生命科学関連特許情報
| タイトル： | 特許公報(B2)_モナコリンＫの抽出方法 |
| 出願番号： | 2000212079 |
| 年次： | 2008 |
| IPC分類： | C12P 17/06,C12N 1/14,C12R 1/645 |
特許情報キャッシュ
廉屋 巧 田邊 伸和 西村 稔 JP 4049975 特許公報(B2) 20071207 2000212079 20000713 モナコリンＫの抽出方法 グンゼ株式会社 000001339 廉屋 巧 田邊 伸和 西村 稔 20080220 C12P 17/06 20060101AFI20080131BHJP C12N 1/14 20060101ALI20080131BHJP C12R 1/645 20060101ALN20080131BHJP JPC12P17/06C12N1/14 BC12P17/06C12R1:645C12N1/14 BC12R1:645 C12P 17/06 CA/BIOSIS/MEDLINE/WPIDS(STN) JMEDPlus/JST7580/JSTPlus(JDream2) 特開２０００−６０５３６（ＪＰ，Ａ） LAZAROVA V. et al.，Studies on the extraction and the lactonization of lovastatin in the process of isolation from the fermentation broth of Aspergillus terreus，Pharmazie，１９９８年，53(10)，pp.727-728 1 2002027996 20020129 5 20050608 植原 克典 【０００１】【発明の属する技術分野】本発明は、コレステロールの低下作用を有するモナコリンＫを、これを含む紅麹から効率的に抽出する方法を提供するものである。【０００２】【従来の技術】紅麹は穀類にモナスカス属の菌株を繁殖させて得た麹であり、中国、台湾などでは紅酒、老酒、紅腐乳などの醸造原料として利用されており、また、消化を助け、血行を良くする漢方生薬としても古くから用いられている。かかる紅麹のある種の菌がコレステロール低下物質であるモナコリンＫを生産することが知られ（特公昭５９−２５５９９号公報）、また、紅麹自体にもコレステロール低下作用があることが示されている（特公昭６０−４４９１４号公報）ことから、紅麹の上記した作用は主にモナコリンＫによるものと考えられる。よって、モナコリンＫを紅麹より抽出濃縮したエキスは、紅麹のコレステロール作用を濃縮したものとなり、紅麹以上の作用を有し、食品素材として用いる場合は少量の使用で効果が期待でき、紅麹以上に食品への使用範囲が広がる素材となり得る。【０００３】モナコリンＫはメタノール、エタノール、プロパノール、アセトン、酢酸エチル、ベンゼンに可溶であり、水、ヘキサン、石油エーテルに不溶な物質であることは知られている。よって、紅麹からのモナコリンＫ抽出に用いる溶媒は、食品としての安全性も考慮した場合、エタノールが最も優れるといえる。しかしながら、単にエタノールを用いても効率良くモナコリンＫを得ることができなかった。【０００４】【発明が解決しようとする課題】本発明はかかる点、ある特定条件によって効率良くモナコリンＫを抽出することが可能であることを見出し、その結果、高濃度のモナコリンＫを含むエキスを得ることを可能としたものである。【０００５】【課題を解決するための手段】しかるに、本発明は抽出溶媒として、エタノール含量が４０〜８０％（ｖ／ｖ）の範囲内にある含水エタノールを用いることに特徴を有するモナコリンＫの抽出方法の提供に関する。【０００６】【発明の実施の形態】本発明で用いることができる紅麹は、モナコリンＫを含む紅麹であれば如何なるものでも良く、従って、その製造に用いた紅麹菌、麹原料、製造方法（固体培養法、液体培養法）、製造後の処理（熱処理、乾燥、粉末化）等、種類、条件等を問わないが、特に好ましい紅麹を例示するなら、紅麹菌にモナスカス・ピローサス（Monascus pilosus）IFO4520、IFO4480、モナスカス・プビゲレス（Monascus pubigerus）IFO4521、モナスカス・パープレウス（Monascus purpureus）ATCC16385、あるいはモナスカス・エスピー（Monascus sp.）ATCC16370を用い、麹原料に米や胚芽を使用し、無菌的に７日以上静置培養した紅麹が挙げられる。しかしながら、これに限定されるものではない。また、抽出に際し、他の抽出原料、例えば、モナコリンＫは含まないが、モナスカス・アンカ（Monascus anka）を麹菌に用い、モナスカス色素を多く含有した紅麹とともに抽出を行ってもよい。【０００７】モナコリンＫの抽出に用いる溶媒はエタノール含量が４０〜８０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールであり、水にエタノールを加えたり、エタノールに水を加えることにより調整を行なう。また、既に何かのために使用した含水アルコールを回収するなどの方法もある。上記した濃度は、その範囲を下回っても、上回っても共に抽出効率が悪くなるため好ましくない。