生命科学関連特許情報
| タイトル： | 公開特許公報(A)_ジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法 |
| 出願番号： | 2003187965 |
| 年次： | 2005 |
| IPC分類： | 7,C12P7/42 |
特許情報キャッシュ
莪山 眞與 田村 豊 JP 2005021034 公開特許公報(A) 20050127 2003187965 20030630 ジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法 三菱瓦斯化学株式会社 000004466 永井 隆 100117891 莪山 眞與 田村 豊 7 C12P7/42 C12P7/42 C12R1:01 C12P7/42 C12R1:02 JP C12P7/42 C12P7/42 C12R1:01 C12P7/42 C12R1:02 6 ＯＬ 8 4B064 4B064AD32 4B064CA02 4B064CB13 4B064CC03 4B064CD06 4B064DA16 【０００１】【発明の属する技術分野】本発明は、一般式１で示されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体のメチロール基を酸化して一般式２で示されるジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造する方法に関する。さらに詳しくは、一般式１で示されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体のメチロール基に対する酸化能を持つ、キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を用いた、微生物酸化法によるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体からのジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法に関する。【０００２】ジメチロ−ルカルボン酸誘導体は、ポリウレタン樹脂、エポキシ樹脂、各種化成品中間体として極めて重要な化合物である。【０００３】【従来の技術】トリス（ヒドロキシメチル）誘導体を酸化してジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造する方法としては、過酸化水素を用いた化学的酸化による方法（例えば、特許文献１参照）、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属又はアグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する細菌を用いた微生物酸化による方法（例えば、特許文献２参照）が知られている。しかし、過酸化水素を用いた化学的酸化では、副反応による過酸化物の生成を伴うためジメチロ−ルカルボン酸誘導体の収率が低く、しかも、酸化剤の取り扱いに細心の注意を要し、余剰となった酸化剤の処理に手間と経費を要すると言う問題があった。一方、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属又はアグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する細菌を用いた微生物酸化による方法は、反応条件が穏やかである点では優れた特性を有するが、反応収率、選択率が充分ではなく工業的に実施する方法としては効率的に問題を有するものであった。このような背景から、微生物酸化によって、高い収率、選択率でジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造できる工業的に適用可能な方法の提供が望まれていた。【０００４】【特許文献１】特開平１１−２１７３５１号公報【特許文献２】特開平９−１２５０６号公報【０００５】【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、従来技術における上記のような課題を解決し、微生物の酸化能力を利用して、トリス（ヒドロキシメチル）誘導体からジメチロ−ルカルボン酸誘導体を高い収率及び選択率で生産できる工業的に優れた製造方法を提供することにある。【０００６】【課題を解決するための手段】本発明者らは、トリス（ヒドロキシメチル）誘導体を酸化し、ジメチロ−ルカルボン酸に変換する能力を持った微生物について鋭意検討を重ねた結果、キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、グルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を用いることによって、顕著に高い収率及び選択率でトリス（ヒドロキシメチル）誘導体からジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造できることを見出し、本発明に到達した。【０００７】即ち、本発明は、一般式１で示されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体のメチロ−ル基を酸化し、一般式２で示されるジメチロ−ルカルボン酸誘導体に変換する優れた性能を有するキサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌の培養液、菌体、又は菌体処理物を用いる、（１）〜（６）に示すジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法に関する。（１）一般式１で示されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体を酸化して一般式２で示されるジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造するに当たって、メチロ−ル基を酸化する能力有する、キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を用いることを特徴とする、ジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。但し、一般式１及び２中のＲは水素原子、アミノ基、アルキル基、又は置換アルキル基である。