生命科学関連特許情報
| タイトル： | 公表特許公報(A)_プラチコジン−Ｄを含有する皮膚美白剤 |
| 出願番号： | 2010545805 |
| 年次： | 2011 |
| IPC分類： | A61K 8/60,A61Q 19/02,A61P 17/16,A61K 31/704,C07H 15/256 |
特許情報キャッシュ
パク ドク−フン ユン エウン−スン リー ジョン−ソン JP 2011511063 公表特許公報(A) 20110407 2010545805 20090123 プラチコジン−Ｄを含有する皮膚美白剤 バイオスペクトラム インコーポレイテッド 509193821 関根 武 100104684 渡部 温 100100413 パク ドク−フン ユン エウン−スン リー ジョン−ソン A61K 8/60 20060101AFI20110311BHJP A61Q 19/02 20060101ALI20110311BHJP A61P 17/16 20060101ALI20110311BHJP A61K 31/704 20060101ALI20110311BHJP C07H 15/256 20060101ALI20110311BHJP JPA61K8/60A61Q19/02A61P17/16A61K31/704C07H15/256 Z AP(BW,GH,GM,KE,LS,MW,MZ,NA,SD,SL,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,MD,RU,TJ,TM),EP(AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MK,MT,NL,NO,PL,PT,RO,SE,SI,SK,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IS,JP,KE,KG,KM,KN,KP,KR,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LT,LU,LY,MA,MD,ME,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PG,PH,PL,PT,RO,RS,RU,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,ST,SV,SY,TJ,TM,TN,TR,TT,TZ,UA,UG,US,UZ,VC,VN,ZA,ZM,ZW KR2009000374 20090123 WO2009082185 20090702 18 20090709 4C057 4C083 4C086 4C057AA06 4C057BB04 4C057DD01 4C057JJ52 4C083AA111 4C083AA112 4C083AD531 4C083AD532 4C083CC03 4C083CC04 4C083CC05 4C083CC06 4C083CC12 4C083CC23 4C083DD08 4C083DD17 4C083DD23 4C083DD27 4C083DD30 4C083DD31 4C083DD41 4C083EE16 4C086AA01 4C086AA02 4C086EA19 4C086GA17 4C086MA01 4C086MA04 4C086MA13 4C086MA17 4C086MA22 4C086MA23 4C086MA28 4C086MA43 4C086MA63 4C086NA14 4C086ZA89 本発明は、皮膚美白用組成物に係り、より詳しくは、製品安定性に優れるうえ、皮膚に対する副作用なしで安全に使用することができ、メラニン生成を抑制して色素沈着阻害効果に優れたプラチコジン−Ｄ(platycodin-D)を含有する皮膚美白用化粧料および薬学的組成物に関する。 ヒトの皮膚色は、皮膚内部のメラニンの濃度と分布によって決定されるが、遺伝的な要因の外に、太陽紫外線や疲労、ストレスなどの環境的または生理的条件によっても影響される。人体皮膚のメラニン細胞で生成されるメラニン色素は、黒い色素とタンパク質との複合形態を有するフェノール系高分子物質であって、紫外線により発生する皮膚損傷を遮断する重要な役割を果たしている。メラニンの生合成にはメラニン細胞に存在するチロシナーゼ(tyrosinase)の作用が最も重要であると報告されている。チロシナーゼは、アミノ酸の一種であるチロシン(tyrosine)をメラニン重合体生成の中間産物、すなわちＤＯＰＡ、ドーパキノン(dopaquinone)に転換することにより、皮膚黒化過程に核心的な役割を果たす。ところが、メラニンの生成経路は公知になっているが、チロシナーゼが作用する以前の段階であるメラニン合成を誘導するメカニズムについては未だ詳しく解明されていない。 このようなメラニン合成が皮膚内で起き過ぎると、皮膚トーンが黒くなるうえ、シミやソバカスなどが発生する。よって、皮膚内のメラニン色素の合成を阻害させることにより、皮膚トーンを明るくして皮膚の美白を実現することができるうえ、紫外線、ホルモンおよび遺伝的原因に起因して発生するシミやソバカスなどの皮膚過色素沈着症を改善させることができる。 したがって、従来では、例えばヒドロキノン(hydroquinone)やアスコルビン酸(ascorbic acid)、コウジ酸(kojic acid)、グルタチオン(glutathione)などのチロシナーゼに対して阻害活性を有する物質を用いて、皮膚美白効果または皮膚過色素沈着症を改善した。ところが、ヒドロキノンは、所定の美白効果を発揮するが、皮膚刺激性が激しくて配合量を極少量に制限しなければならないという問題点がある。アスコルビン酸は酸化し易いため、このアスコルビン酸を配合した化粧料は変色、変臭するなどの問題が発生する。コウジ酸は、溶液内で不安全なので、化粧料の製造工程が複雑になるという欠点がある。また、グルタチオンやシステインなどのチオール系化合物は、特有の不快な匂いを有するうえ、経皮吸収にも問題点があり、これらの配糖体および誘導体も極性が高いので、化粧料の配合成分として使用するには難しい。その他に、ビタミンＣの場合は、水溶液状態で容易に酸化してしまい、持続的な効果を出さないという問題点がある。このため、最近では天然生薬抽出物を含有した皮膚美白用組成物が開発されている。ところが、この天然生薬抽出物を含有した皮膚美白用組成物は、大部分が色を帯びていて配合上における問題点があり、有効成分が同定されなかったため、製品製造の際に同一の効果を期待することができないという問題点がある。 一方、プラチコジン−Ｄは、桔梗の根に存在するトリテルペノイドサポニン(triterpenoid saponin)化合物の一つであって、抗炎効果、抗肥満効果、コレステロール低下効果、痛覚抑制効果があるものと報告されている。また、米国特許出願第２００２／０１９７３３４号ではプラチコジン−Ｄが糖尿病に効果的であることを開示しており、国際公開ＷＯ２００５／００７１８１号ではプラチコジン−Ｄが、新血管生成を抑えるメカニズムによって癌を抑制する効果を示すことを開示している。このように天然物質であるプラスチコジン−Ｄの効能に対する多様な研究が行われている。米国特許出願第２００２／０１９７３３４号国際公開ＷＯ２００５／００７１８１号 本発明の目的は、プラチコジン−Ｄを含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供することにある。 本発明の他の目的は、プラチコジン−Ｄを含有する皮膚美白用薬学的組成物を提供することにある。 本発明の別の目的は、前記組成物を、ヒトを含んだ哺乳動物の皮膚に塗布することにより、皮膚を美白する方法を提供することにある。 本発明によれば、プラチコジン−Ｄは、既存の美白剤の主成分であるビタミンＣに比べて高い細胞内のチロシナーゼ活性に対する阻害効果およびメラニン生成抑制効能を有する。また、人体に対する安定性の試験結果、プラチコジン−Ｄは、いずれの毒性または刺激も発生しないため、人体への使用の際に安全な物質であると判明された。よって、本発明のプラチコジン−Ｄは皮膚美白のための化粧料や医薬などに有用に使用できる 一つの様態において、本発明は、プラチコジン−Ｄを含有する皮膚美白用化粧料組成物に関する。 本発明のプラチコジン−Ｄは、下記化学式１の構造を有する、植物由来のトリテルペノイドサポニン系(triterpenoid saponin)の一種である。 