生命科学関連特許情報
| タイトル： | 特許公報(B2)_成長ホルモン分泌促進組成物 |
| 出願番号： | 2003057850 |
| 年次： | 2010 |
| IPC分類： | A61K 31/197,A61K 31/198,A61K 35/74,A61P 3/00,A61P 5/10,A61P 17/00,A61P 19/00,A61P 21/00,A61P 37/04 |
特許情報キャッシュ
堀江 健二 横越 英彦 東口 伸二 金 武祚 JP 4596304 特許公報(B2) 20101001 2003057850 20030304 成長ホルモン分泌促進組成物 株式会社ファーマフーズ 500101243 堀江 健二 横越 英彦 東口 伸二 金 武祚 20101208 A61K 31/197 20060101AFI20101118BHJP A61K 31/198 20060101ALI20101118BHJP A61K 35/74 20060101ALI20101118BHJP A61P 3/00 20060101ALI20101118BHJP A61P 5/10 20060101ALI20101118BHJP A61P 17/00 20060101ALI20101118BHJP A61P 19/00 20060101ALI20101118BHJP A61P 21/00 20060101ALI20101118BHJP A61P 37/04 20060101ALI20101118BHJP JPA61K31/197A61K31/198A61K35/74 GA61P3/00A61P5/10A61P17/00A61P19/00A61P21/00A61P37/04 A61K 31/00 - 33/327 A61P 1/00 - 43/00,171 A23L 1/27 - 1/308 A61K 8/00 - 8/99 A61Q 1/00 - 99/00 JSTPlus/JMEDPlus/JST7580(JDreamII) CA/MEDLINE/EMBASE/BIOSIS(STN) 国際公開第００／０６４２８３（ＷＯ，Ａ１） 特表２００１−５０５５９０（ＪＰ，Ａ） 特公昭５８−０２６７２６（ＪＰ，Ｂ１） 特開平０７−２２７２４５（ＪＰ，Ａ） 特開２０００−０１４３５６（ＪＰ，Ａ） 特開２００４−１８７５０１（ＪＰ，Ａ） Melis GB et al.，GABAerigic Controlof Anterior Pituitary Function in Humans，GABA and Endocrine Function，米国，Raven Press，１９８７年 ７月，pp.219-242 Brainum J ，Amazing Growth Hormone Blasting Compounds，Ironman magazine，１９９８年，pp.92-94 齋藤史郎 木村成昭，ホルモン分泌調節因子としてのアミノ酸，日本臨床，１９９２年，５０巻７号，pp.63-67 早川 潔ら，乳酸菌によるγ−アミノ酪酸の生産，京都府中小企業技術センター技報，１９９８年 ８月１２日，２６巻，pp.47-53 大槻耕三ら，麹納豆（塩納豆、浜納豆、大徳寺納豆）に含まれる総アミノ酸および遊離アミノ酸の分析，京都府立大学学術報告「人間環境学・農学」，２０００年，５２号，pp.1-6 Rao et al.