応答及び生存度の延長を増加させることができるが、治療法の集積は、それぞれの毒性のため限界があることが実証されている。したがって、我々は、抗増殖、細胞毒性及び抗酸化効果並びに腫瘍細胞におけるアポトーシス誘導において双方の成分の相乗効果を生じ、それによって臨床結果を正当化できるばかりでなく、Ｃ−Ｐｈｙｃｏの無害性及び毒性の欠如に対して多数の証拠があることに基づき、本発明に記載された医薬化合物の使用を提案する。（実施例１）ＥＡＥのモデルにおけるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用及び別個の活性成分の治療効果 ＥＡＥのバイオモデルにおいてＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用を、その治療効果を評価するために試験した。 １３０ｇの平均生体体重を有するメスルイスラットは、ＰＢＳ中（５０％）５ｍｇのモルモット脊髄ホモジネート及びフロイント完全アジュバント（５０％）を用いて皮下に０日目と６日目とに免疫化した。治療スケジュールは、腹腔内経路を介して、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用（２００ｎｇ／ｋｇ／日−７４０ｎｇ／ｋｇ／日）、別個の活性成分のＩＦＮ−α（２００ｎｇ／ｋｇ／日）及びＣ−Ｐｈｙｃｏ（２００ｎｇ／ｋｇ／日）、及びプラセボ（ＰＢＳ）を用いることにより最初の免疫化の１０日後に開始した。それを、以下の臨床指標：０；変化なし、１；尾の完全麻痺、２；後肢の片方の麻痺、３；片側骨盤の完全麻痺、４；片側骨盤の完全麻痺及び肩甲胸部間の麻痺、５；死亡、に従って疾患の臨床的進展の評価を１０日間モニターした。体重減少及び膀胱又は直腸括約筋の失調もまた、動物における疾患の臨床的徴候であるので、上記の臨床指標に０．５を加算することにより評価された。最初の免疫化４０日後に、動物を麻酔にかけて屠殺し、各動物の脳及び脊髄を、組織病理学的分析のために処理した（１０％ホルマリンの固定、Ｈ＆Ｅ及びルクソール青染色）。考慮された組織病理学的診断基準は、血管周囲の炎症浸潤巣の数及びサイズ、脱髄性病巣、ニューロン又は膠細胞のアポトーシス及びアストロサイトの反応性であった。全ての観察は盲検で実施された。 表１に示されるように、これらの動物の５０％だけが、最弱形態でＥＡＥを発現し、残りは罹患しなかったことから、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用は、この疾患を発現するように誘発された実験動物を保護する。このことは、この疾患の発生率が１００％であった残りの群（別個の活性成分及びプラセボで処置された群）についてはそうでなかった。ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用で処置された群の臨床指標の平均値は、０．３７±０．４７であり、別個の活性成分で処置された群は、ＩＦＮ−αに関して１．３７±１．７であり、Ｃ−Ｐｈｙｃｏに関して１．５±１．６であり、プラセボで処置された群は１．７±１．４である。１群につき８匹のラットを用い、比較は、ｐ＜０．００１でＮｅｗｍａｎ Ｋｅｕｌｓの多重比較検定に従って実施された。表１．ＥＡＥを発現するように誘発されたラットにおけるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用及びそれらの別個の活性成分の臨床的治療効果 表２に見られるように、種々の群からの動物の脳及び脊髄の病理学解剖試験の結果により、星状細胞の反応性は同じであるが、血管周囲の炎症浸潤巣の数及びサイズは、プラセボを投与されたものよりも該医薬化合物により治療的に処置された群においてより小さいことが示されている（独立サンプルＴ検定でｐ＝０．０２８）。表２．ＥＡＥを発生するように誘発されたラットの脳及び脊髄における血管周囲の炎症浸潤巣に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果及びそれらの別個の活性成分効果 この実験により、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用は、より重症の臨床形態での疾患の発現から動物を保護することが示されている。（実施例２）種々の投与経路を用いてＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用治療効果 成分に関して種々の投与経路を用いてＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果を評価するために、１３０ｇの平均体重を有するメスルイスラットを、ＰＢＳ中（５０％）５ｍｇのモルモット脊髄ホモジネート及びフロイント完全アジュバント（５０％）を用いて皮下に０日目と６日目とに免疫化した。