生命科学関連特許情報
| タイトル： | 公開特許公報(A)_シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤及び食品 |
| 出願番号： | 2004303551 |
| 年次： | 2006 |
| IPC分類： | A61K 36/18,A23L 1/30,A61P 19/02,A61P 19/10,A61P 27/02,A61P 29/00,A61P 35/00,A61P 37/00,A61P 37/08,A61P 43/00,C12N 9/99,A23L 2/52 |
特許情報キャッシュ
大野 重昭 大神 一浩 矢澤 一良 堀 均 堀 昭 JP 2006083149 公開特許公報(A) 20060330 2004303551 20040917 シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤及び食品 有限会社湘南予防医科学研究所 300076688 大野 重昭 大神 一浩 矢澤 一良 堀 均 堀 昭 A61K 36/18 20060101AFI20060303BHJP A23L 1/30 20060101ALI20060303BHJP A61P 19/02 20060101ALI20060303BHJP A61P 19/10 20060101ALI20060303BHJP A61P 27/02 20060101ALI20060303BHJP A61P 29/00 20060101ALI20060303BHJP A61P 35/00 20060101ALI20060303BHJP A61P 37/00 20060101ALI20060303BHJP A61P 37/08 20060101ALI20060303BHJP A61P 43/00 20060101ALI20060303BHJP C12N 9/99 20060101ALI20060303BHJP A23L 2/52 20060101ALI20060303BHJP JPA61K35/78 CA23L1/30 BA61P19/02A61P19/10A61P27/02A61P29/00A61P29/00 101A61P35/00A61P37/00A61P37/08A61P43/00 111C12N9/99A23L2/00 F 3 1 書面 6 4B017 4B018 4C088 4B017LC03 4B017LG20 4B017LP01 4B018LB08 4B018MD48 4B018ME05 4B018ME14 4B018MF01 4C088AB12 4C088BA08 4C088MA23 4C088MA35 4C088MA52 4C088MA66 4C088NA06 4C088NA14 4C088ZA33 4C088ZA59 4C088ZA66 4C088ZA96 4C088ZA97 4C088ZB07 4C088ZB11 4C088ZB13 4C088ZB15 4C088ZB26 4C088ZC20 本発明は、医薬として有用な、スイカズラ科植物抽出物を有効成分とするシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤及び、ハスカップ抽出物を添加してなる、シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品に関する。 シクロオキシゲナーゼ（プロスタグランジン エンドペルオキシド シンターゼ）は、プロスタグランジンＨ２を産生する酵素であり、このプロスタグランジンＨ２は、さらにプロスタグランジンＤ２、Ｅ２、Ｆ２やトロンボキサンＡ２、Ｂ２等の強い生理活性を有する代謝物に誘導される。したがって、シクロオキシゲナーゼを阻害すればプロスタグランジンＨ２の生成、ひいては上記プロスタグランジン類やトロンボキサン類の生成を阻害しうると考えられる。また誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）は炎症、がん発症や老化などに関与する事が知られている酵素の一種である一酸化窒素（ＮＯ）の産生酵素であり、本酵素を抑制する事は炎症やがん発症などを抑制しうるものと考えられる。 アスピリン、インドメタシンに代表される多くのシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、プロスタグランジン類の生合成を抑制する作用を有するため、プロスタグランジン類が関与する疾病に有効である。しかしながら、現在使用されているシクロオキシゲナーゼ阻害剤の多くは、消化性潰瘍、めまい等の副作用があり、また、治療に必要とする使用量と副作用が発現する使用量との間に大きな差がないため、より安全性の高いシクロオキシゲナーゼ阻害剤の開発が望まれている。 一方、スイカズラ科（Ｃａｐｒｉｆｏｒｌｉａｃｅａｅ）のクロノミウグイスカグラ（別名ハスカップ）は落葉低木でバイカル湖周辺が原産地である。わが国においても、北海道では低地にも、本州では亜高山帯〜高山帯に生息する。果実は黒紫色の液果で。ジャム・果汁・菓子の材料に使われている。しかしながら、その抽出成分に関してほとんど報告されておらず、特にシクロオキシゲナーゼおよび誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害作用についてはまったく知られていない。 本発明は、毒性や副作用の少ないシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤及びシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品を提供することを目的とする。 本発明者らは、上記の目的を達成するため鋭意検討した結果、ハスカップ抽出物がシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害作用を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。 スイカズラ科（Ｃａｐｒｉｆｏｌｉａｃｅｏｕｓ）植物由来の抽出物を有効成分とするシクロオキシゲナーゼおよび誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害およびスイカズラ科植物を添加してなるシクロオキシゲナーゼおよび誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品および医薬品。 