，Amino Acid Composition And Nutritional Implications of Milk Fermented by Various Lactic Cultures，Journal of Food Quality，１９８２年，５巻，pp.235-243 植田志摩子，市販味噌のタンパク質・水分・食塩含量および遊離アミノ酸について，帯広大谷短期大学紀要，１９９８年，３５号，pp.49-55 金子憲太郎ら，遊離アミノ酸組成からみた日韓両国民の嗜好の相違（第１報），調理科学，１９９１年，２４巻１号，pp.16-26 山本（前田）万里ら，茶葉中食物繊維等の熟度による変動，茶業技術報告，１９９３年１１月 ４日，７９号，pp.118-119 吉村美香ら，東南アジアの伝統的発酵食肉製品ネムチュアの特徴，日本食品科学工学会誌，１９９８年，４５巻１０号，pp.603-610 3 FERM BP-10487 2004269361 20040930 8 20060220 松波 由美子 【０００１】【発明の属する技術分野】本発明は乳酸菌醗酵から生産されるγ―アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）を含有する成長ホルモン分泌促進組成物に関する。更に上記成長ホルモン分泌促進組成物を含有する食品及び化粧品に関する。【０００２】【従来の技術】成長ホルモン（ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ：以下ＧＨと記す）は脳の視床下部で作られ、血液にのって全身に運ばれる。このホルモンは、生体内での成長を促す役割をすることが知られている。具体的には、筋肉を作り、骨を伸ばし、また体内の様々な化学反応を促進することが報告されている。実際成長ホルモンをヒトに注射すると、筋肉、骨格の増強、脂肪の減少、皮膚の若返り、免疫力の回復などの効果が認められている。【０００３】しかしその反面、ＧＨの注射は自己が持つＧＨの分泌力を低下させ、合成ＧＨへの依存性を高めてしまう危険性が指摘されている為、投与は極限られた疾病時にしか使用されないのが現状である。【０００４】一方、γ―アミノ酪酸（γ−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ：以下ＧＡＢＡと記す）はＧＨの分泌促進作用をもつことが報告されている（Ｆ．Ｃａｖａｇｎｉｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｉｃａ １９８０，９３，１４９−１５４）。本Ｃａｖａｇｎｉｎｉ等の報告ではＧＡＢＡを５ｇから１８ｇ摂取することで成長ホルモン分泌が促進される事を報告している。【０００５】ＧＡＢＡは、近年発芽玄米などの流行により一般的に広く知られるようになったアミノ酸の一種であり、野菜、果物をはじめ発酵食品に至るまで自然界の動植物に幅広く含まれており、我々の食生活の中で通常摂取されている食品成分のひとつである。一方医薬効果も非常に高く、１日３ｇの摂取で頭部外傷後遺症に伴う諸症状（頭痛、頭重、昜疲労性、のぼせ感、耳鳴り、記憶障害、睡眠障害、意欲低下）に対して改善効果が認められている。従って、上記術のように健常人に対し１日３ｇ以上もの高濃度ＧＡＢＡの摂取は、副作用も実際報告されているため現実的な量ではない。【０００６】しかしＧＡＢＡを実際に摂取できる量（１０ｍｇから３０００ｍｇ）の投与では、顕著なＧＨ分泌促進効果が期待できない。又ＧＨ由来の筋肉、骨格の増強、脂肪の減少などの生理効果も本摂取量では期待できない。【０００７】一方バリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンなどもＧＨ促進効果があることが報告されている。しかし、上記述の成長ホルモンの促進が報告されているアミノ酸も単独ではＧＡＢＡ同様高濃度摂取しなければ筋肉、骨格の増強などの生理効果まで期待できない。【０００８】又バリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンのアミノ酸は、消化管並びに脳から吸収される際競合しあうため、上記述アミノ酸同士の組み合わせによる相乗効果は通常得られない。