治療スケジュールを、以下のとおり最初の免疫化１０日後に開始した：Ｉ群：腹腔内に投与されたＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用（２００ｎｇ／ｋｇ／日−７４００μｇ／ｋｇ／日）、ＩＩ群：ＩＦＮ−α（２００ｎｇ／ｋｇ／日）が腹腔内に、又胃内挿管を介してＣ−Ｐｈｙｃｏ（７４００μｇ／ｋｇ／日）が経口的に投与されるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用、及びＩＩＩ群：プラセボ。この治療スケジュールを、１０日間続けた。臨床評価は先の実施例に説明されたとおり実施した。 結果を表３に示す。それぞれ腹腔内又は腹腔内／経口経路によるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用は、ＥＡＥを発現するように誘発された実験動物を保護する。双方の場合において、動物の１００％が罹患したプラセボ群と比較して４０％の動物だけが疾患を発生した。ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用で腹腔内で処置された群の臨床指標の平均値は、０．３７±０．１７であり、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用で経口的に処置された群に関しては、０．３５±０．１１であり、プラセボ群に関しては１．７±１．４であった。１群につき８匹のラットを用いた。群間の比較は、ｐ＜０．００１で統計的に有意であった。Ｎｅｗｍａｎ Ｋｅｕｌｓの多重比較検定を用いた。表３．ＥＡＥを発現するように誘発されたラットにおける種々の投与経路に関するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用による臨床的治療効果（実施例３）ＭＳ患者の単核細胞におけるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用及びその別個の活性成分に関するナチュラル及び適応性ｒＴｃ作用誘発の評価 ＭＳ患者においてＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用並びにその別個の活性成分のｒＴｃ作用の誘発を評価するために、２０ｍｌの末梢血を、核磁気共鳴（ＮＭＲ）により臨床的に規定された１０人の再発−寛解ＭＳ患者及び１０人の対照（明らかに健常な個人）から採血し、単核細胞をＦｉｃｏｌｌ勾配（Ｓｅｒｏｔｅｃ−Ｂｉｏｃｈｅｍ、ベルリン、独国）により単離し、ＲＰＭＩ １６４０培地中３×１０６細胞／群の４つの実験群に分け、その群を以下のとおり処置した：Ａ）細胞単独、Ｂ）細胞＋５μＭのＩＦＮ−ａ２ｂ、Ｃ）細胞＋２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、Ｄ）細胞＋５μＭのＩＦＮ−２ａｂ／２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、を３７℃で５％ＣＯ２中４時間。その後、細胞を洗浄し、全ＲＮＡ抽出をトリ試薬法（Ｃｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉ Ｐ．、細胞及び組織サンプルからＲＮＡ、ＤＮＡ及びタンパク質のセールステップ同時単離用ＴＯ試薬（ＴＯ ｒｅａｇｅｎｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓａｉｌ−ｓｔｅｐ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＲＮＡ，ＤＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｆｒｏｍ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｓａｍｐｌｅｓ．（１９９３）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、１５、５３２〜５３７頁）により行った。逆転写−ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）（キットＲＴ−ＰＣＲコアＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）が、１μｇの全ＲＮＡ／実験群を用いて実施された。