生命科学関連特許情報

特許情報キャッシュ

齋藤 宏 松田 武英 恩田 知明 JP 3985059 特許公報(B2) 20070720 2004127328 20040329 献血の採血適否判定方法 株式会社バイオサイバー 501011484 齋藤 宏 504159992 齋藤 宏 松田 武英 恩田 知明 20071003 G01N 33/53 20060101AFI20070913BHJP G01N 33/543 20060101ALI20070913BHJP JPG01N33/53 DG01N33/543 521 Ｇ０１Ｎ ３３／５３ Ｇ０１Ｎ ３３／５４３ 特表２００３−５１２６２４（ＪＰ，Ａ） 3 2005283549 20051013 7 20040430 竹中 靖典 献血の直前に献血者または供血者が献血にたえられる量の貯蔵鉄を有するか否かを知るために、前採血血液を用いて免疫化学的分析法により血清フェリチン値を測定し、献血のための採血の適否を判定する方法に関する分野の技術。 現在は献血者が貧血であれば、その献血者本人の貧血症状を更に増悪させる要因になるので、必ず献血直前に貧血の有無検査を行っている。献血時の貧血検査法として現在は、ヘモグロビン量の検査または血液比重の検査から貧血の有無を判定する方法を使っている。実際献血車などで多く使われている方法は主に比重法で、それは簡便で安価であるが、血漿蛋白濃度や白血球の影響を受けて貧血がないと誤って評価される恐れがある。非特許文献１によると、比重やヘモグロビン量を測定しても貯蔵鉄の量を知ることは出来ないと書かれており、“献血により「貧血の無い鉄欠乏」または「鉄欠乏性貧血」に陥るか否か”などを判定するためには貯蔵鉄の量を判定できる血清フェリチンの測定が必要不可欠である。 医師法第２４条で、給血者の健康を保護するために「採血によってその者の健康に障害を生ずると認められる者を給血者としないこと」と定められており、その中の１つが「貧血者又はその疑いのある者」となっている。この法律を忠実に実施するには本願発明の方法を献血時に適用する以外にない。 発明が解決しょうとする課題 鉄欠乏性貧血は極めて多い疾患であり、特に若い有月経期の女性に多いが閉経後の女性でもしばしば発見される。本願発明は、貧血は無いが鉄が減少または欠乏した人が献血することにより鉄欠乏性貧血に陥ることをなくすためになされたものである。「鉄欠乏性貧血の確実な診断には貯蔵鉄の指標である血清フェリチンの測定は不可欠な検査である」と非特許文献１に記載してある。しかしこの血清フェリチンの量は、極微量であり、その測定には大型の免疫学的な分析装置が必要とされている。一般的な献血では、貧血を判定するための検査として、簡単な比重試験だけで済まされ、その結果だけで採血の適否が判定されていた。実際このような「貯蔵鉄レベルを調べない献血により供血者を鉄欠乏性貧血にする恐れがあ」と非参考文献１が警告している。今までは、この血清フェリチンの検査が高価である、その測定機器が大きい、測定に時間がかかる、測定に熟練を要するなどの理由のため今までは、移動式献血車等の採血現場で、採血前に血清フェリチンの定量または半定量を行うことは実質不可能であった。 本願発明ではこの血清フェリチンの定量または半定量が、特許文献１のイムノクロマト法および特許文献２の簡易定量機器の原理に基づき開発された専用診断薬により、献血前の試験的採血液で簡単に短時間内に測定出来ることが明らかになった。特許第３４８１８９４号特願２００２−１５４５０９齋藤宏 著「鉄代謝異常の臨床」１９９９年（株）医薬ジャー ナル社，大阪Ｇ．Ｏ．Ｗａｌｔｅｒｓ，Ｆ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ，ａｎｄ Ｍ．Ｗｏｒｗｏｏｄ： Ｓｅｒｕｍｆｅｒｒｉｔｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｒｏｎ ｓｔｏｒｅｓ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｓｕｂｊｅｃｔｓ．Ｊ．ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈ．，２６，７７０−７７２，１９７３ 本願発明では、献血直前に血清フェリチンの定量または半定量を行い、鉄欠乏性貧血を起こす恐れのある献血者からの採血を防止することで医師法第２４条にいう「貧血者又はその疑いのある者」から採血しないことが徹底できることになる。