生命科学関連特許情報
| タイトル： | 公開特許公報(A)_リポ蛋白リパーゼ、肝性トリグリセリドリパーゼ活性化剤 |
| 出願番号： | 2013084311 |
| 年次： | 2014 |
| IPC分類： | A61K 36/42,A61P 43/00,A61P 1/16,A23L 1/30 |
特許情報キャッシュ
矢澤 一良 熊岡 隆也 高橋 典子 今村 茂行 JP 2014193835 公開特許公報(A) 20141009 2013084311 20130328 リポ蛋白リパーゼ、肝性トリグリセリドリパーゼ活性化剤 有限会社湘南予防医科学研究所 300076688 矢澤 一良 熊岡 隆也 高橋 典子 今村 茂行 A61K 36/42 20060101AFI20140912BHJP A61P 43/00 20060101ALI20140912BHJP A61P 1/16 20060101ALI20140912BHJP A23L 1/30 20060101ALI20140912BHJP JPA61K35/78 SA61P43/00 111A61P1/16A23L1/30 B 3 1 書面 6 4B018 4C088 4B018LB05 4B018LB06 4B018LB07 4B018LB08 4B018LB10 4B018MD52 4B018MD53 4B018MD61 4B018ME04 4B018ME14 4B018MF01 4B018MF07 4C088AB19 4C088AC04 4C088CA03 4C088MA17 4C088MA22 4C088MA23 4C088MA35 4C088MA37 4C088MA41 4C088MA43 4C088MA52 4C088NA14 4C088ZA75 4C088ZC19 本発明は、生体中のリポ蛋白リパーゼ（以下、ＬＰＬと略すことがある。）および肝性トリグリセリドリパーゼ（以下、ＨＴＧＬと略すことがある。）の活性化作用を有する成分及び該成分を含有する組成物並びに該成分を含有する飲食品、又は医薬品に関する。 技術背景 近年、食の欧米化や食生活の乱れ、運動不足、喫煙、飲酒、精神的ストレスなどにより、生活習慣病の患者が増加している。生活習慣病の一番の危険因子は肥満であり、肥満を予防・改善することが重要である。肥満は大きく分けて内臓に脂肪が蓄積する内臓脂肪型肥満と皮膚の下に脂肪が蓄積する皮下脂肪型肥満の２種類があり、特に内臓脂肪は種々の生理活性物質を分泌し、生活習慣病の進展に中心的に働いていることから、内臓脂肪型肥満は皮下脂肪型肥満に比べ、糖尿病、脂質異常症、高血圧等の生活習慣病を発症しやすく、さらにメタボリックシンドロームを引き起こす原因となっている。そして生活習慣病が悪化することにより、致死的な脳梗塞、心筋梗塞などの動脈硬化性疾患を引き起こす可能性が高まる。これらの危険因子でもある肥満を予防・改善するために抗肥満作用を有する効果の高い食品素材が求められている。 ＬＰＬは肝臓以外の脂肪組織や筋肉の血管内皮細胞表面に存在しており、体内に吸収された中性脂肪を含むリポタンパク質の代謝に関与している。またＨＴＧＬは肝臓の血管内皮細胞表面に存在し、これもリポタンパク質代謝に関与している。これら体内に存在するリパーゼの活性化は、高脂質血症、肥満等の予防または治療に有効であると言われている。 ゴーヤ（学名：Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ）はウリ科ツルレイシ属であり、主に熱帯アジア地域に分布し、日本では南西諸島、南九州地方で栽培されているが現在では関東圏まで広い範囲で食用栽培がなされている。つる性の植物で雄花・雌花は黄色、果実は細長く、２０〜５０ｃｍまでに成長し、果皮は細かいイボで覆われている。 ゴーヤの抗肥満に関しては、ゴーヤの乳酸菌発行物及びマグネシウム塩併用による内臓脂肪低減（特許文献１）、ゴーヤ抽出物による脂肪細胞の脂肪蓄積抑制（非特許文献１及び２、３）、ラットにおける高脂肪食による体重増加抑制（非特許文献４）が報告されている。しかしながら、ゴーヤの抽出物に関してＬＰＬ、ＨＴＧＬの活性化作用（脂肪代謝促進作用）についての報告はまだされていない。発明者等はゴーヤの抽出物を動物に経口投与すると、ＬＰＬおよびＨＴＧＬを有意に活性化することを見出し本発明を完成させた。 特開２００８−２５９４９８ Ｐｏｐｏｖｉｃｈ ＤＧ，Ｌｅｅ Ｙ，Ｌｉ Ｌ，Ｚｈａｎｇ Ｗ．（２０１１）Ｊ Ｍｅｄ Ｆｏｏｄ，１４（３），２０１−８．Ｎｅｒｕｒｋａｒ ＰＶ，Ｌｅｅ ＹＫ，Ｎｅｒｕｒｋａｒ ＶＲ．（２０１０）ＢＭＣ Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ａｌｔｅｒｎ Ｍｅｄ，１０，３４．Ｐｏｐｏｖｉｃｈ ＤＧ，Ｌｉ Ｌ，Ｚｈａｎｇ Ｗ．