【化３】【化４】（２）キサントバクタ−属に属する細菌が、キサントバクタ−・オウトトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）である、（１）記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。（３）ミコプラナ属に属する細菌が、ミコプラナ・ジモルファ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ）、又はミコプラナ・ブラタ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｂｕｌｌａｔａ）である、（１）記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。（４）アセトバクタ−属に属する細菌が、アセトバクタ−・リクファシエンス（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）である、（１）記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。（５）グルコノバクタ−属に属する細菌が、グルコノバクタ−・インダストリウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｉｎｄｕｓｔｒｉｕｓ）、グルコノバクタ−・オキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｏｘｙｄａｎｓ）、グルコノバクタ−・ロズウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｏｓｅｕｓ）、グルコノバクタ−・サボキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｓｕｂｏｘｙｄａｎｓ）、グルコノバクタ−・セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｃｅｒｉｎｕｓ）、グルコノバクタ−・スクレロイデウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｓｃｌｅｒｏｉｄｅｕｓ）、グルコノバクタ−・アルビダス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ａｌｂｉｄｕｓ）、グルコノバクタ−・ジオキシアセトニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｄｉｏｘｙａｃｅｔｏｎｉｃｕｓ）、グルコノバクタ−・グルコニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｇｌｕｃｏｎｉｃｕｓ）、又はグルコノバクタ−・ノノキシグルコニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｎｏｎｏｘｙｇｌｕｃｏｎｉｃｕｓ）である、（１）記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。（６）キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を培地中で培養し、得られた培養液、菌体、又は菌体処理物を一般式１で表されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体に作用させる、（１）〜（５）の何れかに記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。【０００８】【発明の実施の形態】以下、本発明の詳細について説明する。前記の一般式１、２で示されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体、ジメチロ−ルカルボン酸誘導体のＲは水素原子、アミノ基、アルキル基、又は置換アルキル基であればよく、特に制限はない。本発明の一般式１で示されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体の代表的な例としては、トリメチロ−ルプロパンなどがある。【０００９】本発明のトリス（ヒドロキシメチル）誘導体の微生物酸化に使用される微生物は、高い収率と選択率でジメチロ−ルカルボン酸を生成せしめる、キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する菌株である。これら各属に属する菌株のうち、キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属に属するものとしてはキサントバクタ−・オウトトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ） ＡＴＣＣ ３５６７４が、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属に属するものとしてはミコプラナ・ジモルファ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ） ＡＴＣＣ ２１７５９、ミコプラナ・ブラタ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｂｕｌｌａｔａ） ＡＴＣＣ ４２７８が、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属に属するものとしてはアセトバクタ−・リクファシエンス（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ） ＩＡＭ １８３５ が、グルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属するものとしてはグルコノバクタ−・インダストリウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｉｎｄｕｓｔｒｉｕｓ） ＡＴＣＣ １２３０２、グルコノバクタ−・オキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｏｘｙｄａｎｓ） ＡＴＣＣ ３３４４６、グルコノバクタ−・ロズウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｏｓｅｕｓ） ＡＴＣＣ １４９６０、グルコノバクタ−・サボキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｓｕｂｏｘｙｄａｎｓ） ＡＴＣＣ ６２１、グルコノバクタ−・セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｃｅｒｉｎｕｓ） ＡＴＣＣ １２３０３、グルコノバクタ−・スクレロイデウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｓｃｌｅｒｏｉｄｅｕｓ） ＩＡＭ １８４２、グルコノバクタ−・アルビダス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ａｌｂｉｄｕｓ） ＩＦＯ ３２５１、グルコノバクタ−・ジオキシアセトニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｄｉｏｘｙａｃｅｔｏｎｉｃｕｓ） ＩＦＯ ３２７１、グルコノバクタ−・グルコニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｇｌｕｃｏｎｉｃｕｓ） ＡＴＣＣ ９３２４、グルコノバクタ−・ノノキシグルコニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｎｏｎｏｘｙｇｌｕｃｏｎｉｃｕｓ） ＡＴＣＣ ４３９８３が好適な菌株として挙げられる。なお、これらの菌株は何れも公知のものであり、各分譲機関より容易に入手することができる。【００１０】これらの微生物は、一般式１に示すトリス（ヒドロキシメチル）誘導体のメチロール基を酸化して一般式２に示すジメチロ−ルカルボン酸誘導体に変換する能力を有する限り、野生株、変異株、若しくは細胞融合又は遺伝子操作法などの遺伝子的手法により誘導される組み換え株など、何れの株でも用いることができる。【００１１】これらの微生物の培養は、通常資化し得る炭素源、窒素源、各微生物に必須の無機塩、栄養等を含有させた培地を用いて行われる。培養時のｐＨは、４〜８の範囲が、温度は２０〜３５℃の範囲が好ましい。培養は１日〜１週間程度好気的に行われる。このようにして培養した微生物は、培養液、分離菌体、菌体破砕物、更には精製した酵素として反応に使用される。また、常法に従って、菌体又は酵素を固定化して使用することもできる。【００１２】トリス（ヒドロキシメチル）誘導体の微生物酸化反応の条件は、反応液中のトリス（ヒドロキシメチル）誘導体の濃度が０．０５〜１０ｗｔ％の範囲であることが好ましく、１〜５ｗｔ％の範囲であることがより好ましい。トリス（ヒドロキシメチル）誘導体に対する微生物の使用量は、乾燥菌体として重量比０．００５〜５の範囲が好ましく、０．１〜２の範囲がより好ましい。反応温度は１５〜４０℃の範囲が好ましく、２５〜３０℃の範囲がより好ましい。反応時間は１時間〜１４日の範囲が好ましく、１日間〜７日間がより好ましい。反応ｐＨは４〜８が好ましく、５〜７の範囲がより好ましい。また、反応は撹拌下、好気的に行なうことが望ましい。【００１３】本発明におけるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体の微生物酸化反応で生成したジメチロ−ルカルボン酸誘導体は、反応終了後、菌体を反応液から遠心分離又は濾過膜などの通常の固液分離手段により分離し、例えば、分離液を濃縮して、ジメチロ−ルカルボン酸誘導体を結晶化させるといった方法により、容易に分離、精製することができる。【００１４】【実施例】以下、本発明を実施例によってさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。実施例１次の組成の培地を調製し、この培地３００ｍｌを１Ｌ三角フラスコに入れ、滅菌後、キサントバクタ−・オウトトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ） ＡＴＣＣ ３５６７４を接種し、３０℃で２日間振とう培養を行った。培地組成（ｐＨ７．０）ソルビト−ル ５０ｇバクトペプトン １０ｇ酵母エキス ５ｇ蒸留水 １０００ｍｌ培養終了時、培養液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で２．７であった。この培養液１２．６ｍｌから、遠心分離により集菌し、トリメチロ−ルプロパンを０．１ｇ含む５０ｍＭリン酸カリウムバッファ−を２０ｍｌ加え反応液を調製した。反応液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で１．７であった。これを３０℃で２５日間振とうした。反応液を高速液体クロマトグラフィ−により分析した結果、トリメチロ−ルプロパンの反応率は８７％であり、ジメチロ−ルブタン酸の選択率は９８％であった。【００１５】実施例２微生物をミコプラ−ナ ジモルファ （Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ） ＡＴＣＣ ２１７５９に代えてその他は実施例１と同様な操作を行って培養した。培養終了時、培養液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で５．４であった。この培養液１４８．１ｍｌから、遠心分離により集菌し、トリメチロ−ルプロパンを０．１ｇ含む５０ｍＭリン酸カリウムバッファ−を２０ｍｌ加え反応液を調製した。反応液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で４０であった。これを３０℃で１４日間振とうした。反応液を高速液体クロマトグラフィ−により分析した結果、トリメチロ−ルプロパンの反応率は９４％であり、ジメチロ−ルブタン酸の選択率は９７％であった。【００１６】実施例３微生物をグルコノバクタ−・インダストリウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｉｎｄｕｓｔｒｉｕｓ） ＡＴＣＣ １２３０２に代えて実施例１と同様な培地で、この培地３００ｍｌを入れた１Ｌ三角フラスコを２０個使用して２５℃で３日間振とう培養した。培養終了時、培養液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で３．５であった。この培養液４５７１．４ｍｌから、遠心分離により集菌し、１％トリメチロ−ルプロパン水溶液１０００ｍｌを加え反応液を調製した。反応液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で１６であった。反応液を発酵槽に入れて空気を吹き込みながら、アンモニア水を添加してｐＨ６．８にコントロ−ルし、２５℃で７日間撹拌して反応を行った。反応液を高速液体クロマトグラフィ−により分析した結果、トリメチロ−ルプロパンの反応率は９９％であり、ジメチロ−ルブタン酸の選択率は９９％であった。