【０００９】【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、より生理効果の高いＧＨ分泌促進組成物を提供することを目的とする。更にアミノ酸と乳酸菌発酵ＧＡＢＡと組み合わせることで、最も生理効果の高いＧＨ分泌促進組成物を提供することを目的とする。【００１０】【課題を解決するための手段】本発明者等は鋭意検討した結果、純品ＧＡＢＡよりも乳酸菌発酵したＧＡＢＡの方がより効果的にＧＨを上昇させることを見出した。【００１１】又バリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンなどのアミノ酸は、いずれもＧＨ分泌促進作用が報告されているが、通常消化管及び脳に取り込まれる際競合しあうため、組み合わせて摂取しても相乗効果は期待できない。しかし、驚くべきことに乳酸菌醗酵したＧＡＢＡとバリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンの内１つ又は２つ以上との組み合わせは、拮抗することなくＧＨ分泌を飛躍的に促進するといった相乗効果を初めて見出した。【００１２】その結果、乳酸菌醗酵したＧＡＢＡとバリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンの内１つ又は２つ以上との組み合わせにより、低濃度の摂取でも、蛋白合成能を向上することができた。故に本発明は、効果的に成長ホルモン分泌促進させる組成物を提供することにある。【００１３】又本発明の食品及び化粧品は、前記成長ホルモン分泌促進組成物を含有することを特徴とする。【００１４】本発明によれば、副作用の心配が全くなく、経口摂取によって筋肉、骨格の増強、脂肪の減少、皮膚の若返り、免疫力の回復などの生理効果が期待できる食品、及び化粧品を提供できる。【００１５】【発明の実施の形態】本発明の成長ホルモン分泌促進組成物は、ＧＡＢＡを含有する組成物である。【００１６】本発明におけるＧＡＢＡを含有する組成物とは、乳酸菌醗酵により生産されるＧＡＢＡが望ましい。更に好ましくは、ラクトバチルス属の細菌から醗酵法で生産されるＧＡＢＡのことであり、最も好ましいのはラクトバチルス ヒルガルディーＫ−３株の細菌から醗酵法で生産されるＧＡＢＡである。【００１７】上記述の乳酸菌醗酵した溶液は、適宜凍結乾燥やスプレードライにて乾燥し粉末化しても構わない。特に限定するものではないが、ＧＡＢＡの含有量は液状では５％〜３０％であり、粉末状では１０％〜９０％である。【００１８】上記術ＧＡＢＡの生理効果が期待できる１日当たりの有効摂取量は、１０ｍｇ〜３０００ｍｇが好ましい。より好ましくは、５０ｍｇ〜１０００ｍｇであり、更に好ましくは１００ｍｇ〜５００ｍｇである。【００１９】バリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンの内１つ又は２つ以上の物質を含有することを特徴とするＧＨ分泌促進組成物とは、ＧＡＢＡと上記術アミノ酸の１つ又は２つ以上含有する複合組成物の事をいう。【００２０】ＧＨ分泌促進組成物におけるバリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンの内１つ又は２つ以上アミノ酸の含有量は特に限定するものではないが、ＧＨ分泌促進組成物中１０〜９０％含まれる事が好ましい。より好ましくは６０〜９０％であり、更に好ましくは５０〜９０％である。【００２１】本発明の食品及び化粧品は、上記述成長ホルモン分泌促進組成物を１０ｍｇ〜５０００ｍｇ含有することが好ましく、更に好ましくは１００ｍｇ〜１０００ｍｇであり、最も好ましいのは５０ｍｇ〜１０００ｍｇである。【００２２】上記食品としては、特に制限はなく、例えば清涼飲料、スポーツ飲料、ヨーグルト、錠菓、顆粒品、チョコレート、ガム、スープ類、おかゆ、味噌などが挙げられる。