生命科学関連特許情報
| タイトル： | 公開特許公報(A)_ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤 |
| 出願番号： | 2014108498 |
| 年次： | 2015 |
| IPC分類： | A61K 36/28,A61K 36/73,A61K 36/18,A61K 36/53,A61P 43/00,A61K 8/97,A61Q 19/00,A61P 17/00,A61P 35/00,A61P 9/12,A61P 9/10,A61P 25/28,A23L 1/30 |
特許情報キャッシュ
八木 雅之 米井 嘉一 篠田 和利 JP 2015224201 公開特許公報(A) 20151214 2014108498 20140526 ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤 学校法人同志社 503027931 株式会社アンチエイジングコミュニケーション 506164198 株式会社ひかわ 505049582 工藤 一郎 100109553 八木 雅之 米井 嘉一 篠田 和利 A61K 36/28 20060101AFI20151117BHJP A61K 36/73 20060101ALI20151117BHJP A61K 36/18 20060101ALI20151117BHJP A61K 36/53 20060101ALI20151117BHJP A61P 43/00 20060101ALI20151117BHJP A61K 8/97 20060101ALI20151117BHJP A61Q 19/00 20060101ALI20151117BHJP A61P 17/00 20060101ALI20151117BHJP A61P 35/00 20060101ALI20151117BHJP A61P 9/12 20060101ALI20151117BHJP A61P 9/10 20060101ALI20151117BHJP A61P 25/28 20060101ALI20151117BHJP A23L 1/30 20060101ALI20151117BHJP JPA61K35/78 TA61K35/78 HA61K35/78 CA61K35/78 QA61P43/00 111A61K8/97A61Q19/00A61P17/00A61P35/00A61P9/12A61P9/10 101A61P25/28A23L1/30 B 7 1 ＯＬ 7 特許法第３０条第２項適用申請有り 刊行物名 「第１４回日本抗加齢医学会総会 プログラム・抄録」 発行所 日本抗加齢医学会 発行日 平成２６年５月１９日 4B018 4C083 4C088 4B018MD48 4B018MD53 4B018ME10 4B018MF01 4C083AA111 4C083BB51 4C083CC03 4C083EE12 4C088AB12 4C088AB26 4C088AB38 4C088AB51 4C088AB99 4C088NA14 4C088ZA16 4C088ZA42 4C088ZA45 4C088ZA89 4C088ZB26 4C088ZC01 本発明は、酸化蛋白質を分解する生体内酵素である酸化蛋白質分解酵素（ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｈｙｄｒｏｌａｓｅ：ＯＰＨ）のＡＧＥｓ分解作用を活性化させる「ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤」、及び、「ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する飲食品や医薬品」などに関する。 生体内での蛋白質糖化反応が皮膚老化、認知症、癌、高血圧、動脈硬化症などの加齢による機能低下や疾病に関与していることが明らかになっている。例えば、糖化反応により蛋白質は褐変化するが、これにより、肌などにくすみが生じることになる。このような加齢により生じる疾病や機能低下をもたらす要因となる糖化反応を阻害するための研究が種々行われている（特許文献１）。また、蛋白質の糖化反応により生じる最終生成物であるＡＧＥs（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を分解することについての研究も行われている（特許文献２）。 本発明者らはＡＧＥｓを分解する作用が、酸化蛋白質を分解する酵素であるＯＰＨに備わることを明らかにした。そして、ＯＰＨのＡＧＥｓ分解作用を増強させる植物抽出物を見出すことができた（特願２０１２−２７７２０９号など）。特許第４１９５８４０号公報特開２００７−１１９３７３号公報 本発明においては、ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性を増強し得る材料をさらに示すことを課題とする。 上記課題を解決するための手段として、以下の発明などを提供する。すなわち、第一の発明として、チコリ、メイグイ、サラシア、シソ葉、ドクダミの抽出物を１種類以上含み、酸化蛋白質分解酵素（ＯＰＨ）のＡＧＥｓ分解活性を増強する「ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤」を提供する。 