ＲＴ反応を２０μｌの全容量で実施し、次にこれを各１０μｌの２つのＰＣＲ反応物に分けた。反応物のプライマーはナチュラル及び適応性ｒＴｃのマーカー増幅に用いられた。使用されたオリゴヌクレオチド類は、参照としてＮａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）のデータベース配列を用いて設計され、それらを下記に説明する。 ＣＤ２５：６１８位から６３７位までの２０塩基対（ｂｐ）のオリゴ５’−配列。１０５３位から１０７２位までの２０塩基対（ｂｐ）のオリゴ３’−配列、それらは、登録番号ＮＭ＿０００４１７を有する配列の４５４ｂｐバンドを増幅する。 Ｆｏｘｐ３：４８２位から５０１位までの２０ｂｐのオリゴ５’−配列。７６２位から７８１位までの２０ｂｐのオリゴ３’−配列、それらは、登録番号ＮＭ＿０１４００９を有する配列の２９９ｂｐバンドを増幅する。 ＩＬ−１０：３５８位から３７７位までの２０ｂｐのオリゴ５’−配列。６８７位から７０９位までの２２ｂｐのオリゴ３’−配列、それらは、登録番号ＮＭ＿０００５７２を有する配列の３５１ｂｐバンドを増幅する。 ＴＧＦ−β：１２０９位から１２２７位までの１９ｂｐのオリゴ５’−配列。１５６４位から１５８２位までの１９ｂｐのオリゴ３’−配列、それらは、登録番号ＮＭ＿０００６６０を有する配列の３７３ｂｐバンドを増幅する。 ＧＡＰＤＨ：３８６位から４０３位までの１８ｂｐのオリゴ５’−配列。５６１位から５８０位までの２０ｂｐのオリゴ３’−配列、それらは、登録番号ＮＭ＿００２０４６を有する配列の１６４ｂｐバンドを増幅する。 ＰＣＲ産物が操作された２％アガロースゲルのデンシトメトリーからＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアにより得られた相対値を正規化するために、構成的発現の遺伝子としてＧＡＰＤＨを使用した。 この結果は、ＧＡＰＤＨで正規化されたＲＮＡの相対値の（変数の分布による）平均値又は中央値として表され；この平均値又は中央値は、細胞単独による対照群と比較して処置された３つの実験群と比較され、対応する統計的ｐ値は患者と対照とで算出された。図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ及び１Ｄに示されるように、細胞が別個の活性成分及びその併用で処理される場合に見られるそれらのマーカーの増加によって表されるｒＴｃ誘発作用があり、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用で処置後、ＣＤ２５に関してはｐ＝０．０２３の値（ペアードｔ検定）（Ａ）、Ｆｏｘｐ３に関してはｐ＝０．０３７の値（ペアードｔ検定）（Ｂ）、ＩＬ−１０に関してはｐ＝０．０１５の値（ペアードｔ検定）（Ｃ）、及びＴＧＦ−βに関してはｐ＝０．０２５の値（ウィルコクソン）（Ｄ）、で統計的に有意差を示している。このことにより、患者及び対照の双方においてｒＴｃ誘発に関してＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用に相乗効果があることを示している。 ＣＤ２５及びＦｏｘｐ３遺伝子に関して統計的に有意な増加を示すほかに、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用で処置された細胞は、ｐ＝０．０２２の値により統計的に有意であったＣＤ２５／Ｆｏｘｐ３の関係に関して正の線形相関を示し、それらは調節Ｔ細胞且つ非活性化Ｔ細胞であることを示した（図２を参照）。 ＣＤ４＋ ＣＤ２５＋細胞の誘発は又、ＲＲＭＳ患者及び対照からの末梢血の単核細胞においてフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）により示された。これらの実験に関しては、１０５細胞／ウェルを、９６ウェルの細胞培養プレート（ＣＯＳＴＡＲ）中、１実験群当り二重反復試験でインキュベートした。実験群は：Ａ）細胞単独、Ｂ）細胞＋５μＭのＩＦＮ−ａ２ｂ、Ｃ）細胞＋２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、Ｄ）細胞＋５μＭのＩＦＮ−ａ２ｂ／２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、を含んだ。細胞を３７℃で５％ＣＯ２中７２時間処理した。