非特許文献１のｐ３９〜４４に記載されているように若い女性の約９％に鉄欠乏性貧血が発見され、２３％に及ぶ貧血の無い鉄欠乏が存在すると記載されており、４００ｍＬ献血により鉄欠乏性貧血に陥る恐れのある貯蔵鉄の減少した人の割合は更に多い。現在の貧血検査だけでは、鉄の減少や鉄欠乏の人の存在は不明であるのでこれらの人から献血のための採血が行われていることは隠されている大きな社会問題である。 課題を解決するための手段 本願発明は、血清フェリチンの定量又は半定量を特許文献１のイムノクロマト法を用い、献血前の試験的採血液による検査を５分間以内に行ない結果的に２０ｎｇ／ｍＬから３０ｎｇ／ｍＬ以下の献血者からの採血は実施しないことに活用できることを見出した。 ４００ｍＬ献血に際して起きる血清フェリチン値の変動を図１に片対数グラフで示した。図１（１）縦軸が血清フェリチン値（ｎｇ／ｍＬ）で、（２）がその正常値下限の１２ｎｇ／ｍＬである。（３）は本願発明でカットオフレベルとしている血清フェリチン値２０ｎｇ／ｍＬを示した。（４）が正常域の貯蔵鉄で、（５）は貯蔵鉄の欠乏域を表している。下段（６）はヘモグロビン量（ｇ／ｄＬ）で、（７）はヘモグロビンの正常値下限といわれる１２ｇ／ｄＬの位置を示した。（８）が現在献血に行くと採血される範囲で、（９）が本願発明で実施される献血対象範囲。（１０）が４００ｍＬ採血でも鉄欠乏性貧血に陥らない範囲、（１１）が鉄欠乏性貧血に陥る範囲である。従って（１２）により本願発明を実施すれば鉄欠乏性貧血に陥らない範囲が設定できることになる。 貯蔵鉄が正常かそれ以下の低値域にある場合、非特許文献（２）によると「血清フェリチン１ｍｇ／ｍＬは貯蔵鉄８ｍｇに相当する。それゆえ、血清フェリチン値が２０ｎｇ／ｍＬの人の貯蔵鉄は１６０ｍｇである。ヘモグロビン１５ｇ／ｄＬの献血者から４００ｍＬ採血するとヘモグロビンの鉄２００ｍｇが失われる。その結果、不足したへモグロビンを合成し補充する為に貯蔵鉄２００ｍｇが造血のために動員され、貯蔵鉄は１６０−２００＝−４０ｍｇとなって枯渇（１３）し鉄欠乏に陥ることとなる。従って本願発明の実施は、医師法第２４条にも明記してあるように、ボランティアで献血に参加してくれる人を、絶対に献血で鉄欠乏性貧血に陥らせてはならないという基本的概念に貢献し得る。 血清フェリチン値を基準にした、鉄欠乏性貧血の現状と献血による採血で失われる貯蔵鉄の減少とそれに伴う「血清フェリチン値の低下概念図」を図２に示した。非特許文献１によると鉄欠乏性貧血域（１６）では「血清フェリチンの量が１２ｎｇ／ｍＬ以下になる」と記載されている。逆に鉄過剰域（１７）では約２５０ｎｇ／ｍＬ以上になるとされている。図１に示すように血清フェリチン量が２０ｎｇ／ｍＬの人から４００ｍＬ採血した場合（１４）、貯蔵鉄は１００ｍｇ以下と枯渇し（１５）、血清フェリチン値も確実に鉄欠乏域に入る。図２で説明すると献血カットオフ位置（１８）、２０ｎｇ／ｍＬからの血清フェリチン値の低下（１９）を見ると前述のように１２ｎｇ／ｍＬ未満となり、鉄欠乏性貧血に陥る事が理解できる。 本願発明は、４００ｍＬ献血後、献血者が鉄欠乏性貧血に陥ることの無いよう血清フェリチン値を少なくとも、この２０ｎｇ／ｍＬ或いは２５ｎｇ／ｍＬ或いは３０ｎｇ／ｍＬをカットオフ値として献血の適否を判定する方法を提示するものである。３０ｎｇ／ｍＬでも４００ｍＬの採血をすれば前述の如く鉄欠乏になる。発明の実施の１形態は、特許文献１を献血の適否判定に使うために献血前に予備採血５分後測定結果が出る迅速な方法であり、特別な機械を使わないで目視で判定出来る簡便測定方法である。またはイムノクロマト法の試験紙片の読み取り機器である簡易測定機器である特許文献２の機器を使用することもできる。これらの方法を使用することにより、献血に訪れたボランティアから献血前の採血で血清フェリチン値を測定することが可能になり、採血を「鉄欠乏性貧血に陥る恐れの無い人」に限定する事が出来るようになった。 イムノクロマト測定法の試験紙片を図３に示す。発明の実施の１形態は、特許文献１を利用して測定する方法を活用して実施される。即ち区分Ａの金コロイド標識抗体（２０）に抗ヒトフェリチンマウスモノクローナル抗体と金コロイド標識ウサギＩｇＧ、区分Ｂのテストライン（２１）に抗ヒトフェリチンマウスモノクローナル抗体、区分Ｃの対象のコントロールライン（２２）に抗ウサギＩｇＧヤギ抗体をそれぞれ固相化して、献血者の血清または血漿（検体）を検体注入口サンプルパット（２３）に一定量注入すれば、検体はクロマト法の原理で展開し標識抗体（２０）と結合しさらに区分Ｂ（２１）及びＣ（２２）の特異抗体と一定比率で結合するので、それを目視または専用機器によりそれぞれ色調を測定し機器内部の検量線からその濃度を定量する事ができる。