本発明のプラチコジン−Ｄは、天然供給源（例えば、桔梗など）から分離したもの、あるいは天然供給源からのトリテルペノイドサポニンを化学的改質によって製造したもの、あるいは化学的に合成して製造したもの、あるいは商業的に製造した商品（例えば、Ｐｈａｒｍａｖａｎ社のプラチコジン−Ｄ）である。一つの具体的な例として、本発明のプラチコジン−Ｄは桔梗の根から水、アルコールまたはアセトンなどの溶媒を用いて０℃〜５０℃で抽出および分離することができる。このような抽出および分離方法は、当業者には公知である。 本発明のプラチコジン−Ｄの美白効果を調べるために、既存の美白化粧品の原料として使われているビタミンＣと比較して、美白物質のスクリーニングに一般に用いられる細胞内のチロシナーゼ活性およびメラニン生成抑制効能を測定した結果、同一の濃度で本発明のプラチコジン−ＤがビタミンＣより約１０％以上優れたチロシナーゼ活性抑制およびメラニン生成抑制効能を示した。したがって、本発明のプラチコジン−Ｄは優れた美白効果を有する。 本発明の前記化学式１のプラチコジン−Ｄが、当業界で通常行われる置換基の付加または置換反応によって得られる誘導体のうち、メラニン生成抑制および／またはチロシナーゼ活性抑制による皮膚美白効果を示す誘導体を含むということは、当業界の技術水準を考慮すれば、当業者には明白なことである。 本発明の皮膚美白用化粧料組成物において、プラチコジン−Ｄの含量は、全体組成物に対して０．００１〜１０重量％、好ましくは０．００１〜５重量％である。プラチコジン−Ｄの含量が０．００１重量％未満の場合には美白効果が非常に微弱であり、プラチコジン−Ｄの含量が１５重量％超過の場合には含量の増加による効果の増加が微々であり、剤形上の安定性が確保されないという問題点がある。 本発明の皮膚美白用化粧料組成物は、有効成分としてのプラチコジン−Ｄ以外に、化粧料組成物に通常用いられる成分を含むことができる。例えば、抗酸化剤、安定化剤、溶解化剤、ビタミン、顔料および香料などの通常の補助剤および／または担体がある。また、前記化粧料組成物は、皮膚美白効果を増進させるために皮膚吸収促進物質をさらに含むことができる。 本発明の化粧料組成物は、当業界で通常製造されるいずれの剤形としても製造でき、例えば、溶液、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、クリーム、ローション、パウダー、石鹸、界面活性剤含有クレンジング、オイル、粉末ファウンデーション、乳濁液ファウンデーション、ワックスファウンデーションおよびスプレーなどに剤形化できるが、これに限定されない。好ましくは柔軟化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、クレンジンクリーム、クレンジンフォーム、クレンジンウォーター、パック、スプレーまたはパウダーの剤形として製造できる。 本発明の剤形がペースト、クリームまたはゲルの場合には、担体成分として動物性油、植物性油、ワックス、パラフィン、澱粉、トラカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、タルクまたは酸化亜鉛などが利用できる。 本発明の剤形がパウダーまたはスプレーの場合には、担体成分としてラクトース、タルク、シリカ、アルミニウムヒドロキシド、カルシウムシリケートまたはポリアミドパウダーが利用でき、特にスプレーの場合にはさらにクロロフルオロヒドロカボン、プロパン／ブタン、またはジメチルエーテルなどの推進剤を含むことができる。 本発明の剤形が溶液または乳濁液の場合には、担体成分として溶媒、溶解化剤または乳濁化剤が使用され、例えば、水、エタノール、イソプロパノール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコールまたはソルビタンの脂肪酸エステルがある。 本発明の剤形が懸濁液の場合には、担体成分として、例えば水、エタノールまたはプロピレングリコールなどの液状の希釈剤、例えばエトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル、およびポリオキシエチレンソルビタンエステルなどの懸濁剤、微小結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天またはトラカントなどが利用できる。 