その後、細胞を洗浄し、抗ＣＤ４−ＰＥ（Ｓｅｒｏｔｅｃ）及び抗ＣＤ２５−Ｃｙ５（Ｓｅｒｏｔｅｃ）抗体と共にインキュベートしてから、ＦＡＣＳ上で読取りを行った。 この結果では、別個の成分に関してＣＤ４＋ ＣＤ２５＋及びＣＤ４＋ ＣＤ２５ｈｉｇｈ細胞の誘発効果を示し、患者及び対照（本発明において示された結果は３人の患者及び３人の対照を表す）において、その効果はＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用に関してさらにより高かった。ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の誘発効果は、考えられ得る生物学的最大値に達した（図３Ａ及び３Ｂ）。（実施例４）リウマチ様関節炎患者の単核細胞におけるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用及びその別個の活性成分に関するナチュラル及び適応性ｒＴｃの誘発作用の評価 マーカー遺伝子に対するｒＴｃ作用の評価に関しての手法は、６人の患者及び６人の対照を用いて上記の節に記載されたものと同じである。 この結果は、ＲＴ−ＰＣＲの節で説明されたとおり表される。図４に示されるように、細胞が別個の活性成分又はその併用で処理される場合、そのマーカーの増加により表されるｒＴｃの誘発作用がある。この誘発作用は全ての場合に見られ、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用処置において、ＣＤ２５に関してはｐ＝０．０１６の値（ペアードｔ検定）（Ａ）、Ｆｏｘｐ３に関してはｐ＝０．０２９の値（ペアードｔ検定）（Ｂ）、ＩＬ−１０に関してはｐ＝０．０３４の値（ペアードｔ検定）（Ｃ）、及びＴＧＦ−βに関してはｐ＝０．０２８の値（ウィルコクソン）（Ｄ）、で統計的有意性を示している。別個の活性成分で処置された細胞はｒＴｃ誘発作用を示したが、その差異は、評価されたいずれの遺伝子に関しても統計的に有意ではなかった。一方、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の相乗効果は、患者と同様に対照においても常に観察された。（実施例５）気管支喘息患者の単核細胞におけるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用及びその別個の活性成分に関するナチュラル及び適応性ｒＴｃの誘発作用の評価 実験的な変型は、上記に説明されたもの、並びにＲＴ−ＰＣＲ手法及びデータ処理であった。６人の患者及び６人の対照が試験された。 結果は、患者及び対照においてナチュラル及び誘発ｒＴｃ双方の誘発作用を示し、これはＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用で処置された細胞に対して統計的に有意であり、ＣＤ２５に関してはｐ＝０．０１２の値（ペアードｔ検定）、Ｆｏｘｐ３に関してはｐ＝０．００９の値（ペアードｔ検定）、ＩＬ−１０に関してはｐ＝０．０３７の値（ペアードｔ検定）、及びＴＧＦ−βに関してはｐ＝０．０２１の値（ウィルコクソン）、で統計的有意差を示す（図５）。（実施例６）腫瘍細胞系におけるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用及びその別個の活性成分の抗腫瘍作用評価 ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用、並びにその独立成分の抗腫瘍活性を、抗増殖活性及び細胞毒性活性並びに腫瘍細胞のアポトーシス誘導の評価により表した。 ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用及びその別個の活性成分の抗増殖活性及び細胞毒性活性の評価について、以下のいくつかのヒト腫瘍細胞系をインビトロで用いた：ＨｅＬａ（ヒト子宮頚癌）、ＨｅｐＧ２（ヒト肝癌）、Ａ３７５（ヒト黒色腫）、ＨＬ６０（ヒト前骨髄性白血病）、Ｋ５６２（ヒト赤血白血病）、ＰＢＭＣ（末梢血からの単核細胞）。これらの細胞は、９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ）中、腫瘍細胞系に関して全部で２０００細胞／ウェル及びＢＰＭＣに関して２０００細胞／ウェルを培養した。細胞増殖抑制は、Ｍｏｓｍａｎｎらにより記載された（Ｍｏｓｍａｎｎ Ｔ．細胞増殖及び生存に関する高速比色アッセイ：増殖及び細胞毒性アッセイへの適用（Ｒａｐｉｄ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ：ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｓｓａｙｓ）．