（２０１０）Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ Ｔｏｘｉｃｏｌ，４８（６），１６１９−２６．Ｈｕａｎｇ ＨＬ，Ｈｏｎｇ ＹＷ，Ｗｏｎｇ ＹＨ，Ｃｈｅｎ ＹＮ，Ｃｈｙｕａｎ ＪＨ，Ｈｕａｎｇ ＣＪ，Ｃｈａｏ ＰＭ．（２００８）Ｂｒ Ｊ Ｎｕｔｒ，９９（２），２３０−９． 本発明は、ＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化作用を有する成分及び該組成物を提供し、ひいては該成分及び組成物を含有する飲食物又は医薬品を提供することにある。 上記の課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、ゴーヤ抽出物に顕著なＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化作用があることを見出した。すなわち本発明は、以下の構成を有する。（１）ゴーヤ由来の成分を含有することを特徴とするＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化剤及び該成 分を含有する組成物（２）ゴーヤ由来の成分が脂溶性成分である前記１記載のＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化剤及び該成分を含有する組成物（３）前記１及び２記載の成分を含有する飲食品又は医薬品 本発明により、ゴーヤの成分を含有することを特徴とするＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化組成物、及び該組成物を含有する飲食物又は医薬品を提供することができる。 本発明においてゴーヤは、果実、又は可食部をそのまま用いてもよく、これらを乾燥した乾燥体、もしくは乾燥後粉砕した粉末を用いることもできる。また、これらをアルコールなどの有機溶媒で抽出した抽出物を用いることもできる。 本発明に関わるＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化剤を製造するには、上記の方法で製造したゴーヤの成分を用いることができ、本発明に関わるＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化剤は、種々の剤型での投与が可能であり、例えば、経口投与剤としては錠剤、顆粒剤、散在、カプセル剤、ソフトカプセル剤等の固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳化剤等の液剤、凍結乾燥剤等があげられ、これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。上記医薬品無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、でんぷん、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルでんぷん、エチレングリコール、ポリエキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミン酸、アルブミン、水、生理食塩水等が挙げられる。また、必要に応じて安定化剤、滑沢剤、懸濁剤、乳化剤、結合剤等の慣用の添加剤を適宜添加することができる。本研究に関わるＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化剤（脂肪代謝促進剤）においてＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化剤（脂肪代謝促進剤）の成分の投与量は、患者の年齢、体重、症状、疾患の程度、投与スケジュール、製剤形態等により、適宜選択され、決定されるが、例えば、一日当たり生薬等価量として０．０１ｍｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされ、一日数回に分けて投与してもよい。 また、ゴーヤは、毒性を有することは報告されていないことから、ＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化を目的とした飲食品として摂取することもできる。ゴーヤの成分は、特定保健用食品、栄養機能食品、又は健康食品等として位置付けることができる。機能性食品としては、例えば、ゴーヤの成分に適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて、食品に適した状態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル剤、ソフトカプセル剤、ペースト状等に形成したものを用いることができる。