第二の発明として、第一の発明に記載の「ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤」を含有する飲食品、健康食品、食品添加物、医薬品、医薬部外品、化粧品を提供する。 本発明により、ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性を増強する「ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤」を提供することが可能となる。各サンプルのＡＧＥｓ分解活性増強率の測定結果を示す図 以下、本発明の実施の形態について説明する。なお、本発明は、これらの実施形態に何ら限定されるべきものではなく、その要旨を逸脱しない範囲において、種々なる態様で実施し得る。<実施形態><概要> 本実施形態は、ＯＰＨのＡＧＥｓ分解作用活性について、コントロール（サンプル無添加）と比較して、増強作用が試験によって認められた植物の抽出物を含むＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を提示する。<構成> 本実施形態に係るＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤は、チコリ、メイグイ、サラシア、シソ葉、ドクダミの抽出物を１種類以上含む。ここに挙げられた５種の植物抽出物それぞれは、後述するＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強作用の測定試験を行った３８種サンプルの中で、サンプルを添加しないコントロールに対して優れたＡＧＥｓ分解活性増強作用が認められたものである。 「ＯＰＨ」は、生体組織中に広く分布する生体内酵素であり、酸化蛋白質を優先的に分解するセリンプロテアーゼの一種であり、蛋白質のＮ末端アシル化アミノ酸を遊離する酵素であるアシルアミノ酸遊離酵素（Ａｃｙｌａｍｉｎｏ−ａｃｉｄ−ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ：ＡＡＲＥ）として知られている。 本実施形態における抽出物は、植物のどの部位から抽出したものであってもよく、例えば、全草、花、種子、果実、枝、茎、樹皮、根などから抽出したものであってよい。また、抽出物の性状を限定するものではない。以下に、本実施形態で用いられる植物を説明する。 「チコリ」（Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ ｉｎｔｙｂｕｓ）は、キク科キクニガナ属の植物であり、菊苣とも称される。サンプルとして、乾燥させたチコリの根を原料とする茶外茶であるチコリ茶を用いた。なお、茶外茶とは、チャノキ以外の植物の葉、芽、花、樹皮、根などを材料として水又は湯を注ぎ抽出した飲料のことをいう。 「メイグイ」は、バラ科バラ属の植物であるハマナス（Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ）の中国名である。サンプルとして、メイグイの花のつぼみを乾燥させたものを原料とする茶外茶であるメイグイ茶を用いた。 「サラシア」は、ニシキギ科サラシア属の植物であり、この属には、サラシア・オブロンガ（Ｓａｌａｃｉａ ｏｂｌｏｎｇａ）、サラシア・レティキュラータ（Ｓａｌａｃｉａ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ）などがある。サンプルとして、サラシア・レティキュラータの根や地下茎を原料とする茶外茶であるサラシア茶を用いた。なお、サラシア・オブロンガはインド産やブラジル産のものが知られており、サラシア・レティキュラータはスリランカ産のものが知られている。いずれのサラシアも基本的な性質は同様であるが、サラシア・レティキュラータの方が、糖尿病予防などについての効能がより高いと言われることがある。 「シソ」は、シソ科シソ属の植物であり、この属には、アオジソ（Ｐｅｒｉｌｌａ ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ ｖａｒ. ｃｒｉｓｐａ ｆ. ｖｉｒｉｄｉｓ）、アカジソ（Ｐｅｒｉｌｌａ ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ ｖａｒ. ｃｒｉｓｐａ ｆ. ｐｕｒｐｕｒｅａ）などがある。サンプルとして、アカジソの葉を原料とする茶外茶であるシソ葉茶を用いた。 「ドクダミ」（Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａ）は、ドクダミ科ドクダミ属の植物である。サンプルとして、ドクダミの葉や茎を乾燥させたものを原料とする茶外茶であるドクダミ茶を用いた。 上述した５種の植物抽出物を含有するＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤は、これを含有する飲食品、健康食品、食品添加物、医薬品、化粧品、医薬部外品などとして応用することが可能である。例えば、本実施形態の医薬品や医薬部外品とする場合には、ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を粉体や粒体としカプセルに充填したり、あるいは、賦形剤、結合剤、崩壊剤などを添加して打錠機等を用いて錠剤としてもよい。