（１９８３）Ｊ ＩＭＭＵＮＯＬ ＭＥＴＨＯＤＳ ６５：５５〜６３頁）修飾による３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５ジフェニルテトラゾリウムブロミドアッセイ（ＭＴＴ；Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社、セントルイス、ミズーリ州、米国）により評価された。上記の細胞全量を達成するために評価される各細胞系は、１００μｌ／ウェルを加えた各細胞系に適切な培養培地中で培養され、３７℃で５％ＣＯ２中で２４時間培養した。この時間後に、培養培地は、二通りに種々の処理剤：Ａ）細胞単独、Ｂ）細胞＋５μＭのＩＦＮα−２ｂ、Ｃ）細胞＋２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、Ｄ）細胞＋５μＭのＩＦＮα−２ｂ／２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、を含有する別の培養培地により置き換えた。処理された細胞を、同じ条件下でさらに４８時間インキュベートした。その後、ＭＴＴを加え、可溶性産物をプレートリーダーで５４０ｎｍにて読み取った（Ｍｕｌｔｉｓｃａｎ、Ｔｉｔｅｒｔｅｋ）。 結果は表４に示す。それらは、細胞単独の対照と比較した細胞増殖抑制％として表されている。細胞増殖抑制は、全ての腫瘍細胞系に見られ、ＢＰＭＣに見られたのはより少なかった。ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の相乗効果は、別個の活性成分と比較して細胞増殖抑制でも検出された。この効果は、ＨｅＬａ細胞系及びＡ３７５に関してより大きかった。 図６は、ＨｅＬａ細胞系における増殖抑制に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の用量依存効果を示す。表４．腫瘍細胞系におけるＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用及びそれらの別個の活性成分の抗増殖活性評価 ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用及びその別個の活性成分によるアポトーシス活性誘発は、ＲＴ−ＰＣＲによるＣＯＸ−２及びＢｃｌ−２遺伝子の発現並びにウェスタンブロットによるチトクローム−Ｃタンパク質の発現に対するそれらの効果によっても評価された。 ＲＴ−ＰＣＲを実施するために、我々は、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒキットを用いた。各々の場合において、我々は、Ｋ５６２細胞系から抽出された１μｇの全ＲＮＡ／実験変数を用いて開始した。ＲＴ反応を合計２０μｌの容量で実施し、後でこれを各１０μｌの２つのＰＣＲ反応液に分けた。ＰＣＲ産物が分離されたアガロースゲルのデンシトメトリーからＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアにより得られた相対値を正規化するために、ＧＡＰＤＨを構成的発現の遺伝子として使用した。 ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果は、ＣＯＸ−２及びＢｃｌ−２の遺伝子発現により評価され、そのために１０５細胞／実験変数を、補充なしのＲＰＭＩ １６４０培地／１０％ウシ胎仔血清中、Ａ）細胞単独、Ｂ）細胞＋５μＭのＩＦＮα−２ｂ、Ｃ）細胞＋２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、Ｄ）細胞＋５μＭのＩＦＮα−２ｂ／２０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ、を用いて８時間培養した。 結果は、別個の活性成分の阻害効果並びにＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の相乗的阻害効果を示し、それらの効果は、ＣＯＸ−２遺伝子発現に関してｐ＝０．０１１の値（ＡＮＯＶＡ．細胞単独対ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用）及び抗アポトーシス分子としてよく知られているＢｃｌ−２遺伝子に関してｐ＝０．００９の値（ＡＮＯＶＡ．