本発明の剤形が界面活性剤含有クレンジングの場合には、担体成分として、脂肪族硫酸アルコール、脂肪族硫酸アルコールエーテル、スルホコハク酸モノエステル、イセチオン酸、イミダゾリニウム誘導体、タウリン酸メチル、サルコシン酸、脂肪酸硫酸アミドエーテル、アルキルアミドベタイン、脂肪族アルコール、脂肪酸グリセリド、脂肪酸ジエタノールアミド、植物性油、ラノリン誘導体またはエトキシル化グリセロール脂肪酸エステルなどが利用できる。 別の様態として、本発明は、前記プラチコジン−Ｄを含有する皮膚美白用薬学的組成物に関する。 本発明の薬学的組成物において、プラチコジン−Ｄは全体組成物に対して０．００１〜１０重量％、好ましくは０．００１〜５重量％で含むことができる。 前記薬学的組成物は、治療目的に応じて薬学分野で通常の製剤として剤形化でき、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、乳濁剤、硬膏剤、軟膏剤、スプレー剤、油剤、ゲル剤、酒精剤、チンキ剤、浴剤、リニメント剤、ローション剤、パッチ剤、パッド剤、クリーム剤などに剤形化できる。好ましくは、患部に直接塗布する、局所投与を目的とする皮膚外用剤であって、軟膏剤、ローション剤、スプレー剤、ジェルなどの形態である。また、これらの皮膚外用剤は、治療部位に直接適用できる支持基剤(support base)またはマトリックスなどに含まれ得る。支持基剤の例にはガーゼまたは包帯が含まれる。前記剤形化に使用される薬学的組成物はコロイド状または乾燥粉末状などであり得る。 軟膏剤として剤形化する場合、皮膚の表面温度、皮膚のｐＨ、経皮水分消失(transdermal water loss)値、表皮の総脂質値などを考慮しなければならず、例えばワセリン、流動パラフィン、パラフィン、プラスティベース、シリコン、豚脂、植物油、ワックス、精製ラノリン(purified lanolin)などの油脂性基剤、水溶性基剤、乳剤性基剤、懸濁性基剤などと配合して剤形化する。このような軟膏剤は、酸化防止剤（例えば、トコフェロール、ＢＨＡ、ＢＨＴ、ＮＤＧＡなど）、防腐剤（例えば、フェノール性物質、クロロブタノール、ベンジルアルコール、パラベン類、安息香酸など）、保湿剤（例えば、グリセリン、プロピレングリコン、ソルビトール）、溶解補助剤（例えば、エタノール、プロピレングリコール）、軟化補助剤（例えば、流動パラフィン、グリセリン、プロピレングリコール、界面活性剤など）などの添加剤と共に配合できる。 ローション剤として剤形化する場合、溶液型、懸濁型または乳剤型などのローション剤に製造できる。特に皮膚に塗布するローションの場合、例えば２００ｃｐｓ〜５００ｃｐｓの粘性を持つように製造することができ、塗布の際に柔らかい感じを与えるために湿潤剤、例えばグリセリン、プロピレングリコールなど を配合して製造することが好ましい。 スプレー剤として剤形化する場合、水分散した濃縮物または湿潤粉末が分散するように推進剤などが添加剤と共に配合できる。 パッチ剤として剤形化する場合、皮膚による化合物の吸収を増加させるために、吸収促進剤を使用することができる。 本発明の薬学的組成物は、薬学的組成物の製造に通常用いられる適切な担体、 賦形剤および希釈剤をさらに含むことができる。 本発明の薬学的組成物の剤形としては、通常の方法によって、例えば散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾルなどの経口型剤形、例えば軟膏、クリームなどの外用剤、坐剤および滅菌注射溶液などを始めとして、薬学的製剤に適したいずれの形態にも剤形化して使用することができる。 本発明に係る薬学的組成物は、ラット、マウス、家畜、ヒトなどの哺乳動物に非経口、経口などの様々な経路で投与できる。投与の全ての方式は予想できるが、例えば、経口、直腸、または静脈、筋肉、皮下、子宮内経膜または脳血管内注射によって投与できる。この際、非経口経路としては経皮投与が好ましく、それらの中でも局所塗布が最も好ましい。前記局所投与は全身効果をもたらす経皮伝達を含む。