また、食品添加物や健康食品とする場合には、医薬品などのようにカプセルや錠剤のような形態で提供してもよいし、飲料、調味料、菓子等の各種の食品にＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を添加した態様で提供することもできる。また、利用者が水や湯を注ぐことで喫飲可能となるように製造されたものも飲食物に含まれる。<試験> 本試験は、３８種の植物由来の健康茶を対象として、ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強作用の測定するものである。サンプル調製及び試験方法、結果などについて以下に詳述する。 （１）サンプルの調製 各乾燥サンプル３．７５ｇを恒温水槽中で８０℃に加温した蒸留水１５０ｍＬ中に加えて１時間インキュベートした。その後、抽出液を４５００ｒｐｍで１５分間遠心分離して上清を回収し、サンプル抽出液とした。 （２）ＡＧＥｓ分解活性増強作用の測定 ＯＰＨの反応基質としてはＡＧＥ‐ＨＡＳ（ＡＧＥ化したヒト血清アルブミン）を調製した。すなわち１００ｍｍｏｌ/Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．４） ２５ｍＬ、２ｍｏｌ/Ｌグルコース（Ｇｌｃ）５ｍＬ、４０ｍｇ/ｍＬヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）１０ｍＬ、蒸留水１０ｍＬを混合し、６０°Ｃで４０時間インキュベートした。同様にＯＰＨの反応基質としてＡＧＥ‐Ｃｏｌｌａｇｅｎ（ＡＧＥ化したコラーゲン）を調整した。 ＯＰＨとしてはアシルアミノ酸遊離酵素ＡＡＲＥ（タカラバイオ株式会社）を使用した。ＡＡＲＥ酵素（０．５Ｕ/ｍＬ）は、ＡＡＲＥ酵素０．５Ｕ（Ｕ：酵素活性の単位）を入れたチューブに２５０ｍｍｏｌ/Ｌリン酸ナトリウム緩衝液（酵素の付属品）の５倍希釈溶液を１ｍＬ入れ攪拌して作製した。 ＡＧＥ‐ＨＡＳを反応基質とした際の反応液を、以下の表１に基づいて４種（反応液Ａ−Ｄ）調製し、それぞれ３７°Ｃで１８時間インキュベートした。また、ＡＧＥ‐Ｃｏｌｌａｇｅｎを反応基質とした際の反応液についても、以下の表２に基づいて４種（反応液Ａ−Ｄ）調製し、それぞれ３７°Ｃで１８時間インキュベートした。 インキュベート終了後は、反応液をそれぞれ９６ウェルマイクロプレート（黒）に２００μＬ添加し、マイクロプレートリーダーで励起波長３７０ｎｍ、検出波長４４０ｎｍにおけるＡＧＥｓ由来蛍光を測定した。 各反応液の蛍光値は、５μＬ/ｍＬの０．１Ｎ硫酸キニーネ水溶液の測定値を１０００とした時の相対値を算出した。ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強率は、各反応液の蛍光値を下記の式１に当てはめて求めた。（式１）ＡＧＥｓ分解活性増強率（％）＝｛１−（Ａ−Ｃ−Ｄ）÷（Ｂ−Ｃ）｝×１００ （３）結果 ＡＧＥｓ分解活性増強率の測定結果を図１に示す。図示するように、チコリ、メイグイ、サラシア、シソ葉、ドクダミの抽出物について、ＡＧＥ−ＨＡＳとＡＧＥ−Ｃｏｌｌａｇｅｎのいずれに対してもＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強作用が認められた。<実施形態 効果> チコリ、メイグイ、サラシア、シソ葉、ドクダミの抽出物のいずれか1種類以上を含有させることにより、ＯＰＨのＡＧＥｓ分解を活性化する「ＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤」を提供することが可能となる。 チコリ、メイグイ、サラシア、シソ葉、ドクダミの抽出物を１種類以上含み、酸化蛋白質分解酵素（ＯＰＨ）のＡＧＥｓ分解活性を増強するＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤。 請求項１に記載のＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する飲食品。 請求項１に記載のＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する健康食品。 請求項１に記載のＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する食品添加物。 請求項１に記載のＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する医薬品。 請求項１に記載のＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する化粧品。 請求項１に記載のＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する医薬部外品。 【課題】酸化蛋白質を分解する酵素であるＯＰＨの蛋白質の糖化反応による最終生成物であるＡＧＥｓに対する分解活性を増強するＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を提供することを課題とする。【解決手段】上記課題を解決するために、チコリ、メイグイ、サラシア、シソ葉、ドクダミの抽出物を１種類以上含み、酸化蛋白質分解酵素（ＯＰＨ）のＡＧＥｓ分解活性を増強するＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤及びＯＰＨのＡＧＥｓ分解活性増強剤を含有する飲食品などを提供する。【選択図】図１