【００１７】実施例４微生物をグルコノバクタ−・インダストリウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｉｎｄｕｓｔｒｉｕｓ） ＡＴＣＣ １２３０２に代えて実施例１と同様な培地を用いて２５℃で３日間振とう培養した。培養終了時、培養液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で３．５であった。この培養液７４．３ｍｌから、遠心分離により集菌し、トリメチロ−ルエタンを０．２ｇ含む１００ｍＭリン酸カリウムバッファ−を２０ｍｌ加え反応液を調製した。反応液の濁度は、６６０ｎｍでの吸光度で１３であった。これを２５℃で３日間振とうした。反応液を高速液体クロマトグラフィ−により分析した結果、トリメチロ−ルエタンの反応率は８５％であり、ジメチロ−ルプロパン酸の選択率は９９％であった。【００１８】【発明の効果】微生物酸化法に用いる生体触媒として、本発明のキサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を用いることにより、トリス（ヒドロキシメチル）誘導体よりジメチロ−ルカルボン酸誘導体を極めて高い収率と選択率で製造することが可能となり工業の発展に寄与する。 一般式１で示されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体を酸化して一般式２で示されるジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造するに当たって、メチロ−ル基を酸化する能力有する、キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を用いることを特徴とする、ジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。但し、一般式１及び２中のＲは水素原子、アミノ基、アルキル基、又は置換アルキル基である。 キサントバクタ−属に属する細菌が、キサントバクタ−・オウトトロフィカス（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）である、請求項１記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。 ミコプラナ属に属する細菌が、ミコプラナ・ジモルファ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｄｉｍｏｒｐｈａ）、又はミコプラナ・ブラタ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ ｂｕｌｌａｔａ）である、請求項１記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。 アセトバクタ−属に属する細菌が、アセトバクタ−・リクファシエンス（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）である、請求項１記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。 グルコノバクタ−属に属する細菌が、グルコノバクタ−・インダストリウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｉｎｄｕｓｔｒｉｕｓ）、グルコノバクタ−・オキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｏｘｙｄａｎｓ）、グルコノバクタ−・ロズウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｏｓｅｕｓ）、グルコノバクタ−・サボキシダンス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｓｕｂｏｘｙｄａｎｓ）、グルコノバクタ−・セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｃｅｒｉｎｕｓ）、グルコノバクタ−・スクレロイデウス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｓｃｌｅｒｏｉｄｅｕｓ）、グルコノバクタ−・アルビダス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ａｌｂｉｄｕｓ）、グルコノバクタ−・ジオキシアセトニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｄｉｏｘｙａｃｅｔｏｎｉｃｕｓ）、グルコノバクタ−・グルコニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｇｌｕｃｏｎｉｃｕｓ）、又はグルコノバクタ−・ノノキシグルコニカス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｎｏｎｏｘｙｇｌｕｃｏｎｉｃｕｓ）である、請求項１記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。 キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、又はグルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を培地中で培養し、得られた培養液、菌体、又は菌体処理物を一般式１で表されるトリス（ヒドロキシメチル）誘導体に作用させる、請求項１〜５の何れかに記載のジメチロ−ルカルボン酸誘導体の製造方法。 【課題】微生物を利用してトリス（ヒドロキシメチル）誘導体からジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造する収率及び選択率に優れた方法を提供する。【解決手段】トリス（ヒドロキシメチル）誘導体を酸化してジメチロ−ルカルボン酸誘導体を生成する能力を有する微生物として、キサントバクタ−（Ｘａｎｔｈｏｂａｃｔｅｒ）属、ミコプラナ（Ｍｙｃｏｐｌａｎａ）属、アセトバクタ−（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、グルコノバクタ−（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細菌を培地中で培養し、得られた培養液、菌体または菌体処理物にトリス（ヒドロキシメチル）誘導体を作用させ、ジメチロ−ルカルボン酸誘導体を製造する。【選択図】 なし