天然由来のスイカズラ科植物抽出物を有効成分とする本発明のシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤及びハスカップ抽出物を添加してなるシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品は、毒性及び副作用が少なく、アレルギー性結膜炎、虹彩炎、毛様体炎、強膜炎などの炎症性眼疾患；糸球体腎炎、腎盂腎炎、前立腺炎；気管支炎、肺炎；胃腸炎；関節リウマチ；骨粗鬆症；大腸癌；ベーチェット病、膠原病などの自己免疫性疾患等免疫疾患；酸化ストレスから生じる眼精疲労；眼科領域における各種調節関連疾患（調節過多、調節痙攣、調節衰弱、調節遅鈍、調節疲労、調節不全、調節不全麻痺および調節麻痺）の予防、治療、緩和に有用である。 本発明により、スイカズラ科植物抽出物を有効成分とするシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害作用を目的とした。医薬品、食品を人間及び動物に提供することができる。 本発明の有効成分であるハスカップ抽出物は、その水分含量（約８４％）と同量の９９．５％エチルアルコールをワーリングブレンダーに入れてホモジナイズした。濾紙にて濾過しながら５０ｗ／ｗ％のエチルアルコールで洗いながら減圧濾過した。濾液はロータリーエバポレーターで減圧濃縮してエチルアルコールを除去した後、凍結乾燥した。飲食品用途には、この凍結乾燥したものをハスカップ抽出物として用いることが可能である。 本発明のシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤は抗炎症作用のほか、例えばその免疫調節作用等により、免疫調節剤等として有用である。医薬としての具体的な適用疾患として、アレルギー性結膜炎、虹彩炎、毛様体炎、強膜炎などの炎症性眼疾患；糸球体腎炎、腎盂腎炎、前立腺炎；気管支炎、肺炎；胃腸炎；関節リウマチ；骨粗鬆症；大腸癌；ベーチェット病、膠原病などの自己免疫性疾患。緑内障。糖尿病および糖尿病から併発してくる全身疾患；酸化ストレスから生じる眼精疲労；眼科領域における各種調節関連疾患（調節過多、調節痙攣、調節衰弱、調節遅鈍、調節疲労、調節不全、調節不全麻痺および調節麻痺）を挙げることができる。 本発明に係るシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤、溶解剤等の添加剤と共に公知の製剤技術により、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、注射剤等の剤型とすることができる。 また、本発明のシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品は、ハスカップ抽出物を各種の食品に添加して製造することができる。例えば、シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品としては、清涼飲料、菓子、冷菓、乳製品、酒類、肉類等を挙げることができる。 スイカズラ科植物抽出物の投与量は、経口投与の場合、成人一人あたり５０〜５０００ｍｇ／日であり、好ましくは、１００〜２０００ｍｇ／日の範囲であり、患者の症状に応じて、適宜増減することができる。 また、本発明のシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品における有効成分としてのハスカップ抽出物の含有量としては、飲食品としての１日の通常摂取量で上記の有効量を満たすように含有量を規定することができる。 以下、本発明を実施例により説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。 ハスカップ抽出物のシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害作用 マウスマクロファージ由来細胞であるＲＡＷ２６４．７細胞を１ウェルあたり５×１０４個になるよう調整し、ハスカップ抽出物１０、１００、１０００μｇをＤＭＳＯに溶解して添加し、３７℃、５％ＣＯ２存在下で予め６、１２、２４時間培養した。ＰＢＳで洗浄後、同濃度のハスカップ抽出物存在下でＬＰＳ１０μｇ／ｍｌを添加し、マクロファージを刺激した。６、１２、２４時間培養後、培養液中のＴＮＦ−アルファ、ＮＯ、ＰＧＥ２濃度を測定した。また、冷ＰＢＳで十分に洗浄した後、細胞中のシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の発現をウエスタンブロティング法にて検討した。ＬＰＳコントロール群およびＬＰＳ刺激なし群も設け、ハスカップ抽出物の溶媒として用いた０．０１％ＤＭＳＯを、ハスカップ抽出物を加えずに添加した。その結果、ハスカップ抽出物は濃度依存的にシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の発現を阻害することが確認された（図１）。また、ハスカップ抽出物は、濃度依存的にＴＮＦ−アルファ濃度を有意に抑制した（図２）。濃度依存的に一酸化窒素産性量を有意に抑制した（図３）。濃度依存的にＰＧＥ２産生量を有意に抑制した（図４）。 シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の発現量を示す、電気泳動図である。ＴＮＦ−アルファ濃度の測定結果を示すグラフである。一酸化窒素濃度の測定結果を示すグラフである。ＰＧＥ２ 符号の説明 ＣＯＸ−２ ： シクロオキシゲナーゼ−２ ｉＮＯＳ ： 誘導型一酸化窒素合成酵素 ＰＧＥ２ ： プロスタグランジンＥ２ ｃｏｎｔｒｏｌ ： ＬＰＳ刺激なし群 ＬＰＳ ： ＬＰＳコントロール群 ＨＡＳ ： ハスカップ抽出物 スイカズラ科植物抽出物を有効成分とする、シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害。 スイカズラ科植物抽出物を添加してなる、シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品。 スイカズラ科植物の１つがハスカップである、シクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品。 【課題】 毒性や副作用の少ないシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤及びシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品を提供する。【解決手段】 スイカズラ科植物抽出物を有効成分とするシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害剤及びスイカズラ科植物抽出物を添加してなるシクロオキシゲナーゼ及び誘導型一酸化窒素合成酵素の阻害用飲食品。【効果】 毒性及び副作用が少なく、炎症性疾患、免疫疾患の予防、治療、緩和に有用である。【選択図】 図１