局所投与する場合、賦形剤（例えば、ラクトース、澱粉、セルロース、乳糖、ポリエチレングリコールなど）、潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリル、滑石など）、保存剤（例えば、塩化ベンジルアルコニウムなど）などを含むことができる。 本発明の薬学的組成物は、薬学的に有効な量で投与する。本発明において、「薬学的に有効な量」とは、医学的治療または予防に適用可能な合理的な恵み／危険の比率で疾患を治療または予防するのに十分な量を意味する。有効用量の水準は、疾患の種類およびその重症度；薬物の活性；患者の年齢、体重、健康および性別；患者の薬物に対する敏感度；使用された特定抽出物の投与時間、投与経路および排出比率；治療期間；および使用された特定抽出物と配合または同時使用される薬物を含んだ要素およびその他の医薬分野における公知の要素によって決定できる。一般に、外用剤の場合、１日当たり１．０〜３．０ｍＬで１日１〜５回１か月以上塗布し続けることがよい。また、経口型剤形の場合、患者の年齢、性別および体重によって異なるが、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの量を１日１回〜数回投与することができる。 別の様態として、本発明は、前記化粧料組成物または薬学的組成物を、ヒトを含んだ哺乳動物の皮膚に塗布して皮膚を美白する方法に関する。 本発明において、「美白」とは、老化、紫外線、汚染した環境などの多様な原因によってメラニン色素が沈着して発生する皮膚の黒化を防止または改善することをいう。 具体的実施において、本発明のプラチコジン−Ｄは、皮膚美白を目的として化粧品などの原料として従来から使用されているビタミンＣと比較しても、約１０％以上チロシナーゼ活性抑制およびメラニン生成抑制効能に優れた。したがって、本発明の化粧料組成物および薬学的組成物に有効成分として含まれるプラチコジン−Ｄは、皮膚美白効果が非常に優れるため、前記組成物を皮膚に塗布して皮膚を効果的に美白することができる。 本発明の具体的実施において、プラチジン−Ｄに対する皮膚累積刺激試験結果、プラチコジ−Ｄは天然物質であって人体に無害な物質であることが判明された。よって、本発明のプラチコジン−Ｄは、毒性および副作用が殆どないので、長期使用の際にも安心して使用することができ、特に前述したような化粧料組成物および薬学的組成物などに安全に適用することができる。 以下、実施例によって本発明をさらに詳しく説明する。これらの実施例は本発明をより具体的に説明するためのもので、限定するものではない。 実施例１：プラチコジ−Ｄによるメラニン生成抑制効果の測定 ラットの色素細胞（Ｂ１６メラノーマ細胞）を用いてプラチコジン−Ｄ（Ｓｉｇｍａ）によるメラニン生成抑制効果を測定し、その測定された効果を、メラニン生成を抑制するものと知られているビタミンＣによるメラニン生成抑制効果と比較した。 本実験は、マウスメラノーマ（Ｂ１６ Ｆ１０）細胞を６ウェルプレートにウェル当たり１×１０５個で接種し、１０％のＦＢＳ(fetal bovine serum)が含有されたＤＭＥＭ培地中で、５％ＣＯ２および３７℃で細胞がウェルの底部に約８０％付着するまで培養した。培養の後、培地を除去し、プラチコジン−ＤおよびビタミンＣが適正の濃度で希釈されたＤＭＥＭ培地で取り替え、５％ＣＯ２、３７℃で３日間培養した。プラチコジン−Ｄの濃度範囲は細胞毒性のない０．１μＭ、０．５μＭ、１μＭに決定した。ビタミンＣの濃度範囲は、プラチコジン−Ｄと同様に、０．１μＭ、０．５μＭ、１μＭとした。前記培養の後、培地を除去し、収集された細胞をＰＢＳ(phosphate buffered saline)で洗浄し、それをトリプシンで処理して細胞を回収した。回収された細胞はヘマトサイトメーターを用いて細胞数を測定し、５，０００〜１０，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した後、上澄液を除去してペレットを得た。この細胞ペレットを６０℃で乾燥させた後、１０％ＤＭＳＯの含有された１Ｍ水酸化ナトリウム液１００μＬを入れて６０℃の恒温槽で細胞内のメラニンを得た。この液を用いてマイクロプレートリーダー(microplate reader)によって４９０ｎｍで吸光度を測定し、細胞一定数当たりのメラニン量を求めた。