細胞単独対ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用）を有して統計的に有意であった（図７Ａ）。 さらに、我々は、Ｋ５６２細胞系における遺伝子ＣＯＸ−２及びＢｃｌ−２の阻害に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の時間依存効果を示した（図７Ｂ）。 アポトーシス誘導のための経路の１つは、ＦａｓからＦａｓＬまでのユニオンを含む。Ｆａｓは、ＩＦＮ−αにより正に調節できる（Ｇｏｒｄｏｎ Ｍ．Ｍａｒｌｅｙ ＳＢ、Ｌｅｗｉｓ ＪＬら）。インターフェロン−アルファによる処置により、慢性骨髄性白血病患者から顆粒球−マクロファージ前駆体（ＣＦＵ−ＧＭ）の増幅能力を優先的に減じるが、正常なＣＦＵ−ＧＭを与える（１９９８）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １０２：７１０〜７１５頁）。この事象は、Ｆａｓにより媒介されるアポトーシスを促進し（Ｓｅｌｌｅｒｉ ＣＭＪ、Ｐａｎｅ Ｆ、Ｌｕｃｉａｎｏ Ｌら、慢性骨髄性白血病におけるｂｃｒ／ａｂｌのＦａｓ媒介調節は、アポトーシスに対する差異的効果をもたらす（Ｆａｓ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｃｒ／ａｂｌ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）（１９９８）Ｂｌｏｏｄ ９２：９８１〜９８９頁）、本発明において我々は、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用が、ＩＦＮ−α単独と比較してＦａｓの正の調節効果を有するかどうかを試験した。実施された実験変数は、先の実施例において説明された。Ｋ５６２細胞系の１０５細胞／実験変数を、種々の処理剤により４時間培養し、Ｆａｓの発現レベルは、先の節で説明されたＲＴ−ＰＣＲにより測定した。この結果は図８に示しており、ＩＦＮ−αに関して統計的に有意な刺激効果が、ｐ＝０．０４２の値（ＡＮＯＶＡ細胞単独対ＩＦＮ−α）でＦａｓ遺伝子に対して見られる。同様にＣ−Ｐｈｙｃｏは、Ｆａｓを正に調節したが、その差異は統計的に有意ではなく、Ｆａｓの相乗的正の調節効果は、ｐ＝０．００９の値（ＡＮＯＶＡ細胞単独対ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用）でこの細胞系においてＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用により観察された。 タンパク質レベルでチトクローム−Ｃ発現に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用効果の評価に対してウェスタンブロットを使用した（Ｃｈａｎｄｒａ Ｊら、プロテアソーム阻害剤は、グルココルチコイド耐性慢性リンパ球性白血病リンパ球においてアポトーシスを誘導する（Ｐｒｏｔｅａｓｏｍａ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｎｄｕｃｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ）．（１９９８）Ｂｌｏｏｄ ９２：４２２０頁）。上記に説明されたとおりに処置されたＫ５６２細胞から５μｇのタンパク質／実験変数を、２４時間培養し、１５％アクリルアミドゲル中ＳＤＳ−ＰＡＧＥ電気泳動により分離した。後でこのタンパク質をニトロセルロース膜に移し、特異的タンパク質を抗チトクローム−Ｃマウスモノクローナル抗体の使用により検出した。 この結果を図９に示しており、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用は、チトクローム−Ｃ発現に対してｐ＝０．００６で統計的に有意なＡＮＯＶＡ（細胞単独対ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用）により相乗的効果を誘発したことが見られ、これがＫ５６２細胞においてＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用により誘導されたアポトーシス効果の媒介物質であることを可能性にする。 ｐ５３及びｐ２１タンパク質は、Ｇ２／Ｍ期における細胞周期の静止及びＤＮＡ損傷後のアポトーシスの維持に必須である。 