（２４）は余った検体を吸収するパットである。 図４に、反射光測定装置で読み取った光学的測定濃度（ＡＤ）値とフェリチン濃度の関係を示した。図３の区分Ｂ（２１）のラインはフェリチン濃度に比例して変化する（２６）が、区分Ｃ（２２）のラインはフェリチン濃度等の影響を受けることなく一定となる図４（２５）。図３区分Ｃ（２２）の光学的測定濃度（ＡＤ）値を献血のカットオフ値であるフェリチン濃度２０ｎｇ／ｍＬに設定することにより図４の（２５）と（２６）を比較できる特許文献２のような光学的濃度測定装置を用いフェリチン濃度の定量が可能となり、採血の適否判断に適用できた。 当然特許文献１のように目視による比較も可能でありカットオフ値以下の濃度であるか否かの判定もできる。 このフェリチン濃度の測定は、従来から使われている一般的な分光光度計を用いる酵素抗体法や蛍光光度計や発光強度を測定する光度計等を用いる酵素抗体法でも実施する事ができる。それらを献血時に即応して検査できるシステムはこの分野の技術者には簡単に作成でき、そのカットオフ値を２０ｎｇ／ｍＬまたは２５ｎｇ／ｍＬ或いは３０ｎｇ／ｍＬ以上の検体についてのみ採血可能なようにすることは容易である。 発明の効果 医師法第２４条で、献血者の健康を保護するために「採血によってその者の健康に障害を生ずると認められる者を献血者としないこと」と定められており、その中の１つが「貧血者又はその疑いのある者」となっているが、現実は血液の比重を測定して貧血の有無を判定する方法を使っているだけで、貯蔵鉄レベルの検査は全く行われていない。理由は現在献血の現場で、迅速にかつ簡単にフェリチン値の定量または半定量を実施する具体的な方法が無かったためで、厳密に法を適用すると献血そのものへの影響例えば献血希望者数の減少などの方が大きくなるので現実的でなかった。本願発明は、鉄欠乏性貧血の診断に必要な血清フェリチン値を献血現場で簡便に直接測定できる方法を提供できる事により、医師法第２４条の理念を実践し、献血者の健康を守る点で画期的な発明である。 血清フェリチンの代謝 血清フェリチン値の低下概念図 イムノクロマト測定法の試験紙片 フェリチン濃度と光学的濃度との関係図 符号の説明 （１）血清フェリチンｎｇ／ｍＬ（２）血清フェリチン１２ｎｇ／ｍＬ（３）血清フェリチンカットオフ２０ｎｇ／ｍＬ（４）貯蔵鉄正常域ｍｇ（５）貯蔵鉄の欠乏域（６）ヘモグロビン ｇ／ｄＬ（７）ヘモグロビン正常下限（８）現在献血に行くと採血される範囲（９）本願発明実施後採血される範囲（１０）４００ｍＬ献血で鉄欠乏性貧血に陥らない範囲（１１）４００ｍＬ献血後鉄欠乏性貧血に陥る範囲（１２）本願実施で鉄欠乏性貧血に陥らない範囲（１３）貯蔵鉄−２００ｍｇ損失（１４）４００ｍＬ献血（１５）貯蔵鉄の枯渇レベルの上限（１６）鉄欠乏性貧血の範囲（１７）鉄過剰域（１８）本願献血カットオフレベル（１９）４００ｍＬ献血による血清フェリチン値の低下（２０）区分Ａ 金コロイド標識抗体（２１）区分Ｂ テストライン（２２）区分Ｃ コントロールライン（２３）検体注入口サンプルパット（２４）吸収パット（２５）区分Ｃの光学濃度（２６）区分Ｂの光学濃度 献血により鉄欠乏性貧血に陥る危険を防止するために献血実施直前に予備採血した全血または血漿中のフェリチンの濃度を測定し、その値が２０ｎｇ／ｍＬ以上の場合にのみ献血用としての採血が行えるとしたことを特徴とする献血時の採血可否判定方法。 献血実施直前のフェリチンの濃度測定を行う測定法が免疫クロマト法であって献血者の全血または血漿検体注入後出現する２種類以上の反応ラインのうち、少なくとも１本は２０ｎｇ／ｍＬの一定の発色強度を持つフェリチンとは異なる反応系をもつ対照ラインであり、もう１方の献血者のフェリチン濃度に比例する検体ラインとを目視で比較し献血者のラインの色調が対照ラインより確実に濃い場合にのみ献血用としての採血が行えるとしたことを特徴とする請求項１の献血時の採血可否判定方法。 献血実施直前のフェリチンの濃度測定を行う測定法が全血または血漿を注入しその場ですぐ色調の濃度が定量できる装置である迅速免疫クロマト法、迅速酵素抗体測定法、迅速蛍光抗体測定法、迅速発光抗体測定法であってその測定結果が２０ｎｇ／ｍＬ以上のときに限って献血用としての採血が行えるとしたことを特徴とする請求項１の献血時の採血可否判定方法。

ページのトップへ戻る

生命科学データベース横断検索へ戻る