この飲食品は、そのまま食用に供してもよく、また種々の食品（例えばハム、ソーセージ、かまぼこ、ちくわ、パン、バター、粉乳、菓子等）に添加して使用したり、水、酒類、果汁、牛乳、清涼飲料水等の飲物に添加して使用してもよい。かかる食品の形態における本発明のゴーヤの成分の摂取量は、年齢、体重、症状、疾患の程度等により適宜選択・決定されるが、例えば、一日当たり生薬等価量として０．０１ｍｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされ、一日数回に分けて投与してもよい。 以下に本発明を詳細に説明するために実施例を挙げるが、本発明はこれによって何ら限定されるものではない。 ゴーヤ抽出物の調製ゴーヤの果実５００グラムを３ｍｍ幅で輪切りに切り、中身の綿と種子を取り除き、乾燥機（４５℃）で１日乾燥した。乾燥したものにクロロホルム：メタノール＝２：１、３００ｍｌを加え、２日間室温で静置した。濾過により固形分を除去した抽出後に１／３容の精製水を加え、分液ロートで下層を分取した。本抽出液をロータリーエバポレーターにより減圧乾固し固形分０．６５グラムを得た。 ゴーヤ抽出物のＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性に及ぼす影響ゴーヤ抽出物をマウスに７週間連続投与におけるＬＰＬ、ＨＴＧＬへの影響について検討を行った。５週齢、雌のｄｄＹマウス（ｎ＝６）にＳＴＤ群：標準食（自由摂取）と４％アラビアガム溶液（８ｍｌ／ｋｇ）経口投与、ＨＦＤ群：高脂肪食（自由摂取）と４％アラビアガム溶液（８ｍｌ／ｋｇ）経口投与、Ｓａｍｐｌｅ群：高脂肪食（自由摂取）とゴーヤ抽出物（１０００ｍｇ／８ｍｌ／ｋｇ）経口投与した。実験開始後４８日目に体内のＬＰＬとＨＴＧＬを測定するためにヘパリンを尾静脈より投与し、１５分後に尾採血により血漿を採取し、下記の方法によってＬＰＬ，ＨＴＧＬ活性を測定した。９６ｗｅｌｌプレートの各ウエルにＨＴＧＬ＋ＬＰＬの活性測定にアポ−ＣＩＩを加えた反応液１［ジオレイルグリセロール０．７ｍＭ（ラウリルジメチルアミノベタイン０．０３％），ＡＴＰ３ｍＭ，ＭｇＣｌ２３ｍＭ，ＣａＣｌ２１．５ｍＭ、モノグリセリドリパーゼ０．７５Ｕ／ｍｌ，グリセロールキナーゼ０．７５Ｕ／ｍｌ，グリセロール３リン酸オキシダーゼ３７．５Ｕ／ｍｌ，Ｎ，Ｎ−ビス−（４−スルホブチル）−３−メチルアニリン−２Ｎａ０．０５％，ペルオキシダーゼ３Ｕ／ｍｌ，アスコルビン酸オキシダーゼ１０Ｕ／ｍｌ，アポＣ−ＩＩ２ｍｇ／ｍｌ］４０μｌ、またＨＴＧＬのみの活性測定にアポ−ＣＩＩを添加していない反応液１試薬４０μｌに血漿サンプル２μｌを加え混和し、３７℃、５分間インキュベートした。その後、反応液２［５０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ９．５）、０．１５％の４−アミノアンチピリン］２０μｌを加え、３７℃、１０分間インキュベートした後、反応停止液として２％ＳＤＳ溶液０．２ｍｌを加え、反応を停止させ、５５０ｎｍのキノンイミン色素の吸光度を測定した。吸光度から、血漿サンプルのＬＰＬ，ＨＴＧＬ活性（Ｕ／Ｌ）を計算した。 図１から明らかなように、ゴーヤ抽出物を長期間投与することにより、高脂肪食摂取によるＬＰＬ活性の減少を抑制（活性化）することが認められた。また、図２から明らかなようにゴーヤ抽出物を長期間投与することにより、ＨＴＧＬを活性化することが認められた。この結果から、ゴーヤ可食部抽出物はＬＰＬ、ＨＴＧＬの活性化に有効であることが明らかになった。 本発明により、ゴーヤの成分を含有することを特徴とするＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化組成物及び該組成物を含有する飲食品又は医薬品を提供することが可能となった。 リポ蛋白リパーゼ活性への影響を示したものである。（実施例２） 肝性リパーゼ活性への影響を示したものである。（実施例２） ゴーヤ由来の成分を含有することを特徴とするリポ蛋白リパーゼ、肝性トリグリセリドリパーゼ活性化剤及び該成分を含有する組成物 ゴーヤ由来の成分が脂溶性成分である請求項１記載のリポ蛋白リパーゼ、肝性トリグリセリドリパーゼ活性化剤及び該成分を含有する組成物 請求項１及び２記載の成分を含有する飲食品又は医薬品 【課題】ＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化作用を有する成分及び該組成物を提供し、ひいては該成分及び組成物を含有する飲食物又は医薬品を提供する。【解決手段】ゴーヤ抽出物に顕著なＬＰＬ、ＨＴＧＬ活性化作用があることを見出した。【選択図】図１