【００２３】上記化粧品としては、特に制限はなく、例えばクリーム、ローション、ジェルなどが挙げられる。【００２４】【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００２５】実施例１乳酸菌発酵ＧＡＢＡの調製表１に示す割合で各成分を含有する発酵原料（ｐＨ５．０）５０Ｌを、９０℃で１０分間加熱殺菌した後、キムチ由来の乳酸菌（ラクトバチルス ヒルガルディーＫ−３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４８７））培養液５０ｍＬを接種し、３０℃で３日間培養した。なお、発酵終了後の発酵液のＧＡＢＡ含量は５１ｇ／Ｌであった。この発酵液を９０℃で１０分間加熱殺菌した後、濾過助剤を加えてろ過し、得られたろ液を真空濃縮機で濃縮した後、凍結乾燥機にて乾燥し、粉砕して粉末化して乳酸菌発酵ＧＡＢＡ組成物（ＧＡＢＡ含量：６５質量％）を得た。【００２６】【表１】【００２７】尚、ＧＡＢＡ醗酵原料としてはグルタミン酸ソーダの他にグルタミン酸及び小麦グルテン、焼酎粕タンパク等をグルタミン酸原としても差し支えない。【００２８】試験例１ＧＡＢＡ濃度の測定ＧＡＢＡ濃度は、以下の方法により測定した。【００２９】各試料を０．２Ｎクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ２．２）で適宜希釈後、遠心分離又はろ過して固形物を除去し、測定試料とした。ＧＡＢＡの含量はアミノ酸含量測定の常法に従って高速液体クロマトグラフで以下の条件で分析した。【００３０】使用機器：（株）島津製作所製の高速液体クロマトグラフＬＣ−９Ａ分析用カラム：強酸性陽イオン交換樹脂カラムＳｈｉｎ−ｐａｃｋ Ｉｓｃ−０７Ｎａ型移動層緩衝液：（株）島津製作所製のアミノ酸移動層キットＮａ型移動層流量：０．３ｍｌ／分反応層１：０．０４％次亜塩素酸ナトリウム溶液（ｐＨ１０のホウ酸−炭酸緩衝液５００ｍｌに対して次亜塩素酸０．２ｍｌ）反応層２：（株）島津製作所製のアミノ酸分析キットＯＰＡ試薬反応層流量：０．２ｍｌ／分検出：蛍光検出 Ｅｘ３４８ｎｍ、Ｅｍ４５０ｎｍ【００３１】実施例２ＧＡＢＡ投与によるＧＨへの影響クリーン動物ラット、ウィスター系雄、４週齢を用い、ＧＡＢＡを投与した際のＧＨへの影響確認試験を行った。ＧＡＢＡサンプルとしては、ＧＡＢＡ試薬（和光）と実施例１より得られた乳酸菌発酵ＧＡＢＡ（ファーマギャバ５０；（株）ファーマフーズ研究所）粉末を用いた。【００３２】水に各ＧＡＢＡサンプルを懸濁させ、ＧＡＢＡとして１００ｍｇ／１００ｇ体重になるよう経口ゾンデによる投与試験を以下の試験群で行った。【００３３】１群 ＧＡＢＡ試薬投与２群 乳酸菌発酵ＧＡＢＡ投与【００３４】各サンプルを投与後、０分、３０分、６０分、１２０分後に屠殺し、血中ＧＡＢＡ濃度の変動を調べた（データは省略）。その結果、血中のＧＡＢＡ濃度の推移はほぼ同様であった。【００３５】更に同じ血液を用い、ラットＧＨ量をＥＬＩＳＡ法（ＲＡＴ ＧＲＯＷＴＨ ＨＯＲＭＯＮＥ ＥＮＺＹＭＥ ＩＭＭＵＮＯＡＳＳＡＹ ＫＩＴ：フナコシ）にて調べた。本結果を図１に示す。【００３６】本結果より、ＧＡＢＡ純品試薬と乳酸菌発酵ＧＡＢＡ投与は、ほぼ同様の血中ＧＡＢＡ濃度の推移が認められたにもかかわらず、興味深いことにＧＡＢＡ純品試薬より乳酸菌発酵ＧＡＢＡの群の方がＧＨの分泌促進効果が認められた。【００３７】実施例３ＧＡＢＡ及びその他アミノ酸との組み合わせ投与によるＧＨへの影響クリーン動物ラット、ウィスター系雄、４週齢を用い、ＧＡＢＡ及びバリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、ヒスチジンの内１つ又は２つ以上アミノ酸を同時に投与した際のＧＨへの影響確認試験を行った。