その結果を表１に示した。 表１に示すように、同一の処理濃度ではプラチコジン−ＤがビタミンＣより優れたメラニン生成抑制率を示した。 実施例２：プラチコジン−Ｄによる細胞内チロシナーゼ活性抑制効果の測定 ラットの色素細胞（Ｂ１６メラノーマ細胞）を用いてプラチコジン−Ｄによるメラニン生成抑制効果を測定し、この測定された効果を、メラニン生成を抑制するものと知られているビタミンＣによる細胞内チロシナーゼ活性抑制効果と比較した。 本実験は、マウスメラノーマ(murine melanoma)（Ｂ１６ Ｆ１）細胞を６ウェルプレートにウェル当たり１×１０５個で接種し、１０％のＦＢＳ(fetal bovine serum)が含有されたＤＭＥＭ培地中で、５％ＣＯ２および３７℃で細胞がウェルの底部に約８０％以上付着するまで培養した。培養の後、培地を除去し、プラチコジン−ＤおよびビタミンＣが適正の濃度で希釈されたＤＭＥＭ培地で取り替え、５％ＣＯ２、３７℃で３日間培養した。プラチコジン−ＤおよびビタミンＣの濃度範囲は、実施例１と同様に、０．１μＭ、０．５μＭ、１μＭであった。前記培養の後、培地を除去し、収集された細胞をＰＢＳ(phosphate buffered saline)で洗浄し、それをトリプシンで処理して細胞を回収した。回収された細胞はヘマトサイトメーターを用いて細胞数を測定した後、５，０００〜１０，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、上澄液を除去してペレットを得た。この細胞ペレットを、ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒを用いて粉砕した後、１２，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して上澄液を収集した。この液を用いてマイクロプレートリーダーによって４９０ｎｍで吸光度を測定し、細胞一定数当たりのチロシナーゼ活性を求めた。その結果を表２に示した。 表２に示すように、同一の処理濃度ではプラチコジン−ＤがビタミンＣより優れた細胞内チロシナーゼ活性抑制率を示した。 実施例３：動物水準における美白効果評価 ヒトと同様に紫外線によって色素沈着が起こるものと知られている褐色モルモット(Tortoiseshell guinea pig; Brown guinea pigs)を用いて、プラチコジン−Ｄによる美白効果を測定した。 前記褐色モルモットに紫外線（ＵＶ）による色素沈着を誘発させるために、褐色モルモットの腹上の毛を除去した皮膚に、３×３ｃｍ２の正方形の開口が設けられた遮光用アルミニウム箔を接着させた後、ＳＥランプ（波長２９０〜３２０ｎｍ、東芝）で紫外線を照射した（総照射エネルギー量＝１３５０ｍＪ／ｍ２）。紫外線照射の後、アルミニウム箔を剥がし、次の方法で試料（プラスチコジン−ＤおよびビタミンＣ）を塗布した。紫外線照射２、３日の後に色素沈着が現れ、約２週後には最高に到達した。その時から各試料を塗布した。 塗布は１日１回または２回の回収で５０日間続けた。試料は特定の溶媒（プロピレングリコール：エタノール：水＝５：３：２の混合溶媒）を用いて溶解および希釈し、綿棒で塗布し、他の部位には必ず溶媒を塗布する対照部位を設けた。効果判定と共に、累積刺激性も観察した。 色差計（ミノルタＣＲ２００２クロマメーター）を用いて皮膚の黒白程度を測定して効果を判定し、その判定結果を表３に示した。色を表示するにはＬ＊Ａ＊Ｂ＊表色計を使用し、本発明ではＬ＊値を指標とした。Ｌ＊値は標準白板で較正し、Ｌ＊値は１つの部位に５回以上繰り返し測定し、色素沈着を均等にした。塗布開始時点と塗布完了時点における皮膚色の差異（Ｌ＊）を求め、その値から効果を判定した。Ｌ＊値を試料塗布部位と対照群部位に対して求めた後、それらを比較すれば、美白物質の効果を確認することができる。その結果を表３に示した。 ［実験式１］ Ｌ＊＝塗布○○日後のＬ＊値−塗布開始日のＬ＊値 表３より、プラチコジン−Ｄは、ビタミンＣより優れた美白効果を示し、試験物質塗布試験途中で累積刺激が観察されなかったため、安全性にも優れることが分かる。 実施例４：プラチコジン−Ｄの人体皮膚に対する安全性確認実験 ４−１．