ＥＬＩＳＡは、ｐ５３及びｐ２１タンパク質の発現を検出するために使用された（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｏｃｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｇｅｒｍａｎｙ ｆｏｒ ｐ５３ ａｎｄ Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州、ＵＳＥＳ ｆｏｒ ｐ２１）。細胞を、３０ｎｇのＩＦＮα−２ｂ／５０μＭのＣ−Ｐｈｙｃｏ併用又は図７Ａで示される実験に関して記載した濃度での独立成分により、図７Ｂに示される実験のとおり６、１２、２４及び４８時間処理した。サンプルに、抗ｐ５３又は抗ｐ２１モノクローナル抗体でコーティングした９６ウェルプレート中、特異的ビオチン化抗体と同量のタンパク質を加えた。室温で２時間のインキュベーション後、ストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ複合体を加えた。吸光度を４５０ｎｍで測定し、濃度は、双方の既知濃度のタンパク質の標準曲線の外挿により判定した。 本発明において、独立成分と比較してＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の統計的に有意な相乗効果が示され、ｐ５３タンパク質の誘導に関してｐ＝０．０２６及びｐ２１タンパク質の発現レベルに関してｐ＝０．０４１（ＡＮＯＶＡ細胞単独対ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用）は、ヒト肝癌のＨｅｐＧ２系においてＥＬＩＳＡにより検出された（図１０）。 処置６時間後にＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用で処理された細胞中のｐ５３タンパク質のレベル（図１１Ａ）は、細胞が単独である場合よりも４倍高く、この組合せによる処置１２時間後、アップレギュレートされたままであった。これらの結果は、ｐ５３タンパク質発現の増加がＨｅｐＧ２細胞のアポトーシスにおいて重要な役割を有し得ることを裏付けている。 アポトーシス誘導は、ｐ２１タンパク質をコードする遺伝子においてｐ５３を含むシグナル伝達カスケードから下流にある標的遺伝子の負の調節と関連している。本発明において、ｐ２１タンパク質発現の正の調節に対してＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の時間依存効果が示された。この増加は、ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用による細胞処理１２時間後に生じた（図１１Ｂ）。この併用により１２時間処理されたＨｅｐＧ２細胞は、ｐ２１タンパク質の発現を４倍増加させた。 ｐ５３の発現ピーク（６時間）は、ｐ２１タンパク質の発現ピーク（１２時間）よりも早く、細胞をＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用により処理することにより誘導されたアポトーシスに関するシグナル伝達機序においてｐ２１以上に実施されるｐ５３の果たしている役割の可能性を示唆した。ナチュラル調節Ｔ細胞のマーカー遺伝子の発現に対する別個の処置及びＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果（図１Ａ及び図１Ｂ）、及び多発性硬化症（ＭＳ）患者におけるＲＴ−ＰＣＲによる適応性調節Ｔ細胞の効果（図１Ｃ及び図１Ｄ）を示す図である。多発性硬化症患者におけるＣＤ２５／Ｆｏｘｐ３の関連性に対してＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果を示す図である。図３Ａは、別個の活性成分及びＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用により処置された末梢血からの単核細胞においてＣＤ４＋ ＣＤ２５＋の発現のフローサイトメトリーを示す図であり、図３Ｂは、別個の活性成分及びＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用のＣＤ４＋ＣＤ２５＋及びＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ細胞の誘発効果を示す図である。ナチュラル調節Ｔ細胞の遺伝子マーカーの発現に対して別個の処置及びＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果（図４Ａ及び図４Ｂ）、及びリウマチ様関節炎患者におけるＲＴ−ＰＣＲによる適応性調節Ｔ細胞の効果（図４Ｃ及び図４Ｄ）を示す図である。