モナコリンＫを含む麹が４０〜８０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールに接触している時間は、１分以上であれば良く、望ましくは１５分以上である。かかる点から、全抽出時間中必ずしも４０％（ｖ／ｖ）から８０％（ｖ／ｖ）のエタノール含量である必要はなく、例えば、エタノールで抽出した後、４０％（ｖ／ｖ）から８０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールで再抽出しても、また、原料に水を添加後、撹拌しながらエタノールを少しずつ加えてエタノール含量を上げ、最終的には８０％（ｖ／ｖ）以上としてもよい。即ち、本発明は抽出操作中、何れかの過程において、４０％〜８０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールで処理すれば、目的を達成することが可能である。なお、液体培養物の場合においては、培養物に対し０．６７倍から４倍量のエタノールを添加すればよい。即ち、液体培養の場合、基本的には培地全体が水であり、よって、水(培養物)１に対して0.67倍のエタノールを添加すると、液全体はエタノール含量40％（ｖ／ｖ）になり、同様に４倍量のエタノールを添加すると80％（ｖ／ｖ）になる。【０００８】抽出時の温度は室温でよいが、４０〜８０゜Ｃに加熱することにより効率を上げることができる。即ち、抽出に用いる紅麹全体に、仮に100のＭＫがあった場合、室温でその回収率が70％であったとすれば、加熱により80％以上が可能となる。また、溶媒の量は特に制限はないが、紅麹が充分に抽出溶媒に浸かることが好ましい。よって、原料に対し５倍量以上の溶媒を加えることが好ましい。さらに、撹拌の有無、液循環の有無などは、管理面、生産性、コスト等を考慮し、適宜の方法を選択すればよい。抽出後の液と残渣との分離方法、抽出液の濃縮方法、抽出液または濃縮液の粉末化方法も通常よく知られている如何なる方法も用いてもよい。以下、具体的に本発明の実施例をあげて説明するが、本発明はこれらに限定されない。【０００９】【実施例１】精白米を１２時間水に浸漬した後、３０分間水切りし、それに浸漬米に対し７％重量％の割合で米胚芽粉末を添加し、１２１゜Ｃ，１時間蒸煮滅菌し、蒸し米を得た。これにモナスカス・ピローサスＩＦＯ４５２０を無菌的に植菌し、水分率を３５〜４２％に維持しつつ、３０゜Ｃで４日間、続いて２５゜Ｃで３日間、計７日間静置培養した。こうして得られた紅麹を１１０゜Ｃ，２０分間の熱処理により菌および酵素を失活させた後、６０゜Ｃで送風乾燥し、粉砕機にて粉末化した。この米紅麹粉末を用いてエタノール含量が異なる含水エタノール７種により抽出試験を実施した。紅麹５ｇに対し含水エタノールを５０ｍｌ添加し、室温にてマグネットスターラーで撹拌しながら３０分間抽出した。抽出後、抽出液３ｍｌをサンプリングし、遠心分離機にかけ、その上清をメンブランフィルターで濾過し、その濾液のモナコリンＫ含量を高速液体クロマトグラフィーにかけて計測した。その結果、５０％または６０％のエタノール含量でモナコリンＫ濃度が最も高く、その含量は７９μｇ／ｍｌであった。この濃度を１００とし、その他の溶媒での濃度比を図１に示す。かかる図より明らかなように、１００％エタノールに比べ５０％（ｖ／ｖ）および６０％（ｖ／ｖ）のエタノール含量ではモナコリンＫが２．６倍抽出されていた。【００１０】【実施例２】粒状焙煎米胚芽１ｋｇに水を４６０ｍｌ添加し、１２１゜Ｃ，１時間蒸煮滅菌した。これにモナスカス・ピローサスＩＦＯ４５２０を無菌的に植菌し、３４゜Ｃで４日間、続いて２３．５゜Ｃで２４日間、計２８日間培養した。なお、培養３日目に８６ｍｌの補水を行った。培養後、紅麹を６０゜Ｃで送風乾燥し、粒状の乾燥米胚芽紅麹を得た。この紅麹のモナコリンＫ含量を高速液体クロマトグラフを用いて測定した結果、９１２ｍｇ／１００ｇであった。この粒状紅麹を用いてエタノール含量が異なる含水エタノール８種を用い、抽出試験を実施した。紅麹２０ｇに対し含水エタノールを１リットル添加し、室温にてマグネットスターラーで撹拌しながら３０分間抽出した。抽出液と残渣を吸引濾過により分離し、抽出液をエバポレーターにて濃縮し、さらに一晩吸引乾燥した。こうして得られたエキスのモナコリンＫ含量を測定し、得られたモナコリンＫの収率を求めた。その結果を図２に示す。かかる結果より、５０％（ｖ／ｖ）エタノール含量での収率が８３％で最も高く、これに対し、３０％（ｖ／ｖ）エタノール含量では１７％、１００％エタノールでは僅かに６％であった。【００１１】【発明の効果】本発明により、紅麹より効率よくモナコリンＫが得られる。【図面の簡単な説明】【図１】実施例１におけるエタノール含量とモナコリンＫの相対濃度の関係を示した図。【図２】実施例２における各エタノール含量とモナコリンＫの収率の関係を示した図。 モナスカス属に属する菌株を培養して得た紅麹からモナコリンＫを抽出する方法であって、抽出溶媒としてエタノール含量が４０〜８０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールを用いて行なうことを特徴とするモナコリンＫの抽出方法。