プラチコジン−Ｄを含有する皮膚外用剤の製造 前述したように美白効果に優れるものと判明されたプラチコジン−Ｄが人体皮膚に対しても安全なのかを確認するために、プラチコジン−ＤおよびビタミンＣを含有した皮膚外用剤を製造し、これによる皮膚安全性検証実験を行った。 プラチコジン−ＤとビタミンＣを含有した皮膚外用剤は表４の成分含量で製造した。表４において、対照群はチロシナーゼ阻害剤を含有していない皮膚外用剤であり、それぞれ試験群１と試験群２はプラチコジン−ＤとビタミンＣを含有した皮膚外用剤である。 皮膚外用剤の製造のために、精製水、グリセリンおよびブチレングリコールを混合して７０℃で溶解し（水相パート）、前記３つの成分とトリメタノールアミン以外の残りの成分を７０℃で溶解した（油相パート）。前記油相パートを水相パートに添加し、ホモミキサー（日本の特殊機化社）で攪拌して１次乳化し、ここにトリメタノールアミンを最終的に添加した。混合液に生成された気泡を除去した後、室温に冷却させて皮膚外用剤を製造した。 ４−２．皮膚累積刺激試験 実施例４−１で製造した各皮膚外用剤を用いて、健康な３０名の成人を対象として上腕部位に隔日で合計９回の２４時間累積貼布を行うことにより、プラチコジン−Ｄが皮膚に刺激を与えるか否かを測定した。 貼布方法は、フィンチャンバー(Finn chamber)（Ｅｐｉｔｅｓｔ Ｌｔｄ、ピンランド）を用いた。チャンバーに前記各皮膚外用剤を１５μｌずつ滴下した後、貼布を行った。毎回皮膚に現れた反応の度合いを実験式２をによって点数化し、その結果を表５に示した。 ［実験式２］ 平均反応度＝｛［反応指数×反応度／総被検者数×最高点数（４点）］×１００｝／検査回数（９回） この際、反応度において、±は１点、＋は２点、＋＋は４点の点数を与え、平均反応度が３未満のときに安全な組成物と判定した。 表５において、試験群１の場合、±、＋、＋＋に該当するヒトの数がそれぞれ１名、０名、０名であり、その他の残りは反応が現れなかった。実験式２によって計算すると、｛［（１×２）／（２０×４）］×１００｝／９＝０．１３であって、平均反応度が０．３７になって３以下になり、安全な組成物と判断された。 したがって、表５に示すように、プラチコジン−Ｄ（試験群１）を含有する皮膚外用剤は、対照群、またはビタミンＣを含有する皮膚外用剤のようにはっきりとした累積刺激様相を示さず、人体皮膚に安全な物質と判定された。 本発明のプラチコジン−Ｄは、既存の美白剤の主成分であるビタミンＣに比べて高い細胞内のチロシナーゼ活性に対する阻害効果とメラニン生成抑制効能を有する。また、人体に対する安定性の試験結果、プラチコジン−Ｄは、いずれの毒性または刺激も発生しないため、人体への使用の際に安全な物質であると判明された。よって、本発明のプラチコジン−Ｄは皮膚美白のための化粧料や医薬などに有用に使用できる。 プラチコジン−Ｄを有効成分として含む、皮膚美白用化粧料組成物。 前記組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、クリーム、ローション、パウダー、石鹸、界面活性剤含有クレンジング、オイル、粉末ファウンデーション、乳濁液ファウンデーション、ワックスファウンデーション、およびスプレーよりなる群から選ばれる剤形を有することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。 プラチコジン−Ｄを有効成分として含む、皮膚美白用薬学的組成物。 プラチコジン−Ｄが全体組成物の総重量に対して０．００１〜１０重量％で含まれる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。 請求項１または２の組成物を、ヒトを含んだ哺乳動物の皮膚に塗布する段階を含む皮膚美白方法。 プラチコジン−Ｄが全体組成物の総重量に対して０．００１〜１０重量％で含まれる、請求項５に記載の組成物。 本発明は、プラチコジン−Ｄを有効成分として含む皮膚美白用化粧料および薬学的組成物に関する。本発明のプラチコジン−Ｄは、皮膚に対する副作用なしで安全に使用できるうえ、メラニン生成を抑制して色素沈着阻害効果に優れる。よって、プラチコジン−Ｄを有効成分として含有する組成物は、シミやソバカスなどの改善および皮膚美白に非常に効率よく使用することができる。