ナチュラル調節Ｔ細胞の遺伝子マーカーの発現に対する別個の処置及びＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果（図５Ａ及び図５Ｂ）、及び気管支喘息患者におけるＲＴ−ＰＣＲに関する適応性調節Ｔ細胞の効果（図５Ｃ及び図５Ｄ）を示す図である。ＨｅＬａ細胞系における増殖抑制に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の用量応答効果を示す図である。図７Ａは、Ｋ５６２細胞系におけるＣＯＸ−２及びＢｃｌ−２遺伝子の発現に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果及び別個の活性成分効果を示す図であり、図７Ｂは、Ｋ５６２細胞系におけるＣＯＸ−２及びＢｃｌ−２遺伝子の発現に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の時間依存効果を示す図である。細胞系Ｋ５６２における遺伝子Ｆａｓの発現に対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果及び別個の活性成分効果を示す図である。タンパク質チトクロームＣの発現に対する別個の活性成分効果及びＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果を示す図である。ＥＬＩＳＡ ＨｅｐＧ２細胞により定量化されたタンパク質ｐ５３（図１０Ａ）及びｐ２１（図１０Ｂ）のレベルに対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの併用効果及び別個の活性成分効果を示す図である。ＥＬＩＳＡ ＨｅｐＧ２細胞系により定量化されたタンパク質ｐ５３（図１１Ａ）及びｐ２１（図１１Ｂ）のレベルに対するＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ併用の動態学を示す図である。 自己免疫疾患、アレルギー及び癌の治療に有用な、インターフェロンファミリーのタンパク質及び天然胆汁色素を含有することを特徴とする、医薬化合物。 前記インターフェロンが、組換え法により得られるか、又はペグ化若しくは他のタンパク質との結合により修飾された、ＩＦＮα−２ｂであることを特徴とする、請求項１に記載の医薬化合物。 前記天然胆汁色素がＣ−フィコシアニンであることを特徴とする、請求項１及び２に記載の医薬化合物。 非経口経路及び経口経路により使用される製剤であることを特徴とする、請求項１、２及び３に記載の医薬化合物。 その活性成分が、治療方法として又は医薬組成物として一個体において別個に投与できることを特徴とする、請求項１、２及び３に記載の医薬化合物。 前記組成物の双方の成分が、同じ治療方法の一部として一個体において異なる経路により使用されることを特徴とする、請求項５に記載の医薬組成物。 ＩＦＮα−２ｂが非経口経路により投与され、Ｃ−フィコシアニンが経口経路により投与されることを特徴とする、請求項５及び６に記載の医薬組成物。 筋肉内、静脈内、皮下、経口、経鼻及びくも膜下腔内経路により投与できる請求項１から７までに記載の医薬化合物又は医薬組成物の使用。 自己免疫疾患が、天然及び／又は適応性調節Ｔ細胞の数又は機能性が低下した多発性硬化症、リウマチ様関節炎又は他の疾患である請求項１から８までに記載の医薬化合物の使用。 これら疾患の再発形態での再発防止のための請求項１から９までに記載の医薬化合物の使用。 アレルギー性疾患が、天然及び／又は適応性調節Ｔ細胞の数又は機能性が低下した気管支喘息又は他の疾患である、請求項１から１０までに記載の医薬化合物の使用。 抗増殖性、細胞毒性及び腫瘍細胞アポトーシスに関するその活性成分の相乗効果により、種々の起源の悪性腫瘍におけるその適用に関して理論的根拠がある請求項１から１１までに記載の医薬化合物の使用。 本発明は、インターフェロン−アルファとＣ−フィコシアニンとの組合せ（ＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏ）に関するものであり、これは、自己免疫疾患、アレルギー性疾患及び癌の治療用製剤を得るために使用される。本発明に示される調節Ｔ細胞の誘導効果に関連する抗炎症性、免疫調節性、抗酸化性、抗ウィルス性、抗増殖性及び抗腫瘍効果によって、前記疾患用にＩＦＮ−α／Ｃ−Ｐｈｙｃｏの組合せを使用することが正当化される。

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