ＧＡＢＡサンプルとしては、乳酸菌発酵ＧＡＢＡ（ファーマギャバ５０；（株）ファーマフーズ研究所）粉末を用いた。ＣＭＣ水に各サンプルを懸濁させ、ＧＡＢＡとして１００ｍｇ／１００ｇ体重になるよう経口ゾンデによる投与試験を以下の試験群で行った。更にバリン：ロイシン：イソロイシンは１：２：１になる様混合し、分岐鎖アミノ酸混合物（以下ＢＣＡＡと記す）とし、混合物として１００ｍｇ／１００ｇ体重になるよう経口ゾンデによる投与試験を以下の試験群で行った。アルギニンも１００ｍｇ／１００ｇ体重になるよう投与した。【００３８】１群 水投与（コントロール）２群 乳酸菌発酵ＧＡＢＡ投与（ＧＡＢＡ）３群 分岐鎖アミノ酸混合物投与（ＢＣＡＡ）４群 アルギニン投与（Ａｒｇ）５群 分岐鎖アミノ酸投与＋乳酸菌発酵ＧＡＢＡ投与（ＢＣＡＡ＋ＧＡＢＡ）６群 分岐鎖アミノ酸投与＋アルギニン投与（ＢＣＡＡ＋Ａｒｇ）【００３９】各群経時的に０分、３０分後に屠殺し、血中のＧＨ量を実施例２同様ＥＬＩＳＡ法にて分析した。その結果を図２に示す。【００４０】更に同様の試験をリジン、ヒスチジンについても実施した（データは省略）。【００４１】本結果より、ＧＡＢＡ、分岐鎖アミノ酸、アルギニン、リジン、ヒスチジンは、ＧＨの分泌を促進することが示された。しかし、ＧＡＢＡ以外のアミノ酸の組み合わせは、逆にＧＨの分泌を抑制する経口が認められた。しかし、ＧＡＢＡとそれ以外のアミノ酸との組み合わせは、相乗効果をもたらすことが本試験により示された。【００４２】実施例４ＧＡＢＡ及びその他アミノ酸との組み合わせ投与によるＲＮＡへの影響【００４３】蛋白合成能の指標として、肝臓中のＲＮＡ量をＰＣＲ法（関谷ら、『ＰＣＲ最前線』１９９６年）により測定した。【００４４】試験は実施例３で得られた肝臓を用いて分析を行った。結果を図３に示す。【００４５】更に同様の試験をリジン、ヒスチジンについても実施した（データは省略）。【００４６】以上の結果から、肝臓中のＲＮＡ量は各群ほとんど差が認められなかったが、興味深いことに、唯一ＢＣＡＡと乳酸菌発酵ＧＡＢＡを組み合わせた群において、肝臓中のＲＮＡ量の増加が認められた。【００４７】実施例４以下特に限定するものではないが、本発明の成長ホルモン分泌促進組成物を含有する食品及び化粧品の処方例を挙げる。【００４８】（１）顆粒状食品の処方例還元麦芽糖 ７１ｍｇ結晶セルロ−ス ７０ｍｇショ糖エステル ９ｍｇ本発明組成物 ２００ｍｇ（ＧＡＢＡとして５０ｍｇ、ＢＣＡＡとして１００ｍｇ含有）【００４９】（２）化粧品の処方例ローション １０００ｍｌ本発明組成物 ２００ｍｇ（ＧＡＢＡとして５０ｍｇ、ＢＣＡＡとして１００ｍｇ含有）【００５０】【発明の効果】以上説明した様に本発明によれば、安全な適切量の経口摂取によって筋肉、骨格の増強、脂肪の減少、皮膚の若返り、免疫力の回復などの生理効果が期待できる食品及び化粧品を提供でき、本発明の産業的利用価値は非常に大きい。【図面の簡単な説明】【図１】ラットの血中ＧＨ濃度の経時変化を示す図である。【図２】ラットの血中ＧＨの変動を示す図である。【図３】ラット肝臓中ｍＲＮＡ量の変動を示す図である。 グルタミン酸ソーダ、グルタミン酸、小麦グルテン及び焼酎粕タンパクから選ばれる少なくとも１種をグルタミン酸原として、ラクトバチルス ヒルガルディーＫ−３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４８７）から発酵法で生産されるγ−アミノ酪酸を含有する乳酸菌発酵組成物を有効成分として含有することを特徴とする成長ホルモン分泌促進用組成物。 さらに分岐鎖アミノ酸混合物（バリン：ロイシン：イソロイシン＝１：２：１）を含有する請求項１に記載の成長ホルモン分泌促進用組成物。 γ−アミノ酪酸と前記分岐鎖アミノ酸混合物を１：１〜２（質量比）で含有する請求項３記載の成長ホルモン